疟原虫

摘要： 目的 建立一种疟原虫雌性配子体的分子检测法.方法 根据疟原虫雌性配子体特异性mRNA靶标(待测靶序列)即动合子表面蛋白(s25)的转录产物,设计特异性的捕获探针和连接探针.血液样品经裂解释放的mRNAs,无需核酸提取,通过"三明治"杂交被捕获到96孔板表面.洗去未结合探针后,将结合在mRNA靶标上的连接探针进行连接,得到两端为特殊设计序列的单链扩增模板.再用通用引物进行染料法qPCR扩增,或在端部设计TaqMan探针序列,用通用引物和通用TaqMan探针进行探针法qPCR扩增.评价这一基于捕获和连接扩增的方法(CLIP-PCR)的灵敏度、特异性和重复性并与普通的RT-qPCR方法进行比较,将其应用于临床样品的检测.结果 该CLIP-PCR具有较高的灵敏度和特异性.与普通的RT-qPCR一样,均可检测低至11拷贝数的s25 mRNA靶标;而且该CLIP-PCR操作更简便.该CLIP-PCR可准确检测到疟疾患者血液中的雌性配子体.可将96个样品的检测时间缩短至3 h.结论 建立了灵敏高效的染料法和通用TaqMan探针法CLIP-PCR检测疟原虫雌性配子体,为疟疾传播的控制、配子体大规模筛查奠定了基础.

摘要： 自2017年至今,我国保持无本地原发疟疾病例报告,但全国每年从境外输入约3000例病例,面临境外疟疾输入以及输入后再传播的风险。因此,全社会仍要继续努力,推动落实防止疟疾输入再传播策略措施,继续维持消除疟疾状态。疟疾,俗称“打摆子”“瘴气”“冷热病”,是由疟原虫寄生于人体引起的一种传染病。根据发作周期可分为间日症、恶性症和三日疟三种。一、疟疾的传播途径疟疾主要通过蚊虫叮咬所致,其传播媒介主要是按蚊。按蚊叮咬患者或带虫者后,再叮咬正常人时,就将疟原虫传给后者。

摘要： 细菌感染及抗生素耐药是一个全球性的问题,2019年约有150万人死于结核菌感染,130万人死于各种耐药菌感染。由于耐药现象日益严重,世界卫生组织预测至2050年耐药菌每年将造成一千万人的死亡。此外寄生虫引起的感染也不可忽视——2020年62万人死于疟疾(由顶复门类寄生虫疟原虫引起),而疟原虫对现有抗疟药物包括青蒿素都产生了耐药,加剧了防治疟疾的难度。

摘要： 目的对1例疟疾复发患者通过实验室多种方法,并结合其临床症状,做出快速准确的诊断。方法对患者进行血常规检查、疟疾快速诊断试剂盒(RDTs)检测和形态学检查,结合其临床症状进行初步诊断;再通过巢式PCR和一代测序的方法,诊断虫种并鉴定亚型。结果通过血常规散点图和RDTs检测的结果,初步判断为疟原虫感染,且排除恶性疟疾的可能;形态学检查判断为卵形疟原虫多重感染,一代测序结果经NCBI中的核酸数据库比对后,鉴定为卵形疟原虫P.ovale curtisi亚型。结论本实验室通过3种方法在短期内明确诊断此病例为输入性罕见远期复发卵型疟原虫多重感染,并鉴定出了虫种亚型。

摘要： 由于疟原虫对传统抗疟疾药物出现耐药性问题,导致感染疟疾的人数居高不下,仅在2019年全球就有超过2亿人感染疟疾.疟原虫的耐药性问题给消除疟疾带来了巨大的挑战,同时也促使新药的研发加快脚步,目前已有多项抗疟疾新药进入临床试验阶段.从传统抗疟疾药物、利用不同方法筛选的抗疟疾新药以及新发现的抗疟疾药物靶点几个方面综述抗疟疾药物的研究进展,为抗疟疾新药的研发提供参考.

