bcr/abl融合基因

摘要： 目的:探讨急性混合表型白血病(MPAL)伴BCR/ABL融合基因阳性的临床及生物学特性、临床疗效及预后。方法:对重庆市涪陵中心医院确诊的1例患者BCR-ABL (P210)融合基因阳性的急性混合表型白血病的临床特征进行分析,并复习相关文献。结果:通过反转录聚合酶链反应(RT-PCK)和染色体核型分析等方法检测到该例患者存在BCR-ABL P210融合基因及费城染色体(Ph)阳性,给予“达沙替尼”联合静脉药物化疗,疗效差,预后差。结论:Ph+BCR-ABL+混合表型急性白血病患者临床较少见,预后极差,目前尚无标准治疗方案。酪氨酸激酶抑制剂(TKI)联合化疗及造血干细胞移植或CART治疗有可能改善预后。

摘要： 目的:分析BCR/ABL/ASS1三色双融合探针在CML和B-ALL所出现的各种异常信号模式的意义,并探讨其在检测BCR/ABL融合基因及ASS1基因缺失中的应用价值.方法:分别对50例初诊CML患者和50例初诊B-ALL患者采用BCR/ABL/ASS1三色双融合探针进行荧光原位杂交(FISH)检测,同时对所有病例应用24 h短期培养法R显带后进行染色体核型分析.结果:50例CML患者中,49例Ph+,余1例可见5个正常中期核型;通过FISH发现,所有患者(100％)均存在BCR/ABL融合基因,阳性信号特征分别为1R1G2B2F 39例(78％)、2R1G2B1F2例(4％)、1R1G1B1F6例(12％)、同时伴有1R1G2B2F和1R1G2B3F2例(4％)、2R2G2B1F1例(2％).伴有ASS1基因缺失(1R1G1B1F)的6例患者染色体核型均为单纯t(9;22)易位,无其他异常.50例B-ALL患者中,Ph+ 13例,数目畸变及非t(9;22)的结构畸变16例,正常核型20例,无分裂相1例;经FISH检出16例(32％)具有BCR/ABL融合基因,分别为1R1G2B2F13例(26％)、同时伴有1R1G2B2F和1R1G2B3F1例(2％)、2R1G1B1F1例(2％)、IR1G3B3F 1例(2％),FISH额外检出的3例BCR/ABL融合基因阳性包括1例伴有ASS1基因缺失(2R1G1B1F)、1例经典型t(9;22)易位(1R1G2B2F)和1例BCR/ABL融合基因及ASS1基因拷贝数的增加(1R1G3B3F).结论:应用三色双融合FISH探针检测BCR/ABL融合基因及ASS1基因缺失,具有简单、快速、灵敏、稳定的特点,能够检测多种形式的分子融合,可很好地避免D-FISH探针及ES-FISH探针因信号随机重叠导致的假阳性结果.该检测方法不但可以直接观察有无ASS1基因的缺失,而且还能提高初诊BCR/ABL融合基因阳性结果的可靠性及复诊监测微小残留病结果的准确性.

摘要： 目的:探究BCR-ABL融合基因阴性的骨髓增殖性肿瘤患者JAK2、CALR及MPL基因突变情况及临床特征。方法:选取BCR-ABL融合基因阴性的骨髓增殖性肿瘤患者40例,随机分为A组和B组各20例,并分析临床特征。结果:在40例患者中,BCRABL融合基因和Ph染色体取得的检测结果为阴性。检测突变为阳性的单纯有CALR L367fs~*46突变率10.00%、CALR K385fs~*47突变率5.00%、MPL W515K/A/L/R1/R2/S为2.50%、和JAK2V617F 47.50%,这几种突变不同时出现;相较于A组的诊断准确率50.00%,观察组的95.00%更高,对比(P<0.05)。结论:针对BCR-ABL融合基因阴性的骨髓增殖性肿瘤患者,采用基因检测的方式,为患者疾病的诊断及预后提供更准确、便捷的依据,具有临床应用价值。

