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高效分离小鼠肌内纤维-成脂祖细胞的方法

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本发明公开了一种高效分离小鼠肌内纤维‑成脂祖细胞的方法，步骤包括：（一）胶原蛋白涂层培养皿；（二）小鼠骨骼肌的分离和消化；（三）差异贴壁分离FAP。通过细胞流式分析及油红O染色确定分离的细胞纯度高，分化潜能高，增殖速度快，存活率高；采用胶原蛋白涂层培养皿利于细胞贴附，大大缩短分离时间，提高细胞得率；所使用的C57BL/6小鼠来源广泛，较易得到，大大减小了实验方法复现的难度。且相比于传统的流式分选法，不需要流式分选仪，更加经济实惠，方便快捷；为研究骨骼肌的发育和再生中纤维/成脂祖细胞功能提供良好的细胞基础。

著录项

公开/公告号CN113355281A

专利类型发明专利
公开/公告日2021-09-07

原文格式PDF
申请/专利权人浙江大学;
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申请/专利号CN202110681912.X
发明设计人王新霞;刘禹熙;陈炜;陈雨诗;汪以真;
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申请日2021-06-19
分类号C12N5/0775(20100101);
代理机构33200 杭州求是专利事务所有限公司;
代理人林松海
地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
入库时间 2023-06-19 12:30:38

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2023-04-14

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1. 高效分离小鼠肌内纤维-成脂祖细胞的方法 [P] . 中国专利： CN113355281A . 2021-09-07
2. 一种高效分离小鼠动脉血管平滑肌的组合酶及方法 [P] . 中国专利： CN105950594A . 2016-09-21
3. Gene expression, genome alteration and reporter gene expression in myofibroblasts and myofibroblasts-like cells by using the regulatory regions within the alpha smooth muscle alpha-actin gene [P] . 欧洲知识产权局专利： EP1172375A1 . 2002-01-16

机译：利用α平滑肌α-肌动蛋白基因内的调控区，在成肌纤维细胞和成肌纤维细胞样细胞中进行基因表达，基因组改变和报告基因表达
4. Isolated polypeptide encoded by a lipase-like gene, composition, pharmaceutical composition, antigenic fragment, isolated nucleic acid, vector, recombinant cell, antibody, hybridoma cell, processes for preparing a polypeptide, to screen agonists or antagonists of llg activity, for the enzymatic hydrolysis of a phosphatidylcholine ester, and to improve the lipid profile in the serum of a human or other animal having an undesirable lipid profile, and, transgenic mouse. [P] . BR9713847A . 2000-02-29

机译：由脂肪酶样基因编码的分离的多肽，组合物，药物组合物，抗原片段，分离的核酸，载体，重组细胞，抗体，杂交瘤细胞，制备多肽的方法，筛选具有llg活性的激动剂或拮抗剂的酶水解磷脂酰胆碱酯，以改善具有不良脂质特征的人或其他动物以及转基因小鼠血清中的脂质特征。
5. Isolated polypeptide, pharmaceutical composition, fusion protein, isolated polynucleotide, expression vector, recombinant host cell and methods of producing a polypeptide, detecting the presence of gene expression in a biological sample, expanding monocytic cells or monocyte cell progenitors and stimulating an immune response in a mammal exposed to an antigen or pathogen [P] . BR0205083A . 2004-07-20

机译：分离的多肽，药物组合物，融合蛋白，分离的多核苷酸，表达载体，重组宿主细胞和产生多肽的方法，检测生物样品中基因表达的存在，扩增单核细胞或单核细胞祖细胞并刺激小鼠体内的免疫反应暴露于抗原或病原体的哺乳动物