摘要： 目的评价疟原虫胶体金快速检测试剂盒法(RDTs法)在疟疾诊断中的应用价值。方法收集加蓬弗朗斯维尔中加友谊医院2020年9月至2021年6月105例疑似疟疾患者(中国人25例,加蓬人80例)全血标本,应用RDTs法进行检测,以显微镜镜检法作为金标准,分析RDTs法诊断恶性疟、非恶性疟的灵敏度、特异度,以及2种检测方法的综合推广率及检测时间。结果显微镜镜检法检出阳性患者92例,阳性率为87.6%,RDTs法检出阳性患者91例,阳性率为86.7%。RDTs法检测恶性疟的灵敏度为100.0%,特异度为94.7%,检测非恶性疟的灵敏度为66.7%,特异度100.0%。RDTs法、显微镜镜检法检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。根据10项单因素指标比对分析,RDTs法的综合推广率[86.7%(26/30)]高于显微镜镜检法[63.3%(19/30)],显微镜镜检法检出时间[(40.0±5.2)min]长于RDTs法[(12.6±1.5)min],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论RDTs法可作为显微镜镜检法的辅助检测工具,在医疗条件落后的非洲地区推广使用。

摘要： 目的:通过对血液分析仪提示疟原虫感染的病例,探讨合理应用仪器提示的相关信息提高疟原虫感染的诊断效率,避免漏诊和误诊。方法:采用回顾性性分析的方法对2例疟原虫感染的病例进行分析总结,并查阅相关文献对血液分析仪性能及疟原虫感染诊断进行复习介绍。结果:血液分析仪器结果信息结合显微镜镜检技术,能够有效提高血液疟原虫感染诊断的准确度及效率,避免临床误诊及漏诊。结论:仪器结果信息能够协助发现疟原虫的感染病例,但不能过于依赖仪器结果信息,而忽略形态学镜检。

摘要： 从人类有记载开始,疟疾就和人类如影随形,祸害人类长达几千年的时间。传播疟疾的寄生虫从单细胞生物中发展而来,经过漫长的进化,最后传染到了人类身上。2021年,世卫组织宣布中国获得无疟疾认证,标志着我国在抗疟史上取得了绝对性胜利。然而在世界上的其他国家,尤其是非洲区域,疟疾仍在肆虐。论文采用拟人化手法通过暗世界里疟原虫的自述,引领读者认识疟疾的危害、病因和传播方式,以及人类的抗疟利器——药物。重点介绍了DDT、奎宁和青蒿素的功效及发展情况,未来中国神草继续造福世界。最后展示了人类在与疟疾抗争中获取的与诺贝尔奖相关的科学成就,并展望了疟原虫作为寄生者的黯淡未来。

摘要： 按照我国现行诊断标准以及WHO—ECAMM技术要求,对北京口岸2018—2019年收集的可疑疟原虫感染者血样,制作厚薄血膜涂片并进行显微镜检,同时平行进行实时荧光定量PCR检测。结果显示,2018—2019年共收集227件输入性可疑样本,显微镜检结果为:恶性疟129件、间日疟12件、三日疟9件、卵型疟17件、混合感染10件、阴性50件,阳性率78.0%;实时荧光定量PCR结果为:恶性疟110件、间日疟6件、三日疟7件、卵型疟12件、混合感染6件、阴性86件,阳性率62.1%。显微镜检和实时荧光PCR总体一致性达到84.1%,但对于疟原虫感染密度低的血样标本以及混合感染样本,两种检测方法比较,总体阳性率差异明显(χ^(2)=13.0,P<0.005),显微镜检灵敏性高于实时荧光定量PCR检测;且依据WHO—ECAMM技术要求,须在10 min内准确判断阴阳性并确定型别,镜检具备更高的时效性。

