一种甲硫酸新斯的明组合物及其制备方法

技术领域

本申请涉及药物化学领域，具体涉及一种甲硫酸新斯的明组合物及其制备方法。

背景技术

甲硫酸新斯的明化学名为N,N,N-三甲基-3-[(二甲氨基)甲酰氧基]苯铵甲基硫酸盐，是一种常用异逆性抗胆碱酯酶药，常用于内科、妇科及五官科的各种弛缓麻痹、肌肉和神经官能症等。主要剂型为片剂或注射剂，在荷兰、比利时、美国、日本、英国、奥地利、德国、法国、葡萄牙等多个国家均有上市。其中在美国和日本上市的注射剂型处方中以醋酸钠/醋酸缓冲对、枸橼酸/枸橼酸钠缓冲对作为平衡pH的辅料，pH控制范围为5.0～6.5，美国处方中甚至还加入了苯酚这类抑菌剂。而欧洲国家如德国、法国、英国等国家的甲硫酸新斯的明注射液中多取消了缓冲对辅料的使用，加入了氯化钠作为等渗剂替代。但 pH缓冲对、氯化钠等辅料的加入均增加了甲硫酸新斯的明作为注射剂型的细菌内毒素风险，辅料来源的热原更不易控，并不是最为安全和稳定的制剂处方。

申请号CN201910957301.6中也指出，甲硫酸新斯的明组合物容易因热不稳定而给生产、贮存带来一定的安全性隐患，主要降解杂质为3-羟基三甲苯胺甲硫酸盐，3-羟基三甲苯胺甲硫酸盐即指本发明所述杂质A。但在目前已上市的甲硫酸新斯的明组合物中，均产生了大于0.2％的杂质A。这对产品的储存或长途运输较为不利。

本申请发明人发现，甲硫酸新斯的明结构中含有酯基，在酸、碱、高温等条件下可能发生水解，生成杂质A和羧酸杂质；另外根据H.Porst and L.Kny 等人的文献报道，新斯的明在高温水溶液中，会发生去甲基化反应，可能降解生成杂质B、杂质C等杂质。

其中杂质A、杂质B、杂质C已在各国药典中公开，其结构式如下：

由于甲硫酸新斯的明的热不稳定的性质，在目前已上市的甲硫酸新斯的明组合物中，经过终端灭菌过程后，均会产生大于0.1％的杂质A。在专利申请号 CN201910957301.6中，发明了一种冻干粉针剂的无菌生产工艺，可使得产品免于经过高温终端灭菌过程从而控制杂质A的产生，但在无菌生产工艺能否达到设定的无菌保证水平，与整个生产过程的控制密切相关，需要严格进行生产环境和生产过程的控制，具有更高的生产成本和微生物污染风险。

