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一种能高效表达LL-37多肽的多拷贝重组表达载体及应用

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本发明公开了一种能高效表达LL‑37多肽的多拷贝重组表达载体、重组毕赤酵母、构建方法及应用，本发明以PPICZα为骨架质粒来构建重组表达载体，所述的重组表达载体PPICZα包括信号肽α因子、拷贝的LL‑37序列。多拷贝重组载体质粒是用双酶切目标片段后进行回收、沉淀和连接，得到多拷贝的质粒；同时用BamH I线性化重组质粒pPICZαA‑LL‑37；乙醇沉淀法进行纯化，把多拷贝质粒与载体相连接，再与毕赤酵母电转化为感受态细胞。通过诱导表达产生目标蛋白；利用本发明的重组酵母能够有序合成并将目标蛋白分泌到胞外，产生与人源抗菌肽LL‑37相同功能的结构多肽。经过测量抑菌圈和最小抑菌浓度，检测LL‑37的活性。本发明得到的LL‑37具有广谱抗菌性，能够抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。

著录项

公开/公告号CN113684223A

专利类型发明专利
公开/公告日2021-11-23

原文格式PDF
申请/专利权人成都本珍元药业有限公司;
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申请/专利号CN202111079712.3
发明设计人何建;苟兴华;陶雪菊;何正宇;
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申请日2021-09-15
分类号C12N15/81(20060101);C12N15/62(20060101);C12N1/19(20060101);C12P21/02(20060101);C12R1/84(20060101);
代理机构51239 成都众恒智合专利代理事务所(普通合伙);
代理人杨佳丽
地址 614000 四川省成都市温江区成都海峡两岸科技产业开发园科林西路618号7区3号
入库时间 2023-06-19 13:23:06

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