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一种获取ADAR蛋白细胞内高效结合的底物序列的方法及底物序列和应用

摘要

本发明公开了一种获取ADAR蛋白细胞内高效结合的底物序列的方法及底物序列和应用。所述方法包括如下步骤:S1.细胞准备及蛋白与RNA交联反应;S2.免疫共沉淀及双链RNA消化,连接,和逆转录;S3.cDNA环化、建库和高通量测序;S4.ADAR底物拼装;S5.高效结合底物的评估。本发明首次开发了一种获取ADAR蛋白细胞内高效结合的底物序列的方法irCLASH,本发明从实验及生物信息学的角度填补现有ADAR1结合底物研究存在的空缺,与现有其他研究蛋白与RNA相互作用的方法相比,可显著提高嵌合体读长的得率,可最大限度提高了ADAR蛋白作用底物的构建数量,同时缩短实验耗时、简化了实验操作。

著录项

  • 公开/公告号CN111593093B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2022-03-04

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 中山大学;

    申请/专利号CN202010158889.1

  • 发明设计人 张锐;杨文兵;宋玉龙;

    申请日2020-03-09

  • 分类号C12Q1/6809(20180101);

  • 代理机构44102 广州粤高专利商标代理有限公司;

  • 代理人赵崇杨

  • 地址 510275 广东省广州市海珠区新港西路135号

  • 入库时间 2022-08-23 13:12:16

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