A型魏氏梭菌

摘要： 利用PCR技术将α毒素羧基端基因CPA251-370克隆到pET-32a载体上,构建了重组表达质粒pXETCPA-C,酶切鉴定和序列分析证实其含有CPA251-370基因且序列和阅读框架均正确。对重组菌株BL21(DE3)(pXETCPA-C)表达的蛋白质进行SDS-PAGE分析,结果表明CPA251-370蛋白表达量占菌体总蛋白质相对含量的16.43%。SOPMA法预测表明CPA251-370蛋白二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成,其3D结构与α毒素羧基端部分相似。CPA和CPA251-370蛋白的圆二色(CD)光谱分析发现两者的CD光谱仅有一些微小变化。免疫攻毒试验表明CPA251-370蛋白免疫的小鼠能抵抗最小致死剂量(MLD) 0.5 mL·只-1(活菌数约为5×109 cfu)的A型魏氏梭菌标准株C57-1毒素攻击。该研究深入阐释了A型魏氏梭菌α毒素的分子结构,为揭示其作用的分子机制奠定了坚实基础。

摘要： 利用PCR扩增技术克隆A型魏氏梭菌α毒素氨基端的PLC1-250基因,构建含PLC1-250基因表达质粒的BL21(DE3)(pN-PLC1-250)重组菌株,序列分析和酶切鉴定证实构建的pN-PLC1-250重组质粒含有目的基因且基因序列与阅读框架均正确.SDS-PAGE分析表明,PLC1-250蛋白表达量占菌体总蛋白相对含量的18.76%.利用SOPMA法预测PLC1-250蛋白分子的二级结构,且同源模建了其3D结构,结果表明,PLC1-250蛋白分子的二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,三级结构与α毒素相类似.此外,还对其生物学活性进行了鉴定,可为进一步探索α毒素作用的分子机制,以及其分子结构与生物学功能的关系奠定基础.%Amino-terminal PLC1-250 gene of Clostridium welchii α-toxin was amplified by PCR.The recombinant strain BL21 (DE3)(pN-PLC1-250) containing PLC1-250 gene was constructed.It was shown that the recombinant plasmid pN-PLC1-250 contained PLC1-250 gene with correct sequence and ORF by identification of endonuclease-digesting and sequence analysis.SDS-PAGE analysis showed that the expression level of PLC1-250 proteins were about 18.76% of total cellular proteins.The secondary structure and three-dimensional structure of PLC1-250 proteins were predicted by SOPMA method on EXPASY website.The results showed that the secondary structure of PLC1-250 protein was composed of alpha helices and random coils.The three-dimensional structure of PLC1-250 protein was similar with amino-terminal domain of α-toxin protein.The study of biological activity laid foundation for further research of the molecular mechanism of α-toxin and the relation of its molecular structure and biological function.

摘要： 兔魏氏梭菌病是由A型魏氏梭菌所引起的以家兔急性腹泻、排黑色水样或带血的胶胨样粪便、盲肠浆膜出血斑和胃黏膜出血、溃疡为主要特征的肠毒血症。该病发病率和致死率都很高，如治疗不及时，会造成大量死亡，给养兔业带来严重的损失。2014年2月，我市某户饲养的獭兔发生本病，通过及时诊断及治疗，减轻了一定的损失。1.发病情况 我市某户饲养170只52日龄的獭兔，在2014年2月份的时候突然发病，有的突然死亡，有的出现腹泻症状后死亡，该户主使用磺胺药物进行治疗，但没有明显效果，发病2天，共死亡31只。2.临床症状 病兔表现为精神萎靡，爱蹲伏，弓背蜷缩，或者呆立不动，不吃食，最初排灰色软便，并带有胶胨样粘状物，随后排出黑、褐色水样粪便，有的粪便中带血，有特殊的腥臭味，肛门周围、后肢及尾部被毛被稀粪污染。严重的病兔极度衰竭，卧地不起。

摘要： 1仔猪红痢仔猪梭菌性肠炎又叫仔猪红痢,是由C型或A型魏氏梭菌引起的初生仔猪的急性传染病。流行特点主要发生于3日龄以内的新生仔猪。患猪排出浅红或红褐色稀粪,或混合坏死组织碎片和气泡;发病急剧,病程短促,死亡率极高。