上述背景技术是为了便于理解本申请，并非是本申请之前已向普通公众公开的公知技术。

发明内容

基于上述问题，一方面，本申请提供一种甲硫酸新斯的明组合物，能克服现有技术的缺陷，简化处方组成，并可以使得产品可以经受高温条件的终端灭菌并控制杂质A的产生。

一种甲硫酸新斯的明组合物，该甲硫酸新斯的明组合物为混合溶液，包含：

有效量的甲硫酸新斯的明；

螯合剂；

pH调节剂；以及

水。

可选地，所述甲硫酸新斯的明组合物中，以甲硫酸新斯的明组合物1ml计，有效量的甲硫酸新斯的明的量为0.5～2.5mg。

可选地，所述甲硫酸新斯的明组合物中，以甲硫酸新斯的明组合物1ml计，螯合剂的量为0.01～1mg。

可选地，所述螯合剂为金属离子螯合剂或依地酸。

可选地，所述金属离子螯合剂依地酸盐或次氨基三乙酸二钠。

可选地，依地酸盐为依地酸二钠盐、依地酸钙钠、依地酸四钠盐或次氨基三乙酸二钠。

可选地，所述pH调节剂为稀硫酸。

可选地，所述甲硫酸新斯的明组合物pH为2.5～3.5。

可选地，所述甲硫酸新斯的明组合物pH为2.8～3.2。

一方面，本申请还提供一种甲硫酸新斯的明组合物的制备方法。

技术方案是：一种甲硫酸新斯的明组合物的制备方法，包括以下步骤：

取水50％～95％，％为体积百分比，加入螯合剂、甲硫酸新斯的明使其溶解；

加入pH调节剂、水至100％，使溶液pH为2.5～3.5，过滤得滤液；

将滤液灌封后进行灭菌，得到甲硫酸新斯的明制剂组合物。

可选地，所述灭菌为湿热灭菌。

可选地，所述灭菌温度121℃，灭菌时间为8～15min。

本申请的原理及有益效果在于：

本申请发明人发现：盐酸虽然可以调节溶液pH，但盐酸生产成本略高于硫酸，且每摩尔硫酸分子中含有2mol氢离子(H+)，而盐酸分子中仅有1mol，对于同等目标pH的调节，使用量上可以减半，可进一步降低pH调节剂使用成本。

甲硫酸新斯的明降解生成杂质A的反应途径中，金属容器迁移出的Cu2+、 Zn2+等二价金属离子对水解反应具有催化作用，本发明通过加入所述量的金属离子螯合剂将金属离子络合后，可减慢水解反应的催化作用。

本申请发明人还发现：已上市制剂中，pH控制范围均为5.0～6.5，由于杂质A降解途径为水解反应，水解反应极其依赖于pH环境。当pH在2.5～3.5 范围时，可以有效减缓水解反应，使药液具有更好的稳定性效果。进一步地， pH控制在2.8～3.2，更进一步地，pH控制为3.0，药液处于更加稳定的状态。

本申请在欧、美、日等国家注射液的处方基础上，取消了pH缓冲剂、等渗剂、抑菌剂等辅料的累赘使用，简化为仅含金属离子螯合剂和无毒害的无机盐类pH调节剂，且用量较小，一定程度上降低了制剂中辅料来源的热原物质，提高了用药安全性。

本申请将甲硫酸新斯的明组合物进行了简化，减小了热原风险，提高了用药安全性，降低了处方成本，并使得该组合物的耐高温性能得到了显著提升，降低了药物的杂质水平，并通过非临床安全性实验，肯定了本发明组合物注射途径的安全性。

本申请的甲硫酸新斯的明组合物，在本申请的制备工艺下，其能克服现有技术的缺陷，简化处方组成，并可以使得产品可以经受高温条件的终端灭菌并控制杂质A的产生，具体为产品在液态状态下可以经受高温条件的终端灭菌并控制杂质A的产生，使得灭菌后产品杂质A含量减半。

具体实施方式

下面将对本申请作进一步说明。

本申请提供的实施例仅为进一步解释本申请，不应解释为对本申请的任何限制。

本领域技术人员应当清楚，在下文中，如果未特别说明，本申请所用材料和操作方法是本领域公知的。

实施例1：

本实施例中，涉及的物质组成配方如下表1。

表1

取注射用水85％(v/v)，加入依地酸钙钠、甲硫酸新斯的明使其溶解；加入稀硫酸调节pH，最终加注射用水至100％(v/v)，使得溶液pH为3.0，过滤得滤液；将滤液灌封后进行121℃湿热灭菌12min，得到甲硫酸新斯的明制剂组合物。

实施例2：

本实施例中，涉及的物质组成配方如下表下表2。

表2

取注射用水85％(v/v)，加入依地酸二钠、甲硫酸新斯的明使其溶解；加入稀硫酸调节pH，最终加注射用水至100％(v/v)，使得溶液pH为3.0，过滤得滤液；将滤液灌封后进行121℃湿热灭菌12min，得到甲硫酸新斯的明制剂组合物。

实施例3：

本实施例中，涉及的物质组成配方如下表下表3。

表3

取注射用水85％(v/v)，加入依地酸、甲硫酸新斯的明使其溶解；加入稀硫酸调节pH，最终加注射用水至100％(v/v)，使得溶液pH为3.0，过滤得滤液；将滤液灌封后进行121℃湿热灭菌12min，得到甲硫酸新斯的明制剂组合物。

对比实施例1(现有技术)

