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受DNA guide引导的具有核酸内切酶活性的RecJ蛋白及其在基因编辑中的应用

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本发明提供一种受DNA guide引导的具有核酸内切酶活性的BaRecJ蛋白及其突变体BaRecJM在基因编辑中的应用。本发明提供的是一种来源于细菌的RecJ核酸酶，其能够结合磷酸化的小DNA,对互补的目标DNA特定位点发挥核酸内切酶作用，进行基因编辑；所述的BaRecJ核酸酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明另一个方面还提供上述BaRecJ核酸酶的突变体，从而有效的削弱其外切酶活性，增强受DNA guide引导对目标DNA的定点剪切能力；所述RecJ核酸酶的突变体BaRecJM，其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。目前报道的受DNA片段引导进行剪切的Ago蛋白来自嗜热菌，需要大于65℃才能发挥作用。本发明的BaRecJ及其突变体BaRecJM能够在37℃的温和条件下对DNA双链进行剪切，从而更方便进行基因工程操作。

著录项

公开/公告号CN110093390B

专利类型发明专利
公开/公告日2021-08-27

原文格式PDF
申请/专利权人青岛大学;自然资源部第一海洋研究所;中国大洋矿产资源研究开发协会(中国大洋事务管理局);青岛科技大学;
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申请/专利号CN201910509798.5
发明设计人郑明刚;王玲;徐孟欣;王闻;马粒雅;吕巧;
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申请日2019-06-12
分类号C12N9/22(20060101);C12P19/34(20060101);C40B50/06(20060101);
代理机构37201 青岛海昊知识产权事务所有限公司;
代理人张中南
地址 266071 山东省青岛市宁夏路308号
入库时间 2022-08-23 12:22:55

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1. 受DNA guide引导的具有核酸内切酶活性的RecJ蛋白及其在基因编辑中的应用 [P] . 中国专利： CN110093390B . 2021.08.27
2. 受DNA guide引导的具有核酸内切酶活性的RecJ蛋白及其在基因编辑中的应用 [P] . 中国专利： CN110093390A . 2019-08-06
3. PROTEIN, DNA, APPLICATION OF SUCH DNA, APPLICATION OF SUCH PROTEIN, ANTIBODIES AND THEIR APPLICATION, ANTISENSIC NUCLEIC ACIDS AND THEIR APPLICATION, NUCLEIC ACID CONSTRUCT AND APPLICATIONN THEREOF, METHOD OF DETECTING AND/OR QUANTITATIVELY DETERMINING MRNA P163 CONTENT IN BLOOD, METHOD OF OBTAINING ANTIBODIES, METHOD OF DETECTING PROTEIN, METHOD OF INHIBITING CELL PROLIFERATION, METHOD OF SEARCHING FOR INHIBITORS, METHOD OF INHIBITING ACTIVITY OF A PROTEIN AND METHOD OF STIMULATING CELL PROLIFERATION [P] . PL330451A1 . 1999-06-21

机译：蛋白质，DNA，该DNA的应用，该蛋白质，抗体及其应用，抗性核酸及其应用，核酸结构及其应用，检测和/或定量测定血液中MRNA P163含量的方法，OBT方法抗体，检测蛋白质的方法，抑制细胞增殖的方法，寻找抑制剂的方法，抑制蛋白质活性的方法和刺激细胞增殖的方法
4. PROCESS FOR PRODUCING PROTEIN USING HOST-organisms, in particular lactic acid bacteria which Recombinant DNA plasmids HIGH replicon activity and HIGH PROMOTER-activity FOR THE SPECIFIC PROTEIN-ENCODING GENE CONTAIN SUCH OF THE RECOMBINANT DNA PLASMIDS ANTICIPATED HOST ORGANISMS, recombinant DNA plasmids ITSELF, THE PROMOTER replicon activity and activity-encoding DNA FRAGMENTS AND THE PROTEIN OBTAINED. [P] . NL8503316A . 1987-06-16

机译：使用宿主生物生产蛋白质的方法，特别是乳酸菌，其重组DNA质粒具有很高的复制子活性，并且对于包含重组DNA质粒的特定蛋白编码基因的特定启动子具有很高的启动子活性，重组宿主有机体，重组DNA质粒，启动子复制子活性和编码活性的DNA片段和获得的蛋白。
5. The DNA sequence, protein with activity diidroorotase, use of a DNA sequence, inhibitor, and methods to find substances that inhibit the activity diidroorotase of plant.To identify substances that inhibit the activity diidroorotase herbicidamente active in plants, and to eliminate unwanted vegetation. [P] . BR0013798A . 2002-05-14

机译：该DNA序列，具有活性二去甲脂酶的蛋白质，使用DNA序列，抑制剂和方法来发现抑制植物的活性二去甲脂酶的物质。鉴定抑制植物中具有活性的二去甲脂酶活性的物质，并消除不需要的植被。

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