摘要： 为探索A型魏氏梭菌α毒素第56位天冬氨酸(Asp-56)对其生物学活性的影响,将α毒素Asp-56密码子(GAT)定点突变成甘氨酸(Gly-56)密码子(GGT),构建了含α毒素D56G突变基因表达质粒的重组菌株BL21 (DE3) (pM-D56G),该突变体蛋白表达量约为22.48％.α毒素和α毒素D56G突变体蛋白的二级结构主要由α螺旋和无规则卷曲组成,两者的圆二色(CD)光谱检测有微小变化.生物学活性检测结果表明,α毒素D56G突变体蛋白失去了α毒素的磷脂酶C活性,且α毒素D56G突变体蛋白免疫的小鼠能够保护1MLD的A型魏氏梭菌标准株C57-1毒素攻击.此研究为进一步研究α毒素分子结构与生物学功能的关系奠定了基础.

摘要： 兔魏氏梭菌病是由A型魏氏梭菌及其毒素所致家兔的一种以剧烈腹泻为特征的急性、致死性肠毒血症.其特征为家兔发生急剧腹泻、脱水、死亡,是严重危害养兔业的传染病之一.治疗方案以紧急接种兔魏氏梭菌病疫苗,辅以针对腹泻为主的对症疗法.

摘要： 长毛兔魏氏梭菌病,是由A型魏氏梭菌所产外毒素引起的肠毒血症。以急性腹泻,排黑色水样或带血胶冻样粪便,盲肠浆膜出血斑和胃黏膜出血、溃疡为主要特征。一年四季均可发生,但冬、春季多发。各种年龄均可发病,一般1-3月龄的幼兔发病率与死亡率较高。兔群发病后,

摘要： 腹泻是哺乳仔猪最常见的疾病症状，不同疫病引起的腹泻有一定的日龄特异性，这样一来从业人员如果了解各疫病引起腹泻的日龄阶段，就有助于及时确定引起腹泻的病因并采取科学有效的防治措施。rn1 1～3日龄rn1-3日龄仔猪多发生仔猪红痢。仔猪红痢是由c型或A型魏氏梭菌引起的初生仔猪的急性传染病。

摘要： 魏氏梭菌是自然环境中的常在菌,在诸多猪场均存在此类细菌。根据此类细菌代谢所产生的毒素,分为A,B,C,D,E五种类型。其中A型魏氏梭菌为造成猪只猝死的主要病原菌,在猪群遭受应激时,常常突然发病,其发病率较其他疾病较低,但若发病,则死亡率极高,因此,给养猪生产造成了很大的损失。其余的B、C、D、E型则能造成猪群出现血便、下痢等一系列的肠道疾病,

摘要： A型魏氏梭菌滤液中含有磷酸酯酶C,可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C,处理鸡传染性支气管炎病毒,使该病毒表现出血球凝集(HA)活性,制备IB HI试验抗原.因此,建立A型魏氏梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IB HI抗原产品至关重要.本文对29批次的A型魏氏梭菌滤液进行了小白鼠致死活性试验、卵磷脂酶活性试验、处理后IBV的HA活性试验及IB HI抗原制备最小滤液加入量试验,观察A型魏氏梭菌MLD、磷酸酯酶C含量以及小白鼠的MLD和磷酸酯酶C的含量与滤液处理过的浓缩IBV的HA效价之间的相关关系,通过试验拟建立生产IB HI抗原所用A型魏氏梭菌滤液的质控标准.

摘要： A型魏氏梭菌滤液中含有磷酸酯酶C,可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C,处理鸡传染性支气管炎病毒,使该病毒表现出血球凝集(HA)活性,制备IB HI试验抗原.因此,建立A型魏氏梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IB HI抗原产品至关重要.本文对29批次的A型魏氏梭菌滤液进行了小白鼠致死活性试验、卵磷脂酶活性试验、处理后IBV的HA活性试验及IB HI抗原制备最小滤液加入量试验,观察A型魏氏梭菌MLD、磷酸酯酶C含量以及小白鼠的MLD和磷酸酯酶C的含量与滤液处理过的浓缩IBV的HA效价之间的相关关系,通过试验拟建立生产IB HI抗原所用A型魏氏梭菌滤液的质控标准.

