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脱落细胞提取器和利用其提取脱落细胞的提取方法

摘要

本发明涉及一种脱落细胞提取器和利用其提取脱落细胞的提取方法。所述脱落细胞提取器包括:支撑装置,该支撑装置具有能够进行支撑的主体,在主体的两端具有两个相对的端面;以及提取装置,该提取装置设置在支撑装置的至少一个端面上,并且包括提取层和保护层,提取层与支撑装置的端面相连接并且能够提取脱落的生物细胞,保护层设置在提取层的外表面上,其中,提取层至少由两部分构成,这些部分的大小彼此不同并且彼此分离开或者彼此能够分离开。通过本发明,建立了一种例如在刑事案件的DNA分析中能够对所提取的生物细胞分别进行DNA分型的装置,并且能够防止在提取过程中提取到污物。

著录项

  • 公开/公告号CN106367325A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2017-02-01

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 张庆霞;刘金杰;

    申请/专利号CN201610809561.5

  • 发明设计人 张庆霞;刘金杰;

    申请日2016-09-08

  • 分类号C12M1/26;C12Q1/68;

  • 代理机构北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人张群峰

  • 地址 100192 北京市海淀区清河龙岗路1号

  • 入库时间 2023-06-19 01:25:36

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-08-21

    未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C12M1/26 授权公告日:20181012 终止日期:20190908 申请日:20160908

    专利权的终止

  • 2018-10-12

    授权

    授权

  • 2017-03-01

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12M1/26 申请日:20160908

    实质审查的生效

  • 2017-02-01

    公开

    公开

说明书

技术领域

本发明涉及微量生物提取领域,具体涉及一种脱落细胞提取器和利用该脱落细胞提取器提取脱落细胞的提取方法。

背景技术

目前,在现场生物物证提取和实验室检验过程中,采用多种方法,例如剪取法、擦拭法、吸附法以及粘取法来提取生物物证。其中,利用胶带粘附提取技术可以方便地提取接触类脱落细胞以进行DNA验证或进行试验。

在目前市场上利用胶带粘附提取的技术中,利用胶带直接粘取渗透性和非渗透性客体表面上的接触类脱落细胞,可以广泛地应用于现场勘查和法庭科学DNA实验室中对微量生物物证的提取和保存。这种脱落细胞粘取器一般包括带有盖的存放管、支撑托、粘取膜以及位于粘取膜之外的保护膜。其使用方法一般为:打开管盖,去除保护膜而将胶膜露出;将胶膜对准检材提取部位,反复粘取10至15次;取样后盖好管盖;在DNA提取区打开管盖,取下胶膜,使膜的粘性面朝向离心管的中轴,放入裂解液的离心管(EP)中,然后按照DNA提取流程进行提取。

脱落细胞粘取而后进行提取的核心在于粘取物尽量准确并且严格防止粘取表面被污染。

然而,现有技术中的脱落细胞粘取器存在的缺点恰恰在于:虽然它们能够粘取脱落细胞,,但是在粘取过程中容易粘上污物,而且容易造成两人或多人的脱落细胞被混合粘取的结果,从而影响DNA的分析效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种脱落细胞提取器和利用其提取脱落细胞的提取方法,其能够克服现有技术的某种或某些缺陷。

本发明的一个方面提供了一种脱落细胞提取器,包括:

支撑装置,该支撑装置具有能够进行支撑的主体,在主体的两端具有两个相对的端面;以及

提取装置,该提取装置设置在支撑装置的至少一个端面上,并且包括提取层和保护层,提取层与支撑装置的端面相连接并且能够提取脱落的生物细胞,保护层设置在提取层的外表面上,

其中,提取层至少由两部分构成,这些部分的大小彼此不同并且彼此分离开或者彼此能够分离开。

根据本发明,建立了一种例如在刑事案件的DNA分析中能够对所提取的生物细胞分别进行DNA分型的装置,并且在传统检验的基础上增加直扩方法,提高微量检材的成功检出率。

优选地,提取层和保护层的横截面形状与它们所附接的支撑装置的端面的横截面形状相同且大小也相同。通过如此设置各部分的横截面,能够防止污染并且方便操作。

根据一个实施例,支撑装置在一个端面上设置有提取装置。根据该具体方案,可以更加方便地进行操作。

优选地,支撑装置在两个端面上均设置有提取装置。根据该实施例,能够节省成本和提高效率。

在本明的一个具体实施例中,提取装置还包括基体层,该基体层位于提取装置的提取层与支撑装置的主体的端面之间,提取层通过该基体层连接到支撑装置。根据该具体方案,能够便于去除提取层并且不易使提取层受到外界环境的污染。

在本发明的另一具体实施例中,提取层包括一个面积较大的部分和至少一个面积较小的部分,较小部分分布于较大部分的大体中央。优选地,提取层包括一个较小部分。通过将提取层设置成具有较大部分和较小部分,能够实现既按照传统方法进行DNA的提取和扩增也能够无需进行DNA提取而直接进行扩增的装置,其可以应用于刑事案件中,例如,前期实验结果的支持

在本发明的另一个具体实施例中,提取层的较小部分的面积在1至4mm2之间。优选地,提取层的较小部分的面积为2mm2。通过如此设置提取层的较小部分,能够将其进行直接扩增。

