琼脂扩散试验

摘要： 为掌握国内牛源多杀性巴氏杆菌流行的主要荚膜群及脂多糖基因型,建立了检测多杀性巴氏杆菌(Pm)及其A、B荚膜群的三重PCR(PmAB-3PCR)以及检测3个脂多糖基因型的三重PCR(LPS-3PCR)方法,检验了其特异性和敏感性,用感染Pm小鼠的组织和人工污染Pm的牛鼻拭子样品进行了临床模拟检验,并对30株P m进行了PCR检测和传统血清学分型比较.结果显示:PmAB-3PCR特异性好,PmAB-3PCR和LPS-3PCR的DNA检测限分别为10～100 pg和1 ng,二者对菌液的检测限分别为200～2000 CFU和2000～20000 CFU.模拟临床样品PmAB-3PCR检测结果与细菌分离结果100％一致.PmAB-3PCR与琼扩试验的符合率为84％,二者检出的阳性率分别为88％和72％,差异不显著(P>0.05);LPS-3PCR与琼扩试验的符合率为60％,检出的阳性率分别为90％和50％,差异显著(P<0.05).结果表明,建立的两组三重PCR方法准确高效且重复性好,可取代常规血清学方法用于国内牛巴氏杆菌病的诊断、流调和疫苗株筛选.

摘要： 为确定瓮安县某养殖场鸡死亡的病因,通过病理解剖、琼脂扩散试验、细菌分离培养鉴定对病例进行诊断.结果:病死鸡的胸肌、腿肌有明显条状出血,法氏囊肿大、出血;传染性法氏囊病病毒琼脂扩散试验阳性;肝脏中分离出大肠杆菌,且对新霉素、恩诺沙星敏感性高.结论:病例确诊为鸡传染性法氏囊病与大肠杆菌病混合感染.

摘要： 为便于快速、准确检测猪圆环病毒2型(PCV2),减少其对我国养猪业的威胁,建立了PCV2 Cap蛋白琼脂扩散试验(AGP)检测方法.应用表达制备好的PCV2 Cap蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备多克隆抗体并进行抗体效价测定.确定AGP最佳工作条件,并进行抗体特异性、稳定性及符合率试验.结果显示:制备的多克隆抗体ELISA效价可达1:12800,AGP效价可达1:32,表明其具有良好的特异性、稳定性;对20份PCV2 Cap蛋白抗原进行检测,发现其结果与应用标准猪血清抗体检测结果符合率为100％.结果表明,制备的抗PCV2 Cap蛋白多克隆抗体可替代标准抗体,用于PCV2 Cap蛋白的AGP试验检测.本研究为PCV2检测以及后续的免疫学特性研究提供了技术支撑.

摘要： 目的:对一种新型生物止血流体膜从体外细胞毒性和在体皮肤致敏性两方面进行生物相容性评价.方法:将20只豚鼠分为3组,分别为试样组(10只)、阴性对照组(5只)和阳性对照组(5只);采用生物止血流体膜与小鼠成纤维细胞(L-929)间接接触的琼脂扩散试验,在染毒24 h后,评判试样的褪色指数和溶解指数,并根据细胞反应评价试样的体外细胞毒性.制备生物止血流体膜的浸提液,采用最大剂量法试验评价试样对豚鼠的皮肤致敏性.激发后24 h和48 h,根据标准对激发部位皮肤红斑和水肿的反应进行评分并计算致敏率,对试样引起豚鼠产生皮肤致敏的潜在可能作出评价.结果:生物止血流体膜经琼脂扩散,对L-929细胞染毒24h后,细胞形态正常,贴壁生长良好,胞质内有离散颗粒,可见少量细胞圆缩和悬浮死细胞,细胞间可见间隙,细胞反应为1级,呈现轻度细胞毒性;在激发结束后的各个观察时间点,试样组豚鼠皮肤红斑和水肿记分均为0,未显示有引起皮肤致敏的潜在可能性.结论:在当前试验条件下该生物止血流体膜有良好的体外细胞相容性和体内免疫相容性.