摘要： A型魏氏梭菌滤液中含有磷酸酯酶C,可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C,处理鸡传染性支气管炎病毒,使该病毒表现出血球凝集(HA)活性,制备IB HI试验抗原.因此,建立A型魏氏梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IB HI抗原产品至关重要.本文对29批次的A型魏氏梭菌滤液进行了小白鼠致死活性试验、卵磷脂酶活性试验、处理后IBV的HA活性试验及IB HI抗原制备最小滤液加入量试验,观察A型魏氏梭菌MLD、磷酸酯酶C含量以及小白鼠的MLD和磷酸酯酶C的含量与滤液处理过的浓缩IBV的HA效价之间的相关关系,通过试验拟建立生产IB HI抗原所用A型魏氏梭菌滤液的质控标准.

摘要： A型魏氏梭菌滤液中含有磷酸酯酶C,可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C,处理鸡传染性支气管炎病毒,使该病毒表现出血球凝集(HA)活性,制备IB HI试验抗原.因此,建立A型魏氏梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IB HI抗原产品至关重要.本文对29批次的A型魏氏梭菌滤液进行了小白鼠致死活性试验、卵磷脂酶活性试验、处理后IBV的HA活性试验及IB HI抗原制备最小滤液加入量试验,观察A型魏氏梭菌MLD、磷酸酯酶C含量以及小白鼠的MLD和磷酸酯酶C的含量与滤液处理过的浓缩IBV的HA效价之间的相关关系,通过试验拟建立生产IB HI抗原所用A型魏氏梭菌滤液的质控标准.

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 重庆市动物园一头小象出现急性死亡,做了细菌的分离与鉴定,结果确诊由A型魏氏梭菌和大肠杆菌引起的败血症,现将报告发生情况及临床症状，病理学变化，实验室检验和防治措施。

摘要： 本发明涉及动物细菌学领域，提供了一种家兔魏氏梭菌病的A型产气荚膜梭菌灭活疫苗的制备方法，该方法以A型产气荚膜梭菌为原始菌种，经过一级和二级培养后最终获得菌液，将该菌液与白油佐剂混合即制得A型产气荚膜梭菌灭活疫苗；本发明所述方法制备的疫苗免疫家兔，攻毒后其保护率达到100％，起到了良好的免疫保护作用。

摘要： 本发明提供了一种魏氏梭菌病及其致病菌型的硒胶检测试纸，该试纸可应用于兽医临床、畜牧养殖、食品安全、公共卫生、水质监测及相关领域。它由塑料底板、硒标垫、加样膜、吸水纸以及反应膜组成。其中，α、A、B、C、D及E条带的硒标垫由玻璃纤维素膜组成，膜上结合了胶体硒标记的单抗；α、A、B、C、D及E条带的反应膜由硝酸纤维素膜构成，其上分别具有检测带(T带)和质控带(C带)，各检测带包埋有相应不同表位的单抗，各质控带结合有多抗。本发明能单独或同时完成魏氏梭菌病的早期诊断和各种致病菌的分型鉴定，具有操作简单、敏感特异、携带方便等特点。

摘要： 本发明公开了预防和治疗A型魏氏梭菌病的中药组合物，按重量份计由以下组分组成，十大功劳10-80份、白头翁5-50份、山药3-50份、车前子3-30份、地榆3-30份、大黄3-30份和铁苋菜5-45份；还公开了由该组合物制得的提取物及其制备方法和由提取物制备的制剂和应用，能够用于预防和治疗A型魏氏梭菌病，具有广泛的临床应用价值。

摘要： 本发明公开了一株具有广谱强裂解性的新型魏氏梭菌噬菌体及包含该噬菌体的噬菌体组合物及其在兔魏氏梭菌病中的应用，该噬菌体不仅可用于制备预防和治疗魏氏梭菌病的药物，还可用于制备兔饲料添加剂、以及消毒剂等。该噬菌体vB_CpeP_PMQ04还可与其他噬菌体，如新型大肠杆菌噬菌体复配形成综合疗效更好的噬菌体组合物。该噬菌体及其噬菌体组合物使用安全、无副作用，在解决因产气荚膜梭菌和大肠杆菌造成的感染的同时，避免了因使用抗生素造成的抗生素残留、以及诱发耐药性产气荚膜梭菌和大肠杆菌的问题，同时还响应了国家替抗减抗的方案。

