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微量DNA中甲基化CpG岛高通量测序方法

摘要

本发明提供一种微量DNA中甲基化CpG岛高通量测序方法,包括步骤:1)将DNA样品进行亚硫酸盐处理;2)将步骤1)中获取的处理样品加入到含有引物A的PCR体系中进行线性扩增;3)向步骤2)中的PCR产物中加入具有单链DNA剪切活性的核酸外切酶,反应后使核酸外切酶失活;4)将步骤3)中的产物加入到含有引物B的PCR体系中进行线性扩增;5)将步骤4)中的产物加入含有相应接头引物C和接头引物D的PCR体系中进行扩增;6)将步骤5)中的PCR产物进行纯化获得具有特异长度的DNA文库,并进行测序。本发明采用多步PCR的方法直接富集微量DNA序列中甲基化CpG岛序列对待测目的片段进行高通量测序效率极高。

著录项

  • 公开/公告号CN105695577B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2019-03-19

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海易毕恩基因科技有限公司;

    申请/专利号CN201610119392.2

  • 发明设计人 陆星宇;宋艳群;

    申请日2016-03-02

  • 分类号C12Q1/6869(20180101);

  • 代理机构31253 上海精晟知识产权代理有限公司;

  • 代理人冯子玲

  • 地址 201210 上海市浦东新区自由贸易试验区爱迪生路328号201-2室

  • 入库时间 2022-08-23 10:28:05

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-04-24

    专利权质押合同登记的生效 IPC(主分类):C12Q1/6869 登记号:Y2020990000248 登记生效日:20200330 出质人:上海易毕恩基因科技有限公司 质权人:养生堂有限公司 发明名称:微量DNA 中甲基化CpG 岛高通量测序方法 授权公告日:20190319 申请日:20160302

    专利权质押合同登记的生效、变更及注销

  • 2019-03-19

    授权

    授权

  • 2019-03-19

    授权

    授权

  • 2016-07-20

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/68 申请日:20160302

    实质审查的生效

  • 2016-07-20

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/68 申请日:20160302

    实质审查的生效

  • 2016-07-20

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q 1/68 申请日:20160302

    实质审查的生效

  • 2016-06-22

    公开

    公开

  • 2016-06-22

    公开

    公开

  • 2016-06-22

    公开

    公开

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