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斑马鱼心脏发育相关基因簇缺失突变体中主效基因的筛选方法和应用

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摘要

本发明公开了斑马鱼心脏发育相关基因簇缺失突变体中主效基因的筛选方法和应用，包括确定斑马鱼hoxbb基因簇中hoxb1b、hoxb5b、hoxb6b和hoxb8b基因的靶点位置并分别设计靶点gRNA序列和引物进行PCR扩增，体外转录获得gRNA与Cas9mRNA显微注射到斑马鱼中，有突变的斑马鱼与野生型杂交得杂合子F1，性成熟的F1交配得纯合突变体，对基因敲除的后代显微成像和单基因鉴定初步筛选具有明显表型的基因hoxb1b，单细胞测序数据分析hoxbb中四个单基因早期表达情况和原位杂交、基因敲低与过表达筛选出与心脏早期发育相关的主效基因hoxb1b，有助于寻找致病靶点和药物筛选。

著录项

  • 公开/公告号CN114934075A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2022-08-23

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海海洋大学;

    申请/专利号CN202210760738.2

  • 发明设计人 祖尧;王冰琦;

    申请日2022-06-30

  • 分类号C12N15/89;C12N15/12;C12N15/113;C12N9/22;A01K67/027;A61K49/00;

  • 代理机构上海伯瑞杰知识产权代理有限公司;

  • 代理人曹莉

  • 地址 201306 上海市浦东新区沪城环路999号

  • 入库时间 2023-06-19 16:30:07

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2022-09-09

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/89 专利申请号:2022107607382 申请日:20220630

    实质审查的生效

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