摘要： 本发明公开了一种同时检测鼠伤寒沙门氏菌，肠炎沙门氏菌，以及魏氏梭菌A型的三重PCR引物组和试剂盒，其中包含三对引物，分别是鼠伤寒沙门氏菌上下游引物对分别是SEQIDNO:1，SEQIDNO:2；肠炎沙门氏菌上下游引物对分别是SEQIDNO:3，SEQIDNO:4；魏氏梭菌A型引物对分别是SEQIDNO:5，SEQIDNO:6。利用本发明提供的试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌，肠炎沙门氏菌，魏氏梭菌A型准确性高、特异性强、灵敏度高、易于操作、快速且结果可靠。

摘要： 本发明涉及动物细菌学领域，提供了一种家兔魏氏梭菌病的A型产气荚膜梭菌灭活疫苗的制备方法，该方法以A型产气荚膜梭菌为原始菌种，经过一级和二级培养后最终获得菌液，将该菌液与白油佐剂混合即制得A型产气荚膜梭菌灭活疫苗；本发明所述方法制备的疫苗免疫家兔，攻毒后其保护率达到100％，起到了良好的免疫保护作用。

摘要： 本发明公开了一种同时检测志贺菌、沙门氏菌、魏氏梭菌和大肠杆菌的四重PCR检测引物组，包含四对引物，分别是志贺菌上下游引物对分别是SEQIDNO:1，SEQIDNO:2；沙门氏菌上下游引物对分别是SEQIDNO:3，SEQIDNO:4；魏氏梭菌A型引物对分别是SEQIDNO:5，SEQIDNO:6；大肠杆菌引物对分别是SEQIDNO:7，SEQIDNO:8。本发明针对鸡场常见的肠道致病菌建立的多重检测方法，检测准确性高，特异性好的基础上，还缩短了检测时间，提高了检测效率，更有利于在规模化养殖生产中应用。

摘要： 本发明涉及亚单位疫苗领域，尤其涉及一种猪魏氏梭菌A型的亚单位疫苗及其制备。本发明通过优化密码子，实现了α毒素蛋白及其截短片段的可溶性表达，并通过Ni‑NTA层析得到高纯度的蛋白。为了降低生产成本，分别尝试用pH沉降法、硫酸铵沉降法或高温沉降法代替Ni‑NTA亲和层析法，只有高温沉降法能达到目的：α毒素片段表现出较高的热稳定性，蛋白粗提取物在65°C沉降30min后，杂蛋白去除率在85％以上。随后将纯化的蛋白与佐剂混合制备成疫苗，免疫小鼠展现出100％的保护率。本发明提供了可溶性α毒素片段并优化了其制备方法，极大地简化了生产工艺，使得猪魏氏梭菌疫苗的制备更简单高效。

摘要： 本发明公开了预防和治疗A型魏氏梭菌病的中药组合物，按重量份计由以下组分组成，十大功劳10-80份、白头翁5-50份、山药3-50份、车前子3-30份、地榆3-30份、大黄3-30份和铁苋菜5-45份；还公开了由该组合物制得的提取物及其制备方法和由提取物制备的制剂和应用，能够用于预防和治疗A型魏氏梭菌病，具有广泛的临床应用价值。

摘要： 本发明提供了一种魏氏梭菌病及其致病菌型的硒胶检测试纸，该试纸可应用于兽医临床、畜牧养殖、食品安全、公共卫生、水质监测及相关领域。它由塑料底板、硒标垫、加样膜、吸水纸以及反应膜组成。其中，α、A、B、C、D及E条带的硒标垫由玻璃纤维素膜组成，膜上结合了胶体硒标记的单抗；α、A、B、C、D及E条带的反应膜由硝酸纤维素膜构成，其上分别具有检测带(T带)和质控带(C带)，各检测带包埋有相应不同表位的单抗，各质控带结合有多抗。本发明能单独或同时完成魏氏梭菌病的早期诊断和各种致病菌的分型鉴定，具有操作简单、敏感特异、携带方便等特点。