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针对3’端带有A重复序列的情况下获得完整3’末端序列的3’RACE方法

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摘要

本发明公开了一种针对3’端带有A重复序列的情况下获得完整3’末端序列的3’RACE方法，包括如下步骤：1)利用末端转移酶对mRNA进行加尾，增加一段接头序列；以dCTP或dGTP对mRNA进行加尾,增加16‑22bp单碱基重复序列；2)第一链cDNA的合成：以带有oligodG或oligodC的锚定引物作为接头序列，对加尾后的mRNA进行反转录；3)进行3’RACE扩增：以带接头序列的cDNA为模板，根据RACE引物设计原则设计模板内部特异性引物GSP2和其对应的巢式引物NGSP2为扩增的正向引物，同时设计接头序列的互补序列(AUAP)为反向扩增引物，对带接头的cDNA序列进行3’RACE。本发明可解决因序列的特殊结构(带有A重复序列)所导致的3’RACE无法获得完整末端序列的问题。

著录项

  • 公开/公告号CN106636074B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2019-07-23

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 厦门大学;

    申请/专利号CN201710100037.5

  • 发明设计人 潘铖烺;

    申请日2017-02-23

  • 分类号

  • 代理机构厦门市首创君合专利事务所有限公司;

  • 代理人张松亭

  • 地址 361000 福建省厦门市思明南路422号

  • 入库时间 2022-08-23 10:36:43

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2019-07-23

    授权

    授权

  • 2017-06-06

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/10 申请日:20170223

    实质审查的生效

  • 2017-06-06

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N 15/10 申请日:20170223

    实质审查的生效

  • 2017-05-10

    公开

    公开

  • 2017-05-10

    公开

    公开

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