摘要： 我在一个四月辞别祖国、辞别满城的牡丹花香前往非洲工作。那时,我定居的城市正被富贵华丽的花簇拥着走向春天的荼蘼。打开非洲地图念叨一些地名,这个行为在出发前成为我每日必做的事情。地图上的非洲,大部分介于南北回归线之间,赤道横穿非洲版图的腰部,这意味着炎热是这块大陆最显著的特征,我知道我将开启没有季节差异的热带生活。在非洲工作过的老同事告诫我:不要带裙装,一定要长袖长裤,以防携带疟原虫的蚊虫叮咬。

摘要： 本文介绍了疟原虫基因检测、分型的意义，阐述了PCR技术、基因序列测定、限制性氏度片段多态性分析、随机扩增多态性DNA分析、单链构象多态性分析等常用基因检测技术和疟原虫基因分型局限性及存在问题。

摘要： 约氏疟原虫虫株Plasmodium yoelii-17XNL与Plasmodiumyoelii-17XL同源，将昆明小鼠分为2组：感染P.yoelii-17XNL的一组小鼠可以存活下来，而感染P.yoelii-17XL的一组小鼠全部死亡。存活下来的小鼠再感染P.yoelii-17XL，疟原虫不生长。提取P.yoelii-17XNL全蛋白作为抗原，用胸腺素原(ProTα)作为免疫佐剂，免疫小鼠。具体方案为：昆明小鼠分为4组，每组6只，A组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白+ProTα：B组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白；C组只注射ProTα；D组为空白对照，以相同体积的生理盐水代替。免疫结束后感染致死的P.yoelii-17XL，1×107个虫/只小鼠。结果：感染后的前10天A组小鼠疟原虫血症平均值要低于其他三组，且最终有3只小鼠存活下来，存活率50%，C组有一只小鼠存活，B组、D组小鼠全部夕匕亡。结论：用P.yoelii-17XNL全蛋白做抗原，用ProTα作为佐剂，比单独用P.yoelii-17XNL全蛋白对小鼠有更好的免疫保护作用，提示了ProTα可以成为一种有潜力的免疫佐剂。

摘要： 目的：建立可现场使用的疟原虫快速检测方法，为检验检疫基层实验室开展筛检和监控工作提供技术手段。方法：通过合成特异引物和探针，系统筛选，优化恒温扩增条件，建立疟原虫核酸等温扩增方法，用免疫层析试纸条快速检测扩增产物，并测试其灵敏度和特异性。结果：疟原虫交叉引物恒温扩增方法灵敏度达到103拷贝/ml，反应特异，操作简便，不需要特殊设备，3h可报告结果。结论：通过应用CPA技术对疟原虫的核酸进行扩增，并应用试纸条检测技术检测核酸扩增产物，检测时间短，具有一定的应用价值。

摘要： 将致死和非致死的约氏疟原虫虫株Plasmodium yoelii-17XNL与P.yoelii-17XL分别感染昆明小鼠：感染P.yoelii-17XNL的一组小鼠可以存活下来，而感染P.yoelii-17XL的一组小鼠全部死亡。存活下来的小鼠再感染P.yoelii-17XL，疟原虫不生长。提取P.yoelii-17XNL全蛋白作为抗原，用胸腺素α原(prothymosin α，ProT α)作为免疫佐剂，免疫小鼠。具体方案为：昆明小鼠分为4组，每组6只，A组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白+ProTα；B组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白；C组只注射ProTα；D组为空白对照，以相同体积的生理盐水代替。免疫结束后感染致死的P.yoelii-17XL，1×10 3个虫/只小鼠。结果：感染后的前10天A组小鼠疟原虫血症平均值要低于其他三组，且最终有3只小鼠存活下来，存活率50%，C组有一只小鼠存活，B组、D组小鼠全部死亡。结论：用P.yoelil-17XNL全蛋白做抗原，用ProTα作为佐剂，比单独用P.yoelii-17XNL全蛋白对小鼠有更好的免疫保护作用，提示了ProTα可以成为一种有潜力的免疫佐剂。