摘要： 由于琼脂扩散试验操作简单、所用仪器少、结果容易判断,因此临床中常用于各种疾病诊断及抗体效价检测但是琼脂扩散试验容易受到多种因素的干扰而导致试验特异性、敏感性、精确性等受到影响,甚至出现无法判定结果的情况.就琼脂扩散试验的主要影响因素进行分析,为能给实验室技术人员做琼脂扩散试验时提供参考和帮助.

摘要： 目的 比较免疫电泳技术与琼脂扩散试验诊断布鲁氏病的效果.方法 选择2015年7月—2016年10月于我院就诊的布鲁氏病可疑患者144例为研究对象,经联合检测确诊为布鲁氏病76例,非布鲁氏病68例.所有患者均经免疫电泳技术与琼脂扩散试验进行疾病诊断,并对比两种方法诊断结果的灵敏度、特异度及准确性.结果 琼脂扩散试验在布鲁氏病诊断中的灵敏度为77.63％,特异度为91.18％,准确性为84.03％,免疫电泳技术在布鲁氏病诊断中的灵敏度为93.42％,特异度为92.65％,准确性为93.06％,免疫电泳技术在布鲁氏病临床诊断中的灵敏度、特异性及准确性均高于琼脂扩散试验,差异有统计学意义(P<0.05).结论 免疫电泳技术在布鲁氏病临床诊断中的应用效果好于琼脂扩散试验,灵敏度及特异度高,可降低误诊及漏诊风险,提高诊断结果准确性.

摘要： 马的传染性贫血病简称马传贫(EIA),是由马传染性贫血病毒引起马属动物(马、驴、骡)的一种慢性传染病.通过对海东地区4县2区420份马属动物血清进行检测,结果为阴性,现介绍如下.

摘要： 本文根据流行病学调查情况、临床症状以及病理解剖等基本情况,同时结合实验室诊断,对江苏某草鸡养殖场的发病情况进行了诊断,检测结果显示为鸡的马立克氏病.

摘要： 目前我国各种牛群中均有传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染,对畜牧业生产有很严重的危害.为了对唐山市遵化县某奶牛场送检的5～6日龄病死犊牛及发病奶牛进行确诊,试验观察了发病犊牛及奶牛的临床症状,对6头病死犊牛进行了病理剖检,对奶牛鼻拭子、肾脏、死胎、血液等病料进行了细菌分离培养、琼脂扩散试验及PCR鉴定,最后确诊发病奶牛为传染性鼻气管炎.

摘要： 2013年7月,甘肃省某鸡场50日龄鸡发生疑似马立克氏病(MD),导致大批死亡.为进一步确诊,分别对5例病鸡采集样品进行琼脂扩散试验和病理组织学观察.结果显示,琼脂扩散试验呈马立克氏病病毒(MDV)抗原阳性.病理学观察,病鸡肝、脾、肾、心等实质器官程度不等肿大,色泽变淡,形成有大小不等和数量不一的灰白色结节.部分病鸡坐骨神经呈单侧性不规则肿粗.病理组织学观察,实质器官及坐骨神经组织中,均有大量多形态淋巴样肿瘤细胞聚集和散在.证明该鸡场鸡病为马立克氏病,高异型性的淋巴样肿瘤细胞的广泛浸润为病理变化特点.

摘要： 从1头患病仔猪分离到疑似副猪嗜血杆菌.该菌株高菌量腹腔接种能引起小鼠死亡.琼脂扩散试验结果表明该菌抗原与KRG 11型抗血清形成强沉淀线,与KRG 7型等抗血清有弱反应.通过表型鉴定、生化试验、PCR鉴定、23S rRNA基因序列分析,证明其为副猪嗜血杆菌.

