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奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用

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本发明公开了一种奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用。试验中选取奶牛乳房炎主要致病菌特异性蛋白，通过ABCpred方案与BepiPred方案预测获得每种蛋白的2个B细胞优势表位将所得优势表位进行连接获得TRE序列，GeneBank上得到cLYZ序列并进行哺乳动物细胞偏好性密码子优化。在TRE序列与cLYZ序列之间插入高剪切效率的Thoseaasigna virus 2A(T2A)自剪切肽，合成后得到含有目的基因片段的pMD‑19T载体。将TRE基因、T2A基因、cLYZ基因亚克隆到穿梭载体pDC315‑MCS‑EGFP上；利用LipoFiterTM脂质体转染法将重组穿梭载体与腺病毒大骨架pBHGlox(delta)E1,3cre共转染HEK293细胞，实现同源重组，获得重组腺病毒Ad‑TRE‑T2A‑cLYZ‑EGFP。

著录项

  • 公开/公告号CN107488676B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-04-13

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 天津农学院;

    申请/专利号CN201710908690.4

  • 发明设计人 金天明;林静;李小慧;高珂珂;尚翠玲;孟佳丽;李昕;赵瑞利;

    申请日2017-09-29

  • 分类号C12N15/861(20060101);C12N7/01(20060101);A61K38/47(20060101);A61P15/14(20060101);A61P31/04(20060101);A61K38/16(20060101);

  • 代理机构12101 天津市鼎和专利商标代理有限公司;

  • 代理人崔继民

  • 地址 300384 天津市西青区津静公路22号

  • 入库时间 2022-08-23 11:39:17

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