在本发明的另一个具体实施例中,提取层为双面胶体,能够以粘取的方式提取脱落的生物细胞。根据该实施例,能够方便地操作该脱落细胞提取器。

优选地,较小部分具有圆形形状。当然,该较小部分也可能是其它形状,例如方形等。

根据本发明的另一方面,提供了一种利用以上任一实施例所述的脱落细胞提取器提取脱落细胞的提取方法,包括以下步骤:

去除提取装置的提取层外部的保护层从而露出提取层;

利用提取层提取载体表面上的脱落细胞;

将提取层的较大部分去除并且置入具有裂解液的容器中进行DNA的提取和扩增来获得DNA分型;以及

将提取层的较小部分去除并且直接进行扩增来获得DNA分型。

根据本发明的该方案,提供了一种例如在刑事案件的DNA分析中能够对所提取的生物细胞分别进行DNA分型的装置,并且该方法能够防止在提取过程中提取到污物,从而能够提高DNA分型的精确性。

附图说明

图1为根据本发明的一个具体实施例的脱落细胞提取器的示意图;

图2和图3分别示出了图1中所示的脱落细胞提取器的提取装置的提取层的两种形式。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。

如图1所示,示出了一种根据本发明的脱落细胞提取器。

该脱落细胞提取器包括支撑部(在权利要求中还被描述为支撑装置)1和提取装置2。支撑部1具有能够进行支撑的主体,该主体具有两个相对的端面,提取装置2设置在支撑部1的一个端面上。

图1中所示的支撑部1的形状为圆形并且提取装置2仅设置在支撑部1的一个端面上。但本领域技术人员应该清楚的是,支撑部1的形状不仅限于圆形形状,而是还可以是方形、长方形、椭圆形、不规则形等其它任何形状,只要其方便进行支撑和操作即可;而且,提取装置2不仅限于设置在支撑部1的一个端面上,而是还可以设置在支撑部1的相对的两个端面上。

提取装置2包括提取层21、保护层22和基体层23。基体层23与支撑部1的端面相连接,提取层21通过该基体层23连接到支撑部1并且能够提取脱落的生物细胞,保护层22设置在提取层21的外表面上以保护提取层21的外表面免受污染。

提取层21为双面胶体,其两个表面分别与保护层22和基体层23以可分离的方式相连接,从而提取层21能够以粘取的方式提取脱落的生物细胞。

当然,本领域技术人员应该清楚的是,也可以将提取层21直接连接到支撑部1的端面上,而不设置基体层23。

提取层21、保护层22以及基体层23的横截面形状和大小与它们所附接的支撑部1的端面的横截面形状和大小完全相同,从而能够防止污染并且方便对其进行操作。但本领域技术人员应该清楚的是,提取层21、保护层22和基体层23的横截面形状和大小与它们所附接的支撑部1的端面的横截面形状和大小可以不相同,从而能够方便进行操作。

以下根据图2和图3详细地说明提取层21的结构。

如图2所示,提取层21由两部分构成,即,该提取层21包括一个面积较大的部分211和一个面积较小的部分212。较小部分212分布于较大部分211的大体中央部位,并且,较大部分211和较小部分212彼此分离开。

本领域技术人员将清楚的是,提取层21可以包括一个较大部分211和多个较小部分212,这多个较小部分212分布于较大部分211的中央,并且,较大部分211与较小部分212之间以及各个较小部分212之间彼此分离开。

本领域技术人员还应清楚的是,较大部分211和较小部分212能够彼此分离开,例如,这些部分之间通过设置在局部的连接点等而能够被容易地分离开。

提取层21的较小部分212的面积在1至4mm2之间。进一步优选地,该较小部分212的面积大约为2mm2

图2和图3中所示的提取层21的较大部分211的形状分别为圆形和方形,较小部分212均为圆形形状。

但本领域技术人员应清楚的是,提取层21的较大部分211和较小部分212也可以具有其它形状,例如方形、椭圆等。例如,图3中所示的较大部分211具有方形形状。

以下描述利用根据本发明的脱落细胞提取器来提取脱落的生物细胞的提取方法。

首先,去除提取层21外部的保护层22从而露出提取层21。

然后,利用提取层21提取需要检测的载体表面(图中未示出)上的脱落生物细胞。

而后,将提取层21的较大部分211去除并且置入具有裂解液的EP管(图中未示出)中进行DNA的提取和扩增来获得DNA分型。

另外,将提取层21的较小部分212去除并且直接进行扩增来获得DNA分型。

本发明的脱落细胞粘取器通过改进,将其提取装置做成大圈套小圈的模式,将大圈取下之后放入预先加好裂解液的EP管中,按标准DNA提取流程进行,剩余的小圈(2平方毫米)依旧在支撑部上,拿到DNA实验室后用镊子轻轻撕下,直接放到200微升扩增管中直接扩增。

本发明所具有的优势是:

1、传统的脱落细胞粘取器,虽然粘取的面积较大,但粘取的过程中会粘上污物,而且容易造成两人或多人混合的结果,本发明的脱落细胞粘取器既可以大面积粘取又可以小面积(2mm2)粘取,最后获得单一DNA分型的可能性较大。

2、2mm2的粘取器可以直接放到200微升扩增管中直接扩增,不需要提取,节省了时间和试剂。

从而本发明建立了一种无需提取直接扩增(direct PCR)的方法,可应用于刑事案件中(前期实验结果支持)

当然,上述说明并非是对本发明的限制,本发明也并不仅限于上述举例,本技术领域的技术人员在本发明的实质范围内所做的变化、改型、添加或替换,也应属于本发明的保护范围。

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