摘要： 骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm,简称MPN)主要指的是临床特征表现为多系或者一系髓系细胞发生增殖的一种克隆性造血干细胞疾病类型。其中,最为常见的BCR-ABL融合基因阴性MPN3种疾病为原发性骨髓纤维化(PMF)、原发性血小板增多症(ET)及真性红细胞增多症(PV)。研究指出,BCR-ABL融合基因阴性MPN患者当中都存在不同程度的基因突变现象,且主要发生突变的基因为CALR、JAK2及MPL。

摘要： 目的 制备以MS2噬菌体装甲RNA(Armored RNA)为材料的BCR-ABL融合基因质控物.方法 获取临床p210型BCR-ABL融合基因骨髓标本cDNA,PCR扩增p210型BCR-ABL融合基因片段和ABL内参基因片段.将MS2噬菌体成熟蛋白基因和衣壳蛋白基因克隆于pACYCDuet-1,制成pACYC-MS2,然后将p210型BCR-ABL融合基因和ABL内参基因分别插入pACYC-MS2载体,经原核表达、分子筛纯化、反转录-PCR鉴定后分别制成包装有p210型BCR-ABL融合基因和ABL内参基因片段的病毒样颗粒(VLPs).进行稳定性、均一性检测,同时判断质控物的适用性.结果 成功制备了包装有p210型BCR-ABL融合基因和ABL内参基因的VLPs质控物.均一性检测表明质控物目的片段拷贝数水平是均一的.稳定性检测显示质控物标本在-20°C可至少稳定保存7个月,4°C稳定保存3个月,室温稳定保存15 d,37°C稳定保存1周.用实时荧光定量PCR试剂盒检测质控物水平,pACYC-MS2-p210 VLPs和pACYC-MS2-ABL VLPs标准曲线的R2分别为0.9940和0.9917,具有很好的适用性.结论 将Armored RNA作为材料所制备的BCR-ABL融合基因质控物稳定性、均一性较好,适用于评价BCR-ABL融合基因检测试剂盒的性能,具有广泛的应用前景.

摘要： 目的:探讨急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者白细胞分化抗原38(CD38)表达与疗效及预后的关系.方法:收集2014年至2017年在我院初诊的B-ALL患者共74例,用流式细胞仪检测患者骨髓白血病细胞免疫表型,实时荧光定量PCR检测断裂点簇基区-Abelson酪氨酸激酶(BCR-ABL)融合基因.分别依据CD38表达强度分为CD38+组和CD38-组以及BCR-ABL融合基因存在与否分为BCR-ABL+组和BCR-ABL-组,回顾性分析不同组别患者的临床资料及预后.结果:74例B-ALL患者中,CD38+组和CD38-组患者分别为34例及40例,BCR-ABL+组和BCR-ABL-组分别为30例及44例.BCR/ABL+组患者CD38表达率显著低于BCR/ABL-组(26.7％vs 73.3％,P =0.017).CD38+和CD38-患者的总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)差异无统计学意义.BCR/ABL+患者中,CD38+组的中位OS和PFS显著低于CD38-组(15.73个月vs 25.8个月,9.27个月vs 25.8个月;分别P= 0.01和P = 0.021);而BCR/ABL-患者中,CD38+组和CD38-组的中位OS和PFS差异均无统计学意义.结论:CD38表达是BCR/ABL+ALL患者预后不良的因素,即使酪氨酸酶抑制剂(TKI)治疗也不能改变这种不良预后.

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对K562细胞凋亡率、BCR/ABL融合基因及凋亡调控因子Bcl-2和bad表达的影响.方法：将体外培养K562细胞进行随机分组,实验组加入20 μg/ml PESV,阳性对照(CTX组)加入CTX作用K562,空白对照(生理盐水组)加入生理盐水200μl.应用流式细胞术(FCM)于24、48、72 h检测细胞凋亡率,荧光定量RT-PCR检测BCR/ABL、Bcl-2、Bad mRNA水平变化.结果：与对照组相比,实验组K562细胞出现时间依赖的凋亡现象.