摘要： 将致死和非致死的约氏疟原虫虫株Plasmodium yoelii-17XNL与P. yoelii-17XL分别感染昆明小鼠：感染P.yoelii-17XNL的一组小鼠可以存活下来，而感染P. yoelii-17XL的一组小鼠全部死亡。存活下来的小鼠再感染P. yoelii-17XL，疟原虫不生长。提取P. yoelii-17XNL全蛋白作为抗原，用胸腺素α原(prothymosin α，ProTα)作为免疫佐剂，免疫小鼠。具体方案为：昆明小鼠分为4组，每组6只，A组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白+ProTa;B组免疫P.yoelii-17XNL全蛋白;C组只注射ProTα;O组为空白对照，以相同体积的生理盐水代替。免疫结束后感染致死的P. yoelii-17XL，1×107个虫/只小鼠。结果：感染后的前10天A组小鼠疟原虫血症平均值要低于其他三组，且最终有3只小鼠存活下来，存活率50%，C组有一只小鼠存活，B组、D组小鼠全部死亡。结论：用P.yoelii-17XNL全蛋白做抗原，用ProT α作为佐剂，比单独用P.yoelii-17XNL全蛋白对小鼠有更好的免疫保护作用，提示了ProT α可以成为一种有潜力的免疫佐剂。

摘要： 获得翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因后与表达载体pQE-30重组，然后转化大肠杆菌M15，经IPTG诱导后表述TCTP融合蛋白，薄层扫描结果显示目的蛋白占菌体总蛋白的23.4％，目的蛋白中可溶性蛋白所占比例高于非溶性蛋白.Ni-NTA纯化后C端测序，结果C端13个氨基酸序列与由GenBank国际基因库中恶性疟原虫TCTP基因推导出的C端13个氨基酸序列及组成完全一致.结果表明：成功地在M15中表达了恶性疟原虫海南株TCTP基因，为进一步研究提供了实验材料.

摘要： 目的:通过两种抗疟药体外筛选系统筛检瑞香素类化合物的抗疟活性. 方法:Trager&Jensen法体外培养恶性疟原虫;运用显微镜镜检法和微量荧光法筛选瑞香素抗疟化合物. 结果:DA79和DA78对恶性疟原虫体外有抗疟活性. 结论:虽然瑞香素类抗疟化合物的构效结构还不是很清楚,但本研究将为发现更有效的抗疟化合物提供新的方向.

摘要： 该文扼要阐述了该校热带医学研究所青篙素抗疟团队40多年从事青篙素衍生物及其复方研究和快速灭源灭疟的研究。本文着重论述快速灭源灭疟科技创新突破的主要内容及其重大意义。最近几年，青篙素抗疟团队又研发了1天疗法和治愈率达100%、持效1个月又无副作用的新复方，有利于全民服药的服药率达到100%，有这两个100%的合力，使快速消灭疟疾变得简单而容易。可以预期，任何一个高疟区，一旦FEMSE的第一项措施全民服药启动后，就没有人患疟疾(若有则是因为该员没有参与全民服药)。经过间隔30天的两次全民服药，社区和自然村民众群体在两个月内都没有疟原虫，则蚊媒不可能有疟原虫，因为老一代带疟原虫的蚊媒都已死去，新一代蚊媒又叮吸不到疟原虫。由于某些社区群体服药率欠佳，致全民服药后少数社区每月仍然有1-2例疟疾病人，这些社区必须实施第2措施PCR查源灭源以进一步彻底消灭传染源。还有，流动人口是外来疟疾传播扩散的重要原因，就要靠第3措施早诊断早治疗去及时消灭外来传染源，而且这个新复方在首剂服药当天就能使疟原虫配子体失去感染性而阻断传播。