摘要： 对40份盲样采用AGID、HA-HI、RT-PCR进行检测禽流感。试验结果如下:M1、M2、M4、M5为禽流感抗体阳性；B3、B7、B10、B14、B19为H5抗体阳性；B2、B8、B16、B17、B22为H7抗体阳性；B6、B9、B11、B18、B23为H9抗体阳性；B133、B164、B279为H5亚型流感病毒检测阳性；B010、B100、B106为其他亚型A型流感病毒阳性。M3、B1、B4、B5、B12、B13、B15、B20、B21、B24、B25为禽流感抗体阴性；B078、B277、B293、B387为禽流感阴性。

摘要： 对40份盲样采用AGID、HA-HI、RT-PCR进行检测禽流感。试验结果如下:M1、M2、M4、M5为禽流感抗体阳性；B3、B7、B10、B14、B19为H5抗体阳性；B2、B8、B16、B17、B22为H7抗体阳性；B6、B9、B11、B18、B23为H9抗体阳性；B133、B164、B279为H5亚型流感病毒检测阳性；B010、B100、B106为其他亚型A型流感病毒阳性。M3、B1、B4、B5、B12、B13、B15、B20、B21、B24、B25为禽流感抗体阴性；B078、B277、B293、B387为禽流感阴性。

摘要： 对40份盲样采用AGID、HA-HI、RT-PCR进行检测禽流感。试验结果如下:M1、M2、M4、M5为禽流感抗体阳性；B3、B7、B10、B14、B19为H5抗体阳性；B2、B8、B16、B17、B22为H7抗体阳性；B6、B9、B11、B18、B23为H9抗体阳性；B133、B164、B279为H5亚型流感病毒检测阳性；B010、B100、B106为其他亚型A型流感病毒阳性。M3、B1、B4、B5、B12、B13、B15、B20、B21、B24、B25为禽流感抗体阴性；B078、B277、B293、B387为禽流感阴性。

摘要： 对40份盲样采用AGID、HA-HI、RT-PCR进行检测禽流感。试验结果如下:M1、M2、M4、M5为禽流感抗体阳性；B3、B7、B10、B14、B19为H5抗体阳性；B2、B8、B16、B17、B22为H7抗体阳性；B6、B9、B11、B18、B23为H9抗体阳性；B133、B164、B279为H5亚型流感病毒检测阳性；B010、B100、B106为其他亚型A型流感病毒阳性。M3、B1、B4、B5、B12、B13、B15、B20、B21、B24、B25为禽流感抗体阴性；B078、B277、B293、B387为禽流感阴性。

摘要： 对40份盲样采用AGID、HA-HI、RT-PCR进行检测禽流感。试验结果如下:M1、M2、M4、M5为禽流感抗体阳性；B3、B7、B10、B14、B19为H5抗体阳性；B2、B8、B16、B17、B22为H7抗体阳性；B6、B9、B11、B18、B23为H9抗体阳性；B133、B164、B279为H5亚型流感病毒检测阳性；B010、B100、B106为其他亚型A型流感病毒阳性。M3、B1、B4、B5、B12、B13、B15、B20、B21、B24、B25为禽流感抗体阴性；B078、B277、B293、B387为禽流感阴性。

摘要： 将MDV血清1型疫苗毒株CVI988/Rispens的SPF鸡胚成纤维细胞培养上清液,用饱和硫酸铵法进行浓缩100倍后,经琼脂免疫扩散(AGP)试验,检测到了与MDV羽囊抗原沉淀线相吻合的抗原成分.而用CVI988/Rispens疫苗分别免疫1日龄SPF鸡和罗曼鸡,再用MDV琼扩阳性血清对鸡群不同时期的羽囊进行常规AGP法检测,结果显示:在免疫后第3~8周内均未检测到特异性AGP沉淀线;若取10~30个富含羽髓的羽根用2ml磷酸缓冲液(PBS)浸提后,其离心上清蒸发浓缩15~20倍后再测,则在免疫后第3~4周,SPF鸡和罗曼鸡都呈100﹪阳性,其后则迅速减小,并于第5周后(SPF鸡)和第6周后(罗曼鸡)的检测均为阴性;而7.5~10倍的浓缩仅在免疫后第3~4周呈阳性.由此推断,CVI988/Rispens疫苗免疫鸡含有不能为常规AGP法直接检测到的低水平的阶段性羽囊MDV抗原,该疫苗的应用并不影响经典AGP法对鸡群MDV强毒感染或MD污染的特异性诊断与监测.