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对K562细胞凋亡率、BCR/ABL融合基因及凋亡调控因子Bcl-2和bad表达的影响.方法：将体外培养K562细胞进行随机分组,实验组加入20 μg/ml PESV,阳性对照(CTX组)加入CTX作用K562,空白对照(生理盐水组)加入生理盐水200μl.应用流式细胞术(FCM)于24、48、72 h检测细胞凋亡率,荧光定量RT-PCR检测BCR/ABL、Bcl-2、Bad mRNA水平变化.结果：与对照组相比,实验组K562细胞出现时间依赖的凋亡现象.

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对K562细胞凋亡率、BCR/ABL融合基因及凋亡调控因子Bcl-2和bad表达的影响.方法：将体外培养K562细胞进行随机分组,实验组加入20 μg/ml PESV,阳性对照(CTX组)加入CTX作用K562,空白对照(生理盐水组)加入生理盐水200μl.应用流式细胞术(FCM)于24、48、72 h检测细胞凋亡率,荧光定量RT-PCR检测BCR/ABL、Bcl-2、Bad mRNA水平变化.结果：与对照组相比,实验组K562细胞出现时间依赖的凋亡现象.

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对K562细胞凋亡率、BCR/ABL融合基因及凋亡调控因子Bcl-2和bad表达的影响.方法：将体外培养K562细胞进行随机分组,实验组加入20 μg/ml PESV,阳性对照(CTX组)加入CTX作用K562,空白对照(生理盐水组)加入生理盐水200μl.应用流式细胞术(FCM)于24、48、72 h检测细胞凋亡率,荧光定量RT-PCR检测BCR/ABL、Bcl-2、Bad mRNA水平变化.结果：与对照组相比,实验组K562细胞出现时间依赖的凋亡现象.

摘要： 目的:验证FISH技术在检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性.方法：对于异性同胞为供者的异基因造血干细胞移植后的患者,以骨髓细胞学检查作为对照,应用FISH法检测X、Y性染色体及慢性髓性白血病序列特异性bcr-abl融合基因.

摘要： 目的:验证FISH技术在检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性.方法：对于异性同胞为供者的异基因造血干细胞移植后的患者,以骨髓细胞学检查作为对照,应用FISH法检测X、Y性染色体及慢性髓性白血病序列特异性bcr-abl融合基因.

摘要： 目的:验证FISH技术在检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性.方法：对于异性同胞为供者的异基因造血干细胞移植后的患者,以骨髓细胞学检查作为对照,应用FISH法检测X、Y性染色体及慢性髓性白血病序列特异性bcr-abl融合基因.

摘要： 目的:验证FISH技术在检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性.方法：对于异性同胞为供者的异基因造血干细胞移植后的患者,以骨髓细胞学检查作为对照,应用FISH法检测X、Y性染色体及慢性髓性白血病序列特异性bcr-abl融合基因.

摘要： 目的:观察蝎毒多肽(PESV)对慢性髓性白血病NOD/SCID小鼠模型BCR/ABL融合基因及p53、caspases-3表达的影响,探讨其促进慢性髓性白血病细胞凋亡的机制.方法：首先选取经过体外培养的K562细胞株注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内,建立慢性髓性白血病NOD/SCID小鼠模型;对实验小鼠随机分组,分别给予不同浓度的PESV进行治疗.治疗1个月后,用Reahime PCR检测小鼠体内BCR/ABL融合基因,应用酶联免疫吸附法检测抑癌基因p53表达水平,应用流式细胞术检测凋亡蛋白酶caspases-3的表达水平.并设立模型组和空白对照组进行比较.

摘要： 目的:观察蝎毒多肽(PESV)对慢性髓性白血病NOD/SCID小鼠模型BCR/ABL融合基因及p53、caspases-3表达的影响,探讨其促进慢性髓性白血病细胞凋亡的机制.方法：首先选取经过体外培养的K562细胞株注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内,建立慢性髓性白血病NOD/SCID小鼠模型;对实验小鼠随机分组,分别给予不同浓度的PESV进行治疗.治疗1个月后,用Reahime PCR检测小鼠体内BCR/ABL融合基因,应用酶联免疫吸附法检测抑癌基因p53表达水平,应用流式细胞术检测凋亡蛋白酶caspases-3的表达水平.并设立模型组和空白对照组进行比较.