本实施例为美国上市制剂所公布处方，为现有技术。

本实施例中，涉及的物质组成配方如下表4。

表4

取注射用水85％(v/v)，加入苯酚、醋酸钠、醋酸使其溶解，然后加入甲硫酸新斯的明使其溶解；加入稀硫酸调节pH，最终加水至100％(v/v)，使得溶液pH为5.5，过滤得滤液；将滤液灌封后进行121℃湿热灭菌12min，得到甲硫酸新斯的明制剂组合物。

实施例4

将实施例1-3及对比实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物进行稳定性测试。

稳定性测试中，有关物质照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，其检测色谱条件、检测方法及杂质限度等描述如下：

供试品溶液：即实施例1-3及对比实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物。

对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

系统适用性溶液取甲硫酸新斯的明对照品、杂质A对照品、杂质C对照品各适量，加水溶解并稀释制成每1ml中分别约含甲硫酸新斯的明0.5mg、杂质A0.005mg、杂质C0.0025mg的混合溶液，摇匀。

色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Waters XBridge R 4.6mm ×150mm，3.5μm或效能相当的色谱柱)；以0.04mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至2.5)为流动相A；乙腈为流动相B；按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml：柱温45℃；检测波长215nm；进样体积20ul。

系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中，出峰顺序依次为杂质A、甲硫酸新斯的明、杂质C，各峰之间分离度应大于1.5。

测定法精密量取供试品溶液、对照溶液，分别注入液相色谱仪。

限度供试品溶液色谱图中如有与系统适用性溶液中杂质A、杂质C峰保留时间一致的色谱峰，除与空白溶液相同位置的色谱峰外，杂质A峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0％)，杂质C峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5 倍(0.5％)，除杂质A外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5％)。小于对照溶液主峰面积0.02倍的色谱峰不计，见表5。

表5

稳定性测试结果如下表6。

表6杂质A稳定性数据(单位：％)

注：1、加速条件：40±2℃；长期条件：25±2℃；

2、N/A表示该时间点未考察。

3、规格栏中，1ml:0.5mg指甲硫酸新斯的明制剂组合物溶液1ml中，甲硫酸新斯的明的量为0.5mg，其余成分的含量分别与实施例1-3及对比实施例1相对应，如实施例1中依地酸钙钠为0.5mg，实施例2 中依地酸二钠为1mg等；2ml:1mg指甲硫酸新斯的明制剂组合物溶液 2ml中，甲硫酸新斯的明的量为1mg，其余成分的含量分别与实施例 1-3及对比实施例1相对应，如实施例1中依地酸钙钠为1mg，实施例2中依地酸二钠为2mg等；4ml:2mg指甲硫酸新斯的明制剂组合物溶液4ml中，甲硫酸新斯的明的量为2mg，其余成分的含量分别与实施例1-3及对比实施例1相对应，如实施例1中依地酸钙钠为2mg，实施例2中依地酸二钠为4mg等。

4、由表6可知：本申请的组合物下杂质A水平相当，本申请实施例 1-3杂质A的初始水平得到控制，更优于对比实施例1，并在稳定性考察中不发生显著性增长。

针对实施例1配制的组合物，进行了溶血性、刺激性等非临床安全性试验研究。

实施例5

将实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物进行溶血性试验，试验时，以实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物作为供试品，选择供试品临床静脉最大给药浓度1mg/ml作为供试品加液药物浓度，依次加入2％红细胞悬液、 0.9％氯化钠注射液或纯化水、受试物，混匀，在37℃±0.5℃的恒温水浴锅中温育3h，未引起溶血和红细胞凝聚反应。

实施例6

将实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物进行兔血管刺激性试验，试验时，以实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物作为供试品，根据一般情况观察结果、血管刺激性症状观察结果和组织病理学检查结果，家兔耳缘静脉注射给予临床最大浓度1mg/ml的发明组合物，给药后0-1h、24h、48h、72h 和96h，肉眼观察给药部位血管和周围组织均正常，未见明显充血、水肿等刺激症状，可说明本发明组合物对家兔耳缘静脉血管及周围组织无刺激作用。

实施例7

将实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物进行兔肌肉刺激性试验，试验时，以实施例1配制的甲硫酸新斯的明制剂组合物作为供试品，对每组家兔给药后0-1h、24h、48h和72h后，对兔股四头肌均无明显刺激反应。

以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。