摘要： 将MDV血清1型疫苗毒株CVI988/Rispens的SPF鸡胚成纤维细胞培养上清液,用饱和硫酸铵法进行浓缩100倍后,经琼脂免疫扩散(AGP)试验,检测到了与MDV羽囊抗原沉淀线相吻合的抗原成分.而用CVI988/Rispens疫苗分别免疫1日龄SPF鸡和罗曼鸡,再用MDV琼扩阳性血清对鸡群不同时期的羽囊进行常规AGP法检测,结果显示:在免疫后第3~8周内均未检测到特异性AGP沉淀线;若取10~30个富含羽髓的羽根用2ml磷酸缓冲液(PBS)浸提后,其离心上清蒸发浓缩15~20倍后再测,则在免疫后第3~4周,SPF鸡和罗曼鸡都呈100﹪阳性,其后则迅速减小,并于第5周后(SPF鸡)和第6周后(罗曼鸡)的检测均为阴性;而7.5~10倍的浓缩仅在免疫后第3~4周呈阳性.由此推断,CVI988/Rispens疫苗免疫鸡含有不能为常规AGP法直接检测到的低水平的阶段性羽囊MDV抗原,该疫苗的应用并不影响经典AGP法对鸡群MDV强毒感染或MD污染的特异性诊断与监测.

摘要： 将MDV血清1型疫苗毒株CVI988/Rispens的SPF鸡胚成纤维细胞培养上清液,用饱和硫酸铵法进行浓缩100倍后,经琼脂免疫扩散(AGP)试验,检测到了与MDV羽囊抗原沉淀线相吻合的抗原成分.而用CVI988/Rispens疫苗分别免疫1日龄SPF鸡和罗曼鸡,再用MDV琼扩阳性血清对鸡群不同时期的羽囊进行常规AGP法检测,结果显示:在免疫后第3~8周内均未检测到特异性AGP沉淀线;若取10~30个富含羽髓的羽根用2ml磷酸缓冲液(PBS)浸提后,其离心上清蒸发浓缩15~20倍后再测,则在免疫后第3~4周,SPF鸡和罗曼鸡都呈100﹪阳性,其后则迅速减小,并于第5周后(SPF鸡)和第6周后(罗曼鸡)的检测均为阴性;而7.5~10倍的浓缩仅在免疫后第3~4周呈阳性.由此推断,CVI988/Rispens疫苗免疫鸡含有不能为常规AGP法直接检测到的低水平的阶段性羽囊MDV抗原,该疫苗的应用并不影响经典AGP法对鸡群MDV强毒感染或MD污染的特异性诊断与监测.

摘要： 将MDV血清1型疫苗毒株CVI988/Rispens的SPF鸡胚成纤维细胞培养上清液,用饱和硫酸铵法进行浓缩100倍后,经琼脂免疫扩散(AGP)试验,检测到了与MDV羽囊抗原沉淀线相吻合的抗原成分.而用CVI988/Rispens疫苗分别免疫1日龄SPF鸡和罗曼鸡,再用MDV琼扩阳性血清对鸡群不同时期的羽囊进行常规AGP法检测,结果显示:在免疫后第3~8周内均未检测到特异性AGP沉淀线;若取10~30个富含羽髓的羽根用2ml磷酸缓冲液(PBS)浸提后,其离心上清蒸发浓缩15~20倍后再测,则在免疫后第3~4周,SPF鸡和罗曼鸡都呈100﹪阳性,其后则迅速减小,并于第5周后(SPF鸡)和第6周后(罗曼鸡)的检测均为阴性;而7.5~10倍的浓缩仅在免疫后第3~4周呈阳性.由此推断,CVI988/Rispens疫苗免疫鸡含有不能为常规AGP法直接检测到的低水平的阶段性羽囊MDV抗原,该疫苗的应用并不影响经典AGP法对鸡群MDV强毒感染或MD污染的特异性诊断与监测.