摘要： 本发明公开了一种融合基因及其制备方法、融合基因表达载体及其构建方法、融合基因工程菌及其应用，属于基因工程技术领域。该融合基因，将蛋白转导域TAT连接入利尿多肽HKI序列，借助TAT的高效跨膜转运作用，使HKI快速地穿过食道系统内膜进入体内位点，确保HKI在体内运送过程中稳定发挥作用，使棉铃虫过度排泄死亡。本发明融合基因表达载体，将融合基因构建于植物表达载体pB Ⅰ 121中，由35S启动子驱动表达，在植株内高效表达，棉铃虫取食本发明融合基因表达载体遗传转化的转基因植株后3龄棉铃虫幼虫体重增幅明显减少，死亡率高。本发明融合基因工程菌，浸染待发芽植株，实现融合基因遗传转化植株，培育出转基因抗虫植株。

摘要： 本发明公开了一种融合基因及其制备方法、融合基因表达载体及其构建方法、融合基因工程菌及其应用，属于基因工程技术领域。该融合基因，将蛋白转导域TAT连接入利尿多肽HKI序列，借助TAT的高效跨膜转运作用，使HKI快速地穿过食道系统内膜进入体内位点，确保HKI在体内运送过程中稳定发挥作用，使棉铃虫过度排泄死亡。本发明融合基因表达载体，将融合基因构建于植物表达载体pB Ⅰ 121中，由35S启动子驱动表达，在植株内高效表达，棉铃虫取食本发明融合基因表达载体遗传转化的转基因植株后3龄棉铃虫幼虫体重增幅明显减少，死亡率高。本发明融合基因工程菌，浸染待发芽植株，实现融合基因遗传转化植株，培育出转基因抗虫植株。

摘要： 本发明的目的在于，提供一种在癌症中鉴定能够成为预测药剂的治疗有效性的指标的基因、以该基因为目标预测药剂的治疗有效性的新型的方法，并进行了肺腺癌的全转录组测序。其结果，鉴定了KIF5B基因和RET基因的框内融合转录产物。另外，该KIF5B-RET基因融合在日本人肺腺癌的6/319（2%）、美国人肺腺癌的1/80（1%）中被检测出。而且发现，该7例均不显示EGFR、KRAS、ALK癌基因这样的公知的活化突变，因此，判明该基因融合为癌化中的责任突变（驱动突变）。该基因融合被认为是导致RET酪氨酸激酶蛋白的稳定活化的因素，因此，对于检测出该基因融合的患者，以RET酪氨酸激酶抑制剂进行的治疗是有效的。

摘要： 本发明提出一种BCR‑ABL融合基因检测试剂盒和BCR‑ABL融合基因检测方法。所述BCR‑ABL融合基因检测试剂盒包括多种引物和多种探针；所述BCR‑ABL融合基因检测方法包括：以所得样本的RNA为模板，利用多种所述引物和多种所述探针对所述RNA进行微滴式数字PCR扩增；计算BCR‑ABL融合基因与ABL基因拷贝数比值，得到BCR‑ABL融合基因的突变比例。本发明可有效检测3种类型的BCR‑ABL融合基因0.001％的低频突变，特异性强，灵敏度高，检测周期短，结果严谨可靠，实用性强，为慢粒白血病患者诊断以及临床监测提供科学依据。

摘要： 本发明公开了融合基因检测参考品的制备方法及融合基因检测参考品的应用。该方法采用阴性DNA对融合基因阳性片段库进行稀释，得到包括至少1个稀释梯度的融合基因检测参考品；所述融合基因阳性片段库包括至少11个融合基因阳性片段。本发明采用多个融合基因阳性片段，检测覆盖范围广，为将来克服DNA层面融合检测难、漏检多提供了一个新思路，为融合基因检测产品的性能评价标准提供了一个检测的样板，为融合检测技术的进步提出了一个新指标，具有广泛的应用前景和巨大的产业价值。