摘要： 目的：掌握疟疾发病动态,评价防治效果并进行消除疟疾可行性分析。方法：采用发热病人血检、传疟媒介调查资料进行统计分析。结果：2001-2010年10年间开展发热病人血检136243人,检出疟原虫感染者17人,感染率0.012％,年平均发病率百万分之一以下,70％为输入性病例；10年间共捕获按蚊18799只,未发现我市主要的传疟媒介嗜人按蚊、微小按蚊和中华按蚊。结论：长期以来政府卫生行政部门采取一系列有效的综合性防治措施,随着社会经济发展人们生活水平的提高,生活方式卫生行为习惯的改变,农药的广泛施用,防蚊灭蚊措施科学合理,传疟媒介孳生繁殖的环境发生了根本性的变化,疟原虫感染者大幅度下降,为消除疟疾奠定了坚实的基础。

摘要： 目的:为烧伤后输血性疟疾的防治提供参考.方法:观察并分析了15例烧伤后输血性疟疾的临床特征、诊断及治疗.结果:恶性疟2例,间日疟5例,三日疟8例,均为大面积严重烧伤大量输新鲜全血后发病,血中查到疟原虫,受血与供血者查到同一种疟原虫.15例均服用氯喹治愈.结论:严重烧伤大量输全血感染疟疾后的发病潜伏期短,寒战高热易被误诊为创面脓毒症;应对献血者严格把关,采用敏感性高、异性强的检验方法尽早确诊,积极治疗.

摘要： 本发明涉及一种测定疟原虫含量的方法和检测疟原虫含量的系统。上述测定疟原虫含量的方法包括如下步骤：用细胞处理液处理待测样品，得到细胞悬液，细胞处理液中含有4.0g/L～6.0g/L的聚氧乙烯醚和4.0g/L～5.5g/L的4‑羟基哌嗪乙磺酸；将细胞悬液固液分离，收集沉降物，若待测样品含有携带疟原虫的细胞，则携带疟原虫的细胞未裂解且固液分离后置于沉降物中；采用拉曼光谱检测沉降物，获得沉降物对应的拉曼光谱；对拉曼光谱进行分析，若拉曼光谱在拉曼位移为1368cm‑1～1378cm‑1存在拉曼峰，则待测样品含有疟原虫。上述测定方法无需提取疟色素即可测定疟原虫含量，准确度高。

摘要： 本发明公开了一种检测恶性疟原虫HRP2和间日疟原虫LDH的结合蛋白组合及其制备方法和应用。所述结合蛋白组合由检测恶性疟原虫HRP2的结合蛋白1、结合蛋白2和检测间日疟原虫LDH的结合蛋白3、结合蛋白4组成，所述结合蛋白1～4的氨基酸序列如SEQ ID NO:5～8所示。本发明采用噬菌体展示技术以恶性疟原虫HRP2和间日疟原虫LDH为靶抗原，从噬菌体展示蛋白文库中淘选亲和力高、特异性好的结合蛋白组合。利用基因工程技术进行重组表达和纯化，以此结合蛋白组合试剂替代疟疾免疫检测中用抗体试剂，建立胶体金层析快速检测方法，所得试剂盒的储存稳定性高于现有临床检测产品，具有可靠、准确、安全、简便、稳定的优点。

摘要： 本发明公开了一种抗恶性疟原虫HRP‑II的抗体、检测恶性疟原虫的试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗恶性疟原虫HRP‑II的抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体对恶性疟原虫的HRP‑II抗原的亲和力较高，使用该抗体检测恶性疟原虫具有较好的灵敏度和特异性。

摘要： 本申请涉及分子生物学检测术领域，提供了一种等温扩增检测疟原虫属及能区分四种疟原虫种的试剂、试剂盒及其应用，其中，等温扩增检测疟原虫属及能区分四种疟原虫种的试剂包括了SEQ ID No.1～SEQ ID No.30的用于检测疟原虫属及能区分四种疟原虫种的环介导等温核酸扩增引物组，使得用于检测疟原虫属及能区分四种疟原虫种灵敏度高，重复性好、假阴性及假阳性低，检测准确率高，还能够实现通过裸眼观察颜色变化而直接进行结果判断。