摘要： 本发明涉及一种琼脂免疫扩散试验打孔器，包括密封气腔、转换头和打孔管，密封气腔为上下两端均敞口设置的筒状结构，密封气腔中上部设有按压回弹装置，按压回弹装置的底端通过弹簧固接有活塞，活塞活动连接在密封气腔中，密封气腔外壁底端设有外螺纹；密封气腔侧边设置一个红外温度传感器，转换头为上端敞口设置的筒状结构，转换头内壁上端设有与外螺纹相配合的内螺纹，转换头外侧边缘设有边缘密封圈，转换头底壁中心处设有中心孔；打孔管是由前部筒状管和尾部圆片组成的一体式结构，前部筒状管贯穿尾部圆片，前部筒状管直径与中心孔内径相匹配，尾部圆片的边缘还设有密封圈；本发明结构简单，适宜推广使用。

摘要： 本实用新型公开了一种体外细胞毒性试验琼脂扩散法加样模具装置，包括呈整体呈盒体结构设计的且上端敞口的培养皿，在所述培养皿内部底面水平设有一层琼脂层；其特征在于，在培养皿内部的所述琼脂层上表面竖向向上放置有样品放置筒，且使得所述样品放置筒下端面与培养皿内的琼脂层上表面相贴；所述样品放置筒为多个且在水平方向上呈多边形分布，并且沿多边形轮廓方向相邻的两个样品放置筒之间各自通过水平的连接管相连以使得连接管和样品放置筒共同围成封闭的多边形；并且在连接管上沿其长度方向设置有长度刻度。本实用新型具有方便使用，能够对样品形状进行约束，能够更加方便对样品毒性进行量化以方便对样品毒性进行对比的优点。

摘要： 本实用新型涉及一种琼脂免疫扩散试验打孔器，包括密封气腔、转换头和打孔管，密封气腔为上下两端均敞口设置的筒状结构，密封气腔中上部设有按压回弹装置，按压回弹装置的底端通过弹簧固接有活塞，活塞活动连接在密封气腔中，密封气腔外壁底端设有外螺纹；密封气腔侧边设置一个红外温度传感器，转换头为上端敞口设置的筒状结构，转换头内壁上端设有与外螺纹相配合的内螺纹，转换头外侧边缘设有边缘密封圈，转换头底壁中心处设有中心孔；打孔管是由前部筒状管和尾部圆片组成的一体式结构，前部筒状管贯穿尾部圆片，前部筒状管直径与中心孔内径相匹配，尾部圆片的边缘还设有密封圈；本实用新型结构简单，适宜推广使用。

摘要： 本实用新型公开了一种琼脂免疫扩散试验专用快速凝胶板，包括凝胶槽和设置在凝胶槽上端的凝胶梅花桩支架,所述凝胶槽为一个上端开口的盒体,所述凝胶梅花桩支架包括可独自架于凝胶槽上端工型支架,所述工型支架上设置有用于形成凝胶孔的立柱,所述立柱的长度小于支架高度。本实用新型由玻璃或透明的亚克力材料制作一个长方体的凝胶槽盒体和带有七个圆柱体梅花桩支架组成的琼脂免疫扩散试验专用快速凝胶板，该快速凝胶板简化琼脂免疫扩散试验操作步骤，提高试验成功率。

摘要： 本实用新型涉及琼脂免疫扩散试验装置，具体是一种用于琼脂免疫扩散试验的抽吸式打孔器，其特征在于：包括管筒、推拉杆和活塞；所述活塞为圆盘状，圆盘的直接与管筒的内径相当；所述活塞中心与推拉杆连接；所述管筒顶端面上具有多个等间距的孔柱；所述孔柱内径为3‑5mm。本装置简化了目前琼脂免疫扩散试验的步骤，减少了失败操作因素，提高了试验成功率，更加有利于琼脂免疫扩散试验在免疫学、生物学以及医学等方面的应用。