摘要： 本发明公开了修饰间充质干细胞的融合基因、具有该融合基因的质粒、慢病毒颗粒、干细胞及应用，该融合基因包含编码分泌信号蛋白的核酸人工序列，编码肺表面活性物质蛋白D的核酸人工序列，编码人源化肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的核酸人工序列，编码自剪切多肽的核酸人工序列，编码Tat蛋白的核酸人工序列，编码单纯疱疹病毒胸苷激酶的核酸人工序列；且以上核酸人工序列顺序依次串联。本发明构建了共同表达TRAIL和HSV‑TK的载体，产生双重的杀伤肿瘤效果。

摘要： 本发明公开了一种基于Ion Torrent测序平台融合基因检测文库的构建方法及融合基因检测的方法。其中，该构建方法包括以下步骤：S1，对样品DNA进行片段化，得到DNA片段；S2，对DNA片段进行末端修复及加碱基A；S3，连接序列已知的接头；S4，进行PCR扩增，得到样本核酸文库；S5，将样本核酸文库基于目标区域捕获平台的探针杂交捕获融合基因及伴侣基因的DNA片段；以及S6，将S5的产物通过PCR引入测序接头序列，得到融合基因检测文库。应用本发明的技术方案，解决了现有技术中Ion Torrent测序平台因RNA样本不合格导致无法检测基因融合及无法检测未知融合断点的融合类型问题。

摘要： 本发明提供了一种Nisin-rbLF-N融合基因、含有该基因序列的表达载体，以及能够高效表达Nisin-rbLF-N融合基因的重组毕赤酵母菌；另外，本发明还提供了所述重组毕赤酵母菌的诱导培养方法。本发明通过PCR方法，将融合基因Nisin-rbLF-N克隆到真核表达载体pPIC9K中，转化毕赤酵母GS115后进行诱导表达，能够表达出可观的融合蛋白。去糖基化后的融合蛋白经过复合蛋白酶酶解，具有抑干酪乳杆菌(G+菌)和大肠杆菌(G-菌)的作用。

摘要： 本发明公开了一种藻蓝蛋白/嵌合降钙素融合基因、融合蛋白、重组质粒、转基因酿酒酵母及应用。本发明将构建得到的线性rDNA2‑leu2‑Ppgk‑cpcB/5hsCT‑rDNA1片段以rDNA为同源重组位点介导整合到亮氨酸缺陷型酿酒酵母中获得转基因酵母BY4742‑LPB5，实现了外源基因在酿酒酵母细胞内的高效稳定表达，大大提高了降钙素的表达稳定性，且消除了抗生素等选择标记给后期工业化生产带来的环境污染不良影响或食品安全性问题。酿酒酵母生产周期短，发酵技术成熟，安全性好，且转基因酿酒酵母不需要蛋白提取、切割加工和纯化等繁琐工艺就可以直接口服，极大地降低了工业化生产成本。

摘要： 本发明公开了一种基于基因修饰得到的人重组干扰素融合基因、融合蛋白及其制备方法，属于生物制品技术领域。基于基因修饰得到人重组干扰素IFN‑β的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由基因编码的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明对人重组干扰素IFN‑β基因序列进行扩增，与质粒pET‑28a(+)相连接得到融合基因，再将融合基因转染至大肠杆菌BL21(DE3)中进行扩增和表达得到了可溶性的融合蛋白，解决了大肠杆菌中无法获得可溶性干扰素的问题。本发明还提供了从稳定细胞系获得高纯度的IFN‑KE50蛋白的纯化方法，由于其具有组氨酸标签，用固定金属镍进行亲和层析可以对目标蛋白进行有效的纯化，纯化后蛋白纯度可达到94.8％。简化了后续的纯化步骤，并可以获得更高的纯度。