摘要： 本发明涉及疫苗V，其包含(A)至少一个分离的多肽链P，其包含(或由其组成)至少九个连续氨基酸部分是来自重复性细胞器蛋白，恶性疟原虫的推定蛋白或间日疟原虫的假定蛋白PVNG_04523，或编码多肽链P的多核苷酸链；(B)至少一种药学上可接受的载体或赋形剂。此外，本发明涉及一种抗体，其可与重复性细胞器蛋白，恶性疟原虫的推定蛋白或间日疟原虫的假定蛋白PVNG_04523或它们的编码多核苷酸链相结合，并涉及其产生方法及其用途。

摘要： 本发明公开了一种检测恶性疟原虫HRP2和间日疟原虫LDH的结合蛋白组合及其制备方法和应用。所述结合蛋白组合由检测恶性疟原虫HRP2的结合蛋白1、结合蛋白2和检测间日疟原虫LDH的结合蛋白3、结合蛋白4组成，所述结合蛋白1～4的氨基酸序列如SEQ ID NO:5～8所示。本发明采用噬菌体展示技术以恶性疟原虫HRP2和间日疟原虫LDH为靶抗原，从噬菌体展示蛋白文库中淘选亲和力高、特异性好的结合蛋白组合。利用基因工程技术进行重组表达和纯化，以此结合蛋白组合试剂替代疟疾免疫检测中用抗体试剂，建立胶体金层析快速检测方法，所得试剂盒的储存稳定性高于现有临床检测产品，具有可靠、准确、安全、简便、稳定的优点。

摘要： 本发明涉及一种测定疟原虫含量的方法和检测疟原虫含量的系统。上述测定疟原虫含量的方法包括如下步骤：用细胞处理液处理待测样品，得到细胞悬液，细胞处理液中含有4.0g/L～6.0g/L的聚氧乙烯醚和4.0g/L～5.5g/L的4‑羟基哌嗪乙磺酸；将细胞悬液固液分离，收集沉降物，若待测样品含有携带疟原虫的细胞，则携带疟原虫的细胞未裂解且固液分离后置于沉降物中；采用拉曼光谱检测沉降物，获得沉降物对应的拉曼光谱；对拉曼光谱进行分析，若拉曼光谱在拉曼位移为1368cm

摘要： 本发明人已经鉴定出Pfs47，来自疟疾寄生虫恶性疟原虫的基因，是这些寄生虫在冈比亚按蚊中存活的关键因素。在非洲冈比亚按蚊是人疟疾的主要天然媒介。通过控制蚊子的免疫系统，Pfs47蛋白可以允许寄生虫在蚊子中存活。本发明人提出P47蛋白(包括Pfs47和Pvs47)作为疫苗或药剂的靶标的用途，所述疫苗或药剂将阻断或降低冈比亚按蚊或其他按蚊中的恶性疟原虫或间日疟原虫感染，从而防止寄生虫在人类中的进一步传播。

摘要： 本发明提供了在治疗和阻止由镰状疟原虫或间日疟原虫引起的疟疾中有用的分离的多肽。特别是来自EBL家族中的蛋白质的结合区以及镰状疟原虫裂殖子上唾液酸结合蛋白(SABP)的多肽。也可以是来自间日疟原虫裂殖子上Duffy抗原结合蛋白(DABP)的多肽。

摘要： 本发明提供了在治疗和阻止由镰状疟原虫或间日疟原虫引起的疟疾中有用的分离的多肽。特别是来自EBL家族中的蛋白质的结合区以及镰状疟原虫裂殖子上唾液酸结合蛋白(SABP)的多肽。也可以是来自间日疟原虫裂殖子上Duffy抗原结合蛋白(DABP)的多肽。