公开/公告号CN112794819A
专利类型发明专利
公开/公告日2021-05-14
原文格式PDF
申请/专利权人 湖南超亟化学科技有限公司;
申请/专利号CN201911104444.9
发明设计人 不公告发明人;
申请日2019-11-13
分类号C07D221/14(20060101);C09K11/06(20060101);G01N21/64(20060101);
代理机构
代理人
地址 417000 湖南省长沙市高新开发区麓天路28号金瑞麓谷科技园C11栋
入库时间 2023-06-19 11:00:24
技术领域
本发明涉及荧光探针，基于分子异构化机理的可用于铁离子特异性检测的新型荧光探针的制备方法，特别还涉及该荧光分子探针在环境和生物体内的铁离子检测方面的应用，属于化学分析、生物分析检测技术领域。
背景技术
铁是人体必要的微量元素之一，在氧气吸收代谢、电子转移、酶催化、神经传导等生物体内的生理过程中均有着至关重要的作用。人体内铁元素的含量过高，可能会引起一系列严重疾病，如肝脏，心脏和胰腺等器官功能障碍、肝炎、甚至癌症。而体内如果铁含量过低，则有可能出现免疫力下降、抗感染力降低、体温调节能力减弱，神经紊乱等疾病。最近有研究表明，Fe
目前，已有原子吸收法、电感耦合等离子发射光谱法、分光光度法、电化学法等传统方法可用于Fe
发明内容
针对现有Fe
本发明的第二个目的在于提供上述荧光分子探针的高效制备方法。
本发明的第三个目的在于提供上述荧光分子探针在检测溶液和生物体内Fe
为了实现上述目的，本发明提供了一种荧光分子探针，具有式I结构：
式（I）
所述荧光探针的制备方法优选为：
以4-溴-1,8-萘二甲酸酐、6-氨基己酸为原料，溶于无水乙醇，120℃下加热回流至反应完成，倒入冰水中，抽滤洗涤滤饼，柱层析干燥后可得淡黄色粉末。将其溶解于DMSO中，加入N-羟基琥珀酰亚胺和无水碳酸钾，90
本发明的合成如下所示：
本发明提供了一种所述荧光探针的应用，可应用于环境和生物体内Fe
本发明提供了一种所述荧光探针测定Fe
上述检测方法，优选的，溶剂体系为PBS:CH
上述检测方法，优选的，pH为7.4。
上述检测方法，优选的，荧光探针浓度为10 μM。
本发明所述荧光探针可以应用于细胞内Fe
相对现有技术，本发明的技术方案带来的有益技术效果：
（1）本发明所涉及的一种检测Fe
（2）本发明所涉及的一种检测Fe
附图说明
【图1】本发明实施中荧光探针的荧光强度随Fe
【图2】本发明实施中荧光探针对Fe
【图3】本发明实施中荧光探针在HeLa细胞内荧光共聚焦成像图。
具体实施方式
以下实施方式旨在进一步阐释说明本发明而不是对本发明的限定。
实施例1
化合物1的合成：
称取4-溴-1,8-萘二甲酸酐（2770 mg，10 mmol）溶于30 mL无水乙醇，向体系中加入6-氨基己酸（1637.5 mg，12.5 mmol）120℃加热反应，TLC监测至反应完全。将反应体系倒入冰水中，有黄色絮状物析出，抽滤并收集、洗涤滤饼，硅胶柱层析纯化，旋蒸除去溶剂后得到淡黄色粉末3369.6 mg，产率86.4 %。
化合物2的合成：
分别向圆底烧瓶中加入化合物1(3120 mg, 8 mmol）、N-羟基琥珀酰亚胺（1012mg，8.8mmol）和无水碳酸钾（3864 mg，4 mmol），并加入适量DMSO溶液溶解，90℃下反应，TLC监测至反应完全。将体系倒入冰水中，用稀HCl溶液调节pH至近中性，用乙酸乙酯萃取，干燥后硅胶柱层析纯化，旋蒸除去溶剂后得到淡黄色固体2108.5 mg，产率80.6 %。
化合物3的合成
分别向圆底烧瓶中加入化合物2（1962 mg，6 mmol），以及六次甲基四胺（4200 mg，30mmol），加入15 mL三氟乙酸溶解溶解，90℃回流反应，TLC监测至反应完全。将体系倒入冰水中，用NaOH溶液调节pH至近中性，抽滤、干燥后，硅胶柱层析纯化，旋蒸除去溶剂后得到黄色固体1467.6 mg，产率68.9 %。
目标分子探针的合成
分别向圆底烧瓶中加入化合物3（1420 mg，4 mmol）和4-苯基-3-氨基硫脲（668.92 mg,4 mmol），加入10 mLN,N-二甲基甲酰胺（DMF）溶液溶液后，室温下反应，TLC监测至反应完全。将反应体系浓缩后，经硅胶柱分离纯化可得目标分子探针1645 mg，产率81.6 %。
实施例2
荧光探针母液的制备
将上述分离得到的纯度在99 %以上的产物，准确称量5.04 mg并小心转移于50 mL的容量瓶中，室温下加入CH
实施例3
Fe
Fe
实施例4
荧光探针荧光强度与Fe
量取4.900 mL PBS缓冲溶液，将50 μL浓度为1 mM的探针母液溶解其中，再移取50 μL不同浓度的Fe
实施例5
荧光探针对Fe
将浓度为1 mM探针母液50 μL溶解于4.900 mL PBS缓冲溶液，再移取50 μL浓度为3 mM的NaCl，KCl，MgCl
实施例6
荧光探针对细胞中Fe
在HeLa培养基中加入10 μM的荧光探针溶液，置于 37
上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对发明范围的限制，本领域的相关技术人员能从发明公开的内容不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围之内。
机译： 用于光引发的阳离子，自由基，硫醇-烯和杂化聚合过程的新光引发体系，new的新络合物（III）及其制备方法，application的络合物的应用，用于监测聚合的新型发光分子探针工艺，用于涂层材料测试的新型发光分子传感器
机译： 用于光引发的阳离子，自由基，硫醇-烯和杂化聚合过程的新光引发体系，new的新络合物（III）及其制备方法，application的络合物的应用（III），用于监测氟的新型发光分子探针聚合工艺，用于涂层材料测试的新型发光分子传感器
机译： 分离的多核苷酸，表达盒，宿主细胞，分离的多肽，已被改变以表达耐碱突变体多肽的非人类转基因动物，与耐碱突变体多肽特异性结合的抗体，突变检测试剂盒生物样品，以及用于评估生物样品中是否存在对烷基抑制剂的抗性突变以诊断对至少一种碱性抑制剂有抗药性或可能发展出抗药性的癌症的方法。小分子激酶，用于评估生物学样品中是否具有抑制碱性磷酸酶抑制剂的突变，以诊断对患者具有抗药性或可能对pf-02341066产生抗药性的癌症，从而特异性降低抗癌突变体的表达以治疗癌症与激活抗至少一种小分子烷基激酶抑制剂的异常环路能力有关，该抑制剂治疗对pf-02341066有抵抗力的异常癌症