摘要： 本实用新型提供了一种用于琼脂扩散试验的多道移液器及其收纳组件，包括移液器本体，移液器本体顶端设置有控制按钮与枪头脱卸按钮，移液器本体设置有体积显示窗口，移液器本体底端设置有套筒，套筒连接有吸液组件，吸液组件包括吸液外壳，吸液外壳内设置有六个平行的吸液通道，六个吸液通道呈圆周状均匀分布，吸液通道的端部设置有弹性吸嘴，移液器本体顶端一侧设置有托钩，收纳组件包括底座，底座为水平设置的矩形板，底座一端固定连接有斜板，斜板与底座连接处的夹角小于90°，当移液器放置于斜板时，托钩底部靠接于斜板顶部。本实用新型的有益效果为：设计合理，结构简单，安全可靠，可以大大节约加样时间，提高检测效率，省时省力。

摘要： 本实用新型公开了一种牛疫病血清学检测用琼脂扩散试验保湿盒，涉及医学检测技术领域。本实用新型包括盒本体，盒本体一表面连接有水箱，盒本体内部一表面连接有抽水泵，抽水泵一表面连接有抽水管，抽水管与水箱位置相适应，抽水泵一侧面连接有出水管，出水管一侧面连接有喷水器，盒本体另一表面连接有湿度测量仪，盒本体内部上表面连接有电机。本实用新型通过设置连接头、摇杆、摇柱、连接杆、湿度测量仪、抽水泵，当湿度低于设定值时，抽水泵将水箱中的水从喷水器喷出，增大盒本体内的湿度，当湿度高于设定值时，电机通过连接头控制摇杆多方位转动，摇杆通过摇柱和连接杆控制风扇头带动扇叶多方位转动，降低盒本体内的湿度。

摘要： 本实用新型公开一种新型管式双向琼脂扩散试验简易装置，包括扩散管和密封装置；所述密封装置包括密封壳体；所述密封壳体顶面为开放设置；所述密封壳体内腔底面固接有两塑料脊；两所述塑料脊互相平行设置；所述密封壳体顶部设置有密封盖；所述塑料脊两侧分别设置有固定平台；所述密封盖与所述密封壳体通过固定栓连接；所述扩散管中部放置在两所述塑料脊顶面；所述扩散管两端分别放置在两所述固定平台顶面。能够实现节约琼脂用量，使待检样品用量减少，节约试验成本；将扩散管两端开口密封减少了样品的蒸发，解决了保湿的问题。

摘要： 本实用新型公开了一种可控温型琼脂扩散试验保湿盒，包括盒体，所述盒体内设置有多个琼脂板支架，所述盒体的内壁设置有多个与所述琼脂板支架配合的滑动支架，所述盒体内设置有温控装置，所述温控装置包括温度探头、控制面板和电加热装置，所述温度探头的输出端与所述控制面板的输入端连接，所述控制面板的输出端与所述电加热装置的输入端连接。本实用新型通过温控装置对盒体内进行恒温处理，在使用时盒体底部预留少量水，可以将盒体内维持相对的温度和湿度平衡，提高了对温度控制的准确性，此外琼脂板支架倾斜式底座的设计可以提高琼脂板放置的稳定性，防止晃动，从而减少对影响试验结果的判定。

摘要： 本实用新型提供一种检验琼脂扩散试验结果的暗视野聚光观测仪，包括放大镜、折叠支架、外壳体，所述放大镜位于外壳体上方，放大镜和外壳体通过折叠支架连接；所述外壳体与所述放大镜相对的一面为斜面，斜面上开有观察窗，观察窗内设置有用于放置观察平板或培养皿的支撑架；观察窗的后方设置有主光源LED灯。本实用新型提出的检验琼脂扩散试验结果的暗视野观测仪，以外壳体形成暗视野，外壳体内的主光源LED灯从后部斜射，明暗、上下可调，使扩散试验结果清晰，利于消除主观性误差，平板斜置，平板倾斜度可调；放大镜带有上光源LED，通过弯曲折叠架以调节放大镜的位置，利于观察，实验者不用费眼，操作舒适，提高了效率。