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含驯鹿25羟基维生素D-1α羟化酶基因的重组载体构建及表达、分离纯化方法

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本发明涉及含驯鹿25羟基维生素D‑1α羟化酶基因的重组载体及其编码蛋白的表达、分离纯化和活性测定的方法：1)根据从驯鹿的基因组上注释出的25羟基维生素D‑1α羟化酶基因和大肠杆菌密码子偏好性，得到优化后的驯鹿25羟基维生素D‑1α羟化酶基因序列，同理得到根据大肠杆菌密码子偏好性优化后的狍子和羊的25羟基维生素D‑1α羟化酶基因序列，用以作为对照；2)利用设计的引物，通过gibson连接方法，将优化后的驯鹿、狍子、羊25羟基维生素D‑1α羟化酶基因、皮质铁氧还原蛋白基因和NADPH‑皮质铁氧还原蛋白还原酶基因分别构建于大肠杆菌表达载体pET‑28a，获得重组载体。最终检测，含驯鹿25羟基维生素D‑1α羟化酶基因的菌株表达获得酶的催化活性是羊的2倍，是狍子的1.5倍。

著录项

公开/公告号CN109022472A

专利类型发明专利
公开/公告日2018-12-18

原文格式PDF
申请/专利权人嘉兴欣贝莱生物科技有限公司;
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申请/专利号CN201810895567.8
发明设计人王筱;陈贤情;杨月;王文;夏文豪;蒿飞;
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申请日2018-08-08
分类号
代理机构北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙);
代理人李静
地址 314000 浙江省嘉兴市南湖区昌盛南路501号浙江欧美生物科技产业园2幢3层101室
入库时间 2023-06-19 07:46:29

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2019-04-26

发明专利申请公布后的撤回 IPC(主分类):C12N15/70 申请公布日:20181218 申请日:20180808

发明专利申请公布后的撤回
2018-12-18

公开

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