雌性大鼠

摘要： 目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)和邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)暴露对雌性大鼠血清胰岛素水平、氧化应激和胰腺组织中凋亡蛋白的影响。方法将40只SD雌性大鼠随机分为4组,每组10只,分别设置为对照组、DEHP染毒组(1/40 LD50,750 mg·kg^(-1))、DBP染毒组(1/40 LD50,500 mg·kg^(-1))和DEHP+DBP(750+500)mg·kg^(-1)染毒组(联合染毒组),染毒8周末测定空腹血糖值,心尖取血处死,取胰腺组织称量后计算器官系数。测定血清中的胰岛素浓度并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);测定血清中的氧化损伤指标[超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量]。蛋白免疫印记(Western blot)法检测Caspase 3、Caspase 9、Bax、Bcl-2含量的变化。结果与对照组相比,DEHP、DBP单独染毒及联合染毒雌性大鼠体质量增长、胰腺重量和器官系数、末次空腹血糖值的差异均无统计学意义(P均>0.05);联合染毒组可使血清胰岛素浓度升高、HOMA-IR增加、ISI降低(P均<0.05);DEHP、DBP单独染毒以及联合染毒可使SOD活力下降、MDA含量升高,Bax、Caspase 9、Caspase 3蛋白表达增加、Bcl-2蛋白表达下降、Bcl-2/Bax比值下降(P均<0.05)。结论DEHP和DBP联合染毒可导致雌性大鼠糖代谢紊乱;该过程可能通过氧化-抗氧化系统的平衡被破坏从而激活细胞线粒体凋亡通路相关蛋白的表达,诱导胰岛β细胞发生凋亡。

摘要： 目的探讨双酚S(BPS)对青春期雌性大鼠性早熟的作用及可能的机制。方法将60只雌性Wistar大鼠随机分为5组,分别为对照组、不同浓度[0.2mg/(kg·d)、1mg/(kg·d)、5mg/(kg·d)]BPS组及50μg/(kg·d)雌二醇(E_(2))组,每组12只。观察各组大鼠一般行为状况及阴道开口时间;采用Nissl染色观察下丘脑组织病理变化;采用TUNEL染色观察下丘脑神经细胞凋亡情况;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测下丘脑中胰岛素生长因子-1(IGF-1)和促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA表达水平;采用Western blot法检测下丘脑中IGF-1、IGF-1受体(IGF-1R)、PI3K、Akt、mTOR、GnRH蛋白表达水平。结果BPS染毒过程中,所有实验大鼠均存活。与对照组比较,不同剂量BPS组大鼠出现不同程度的疲乏、厌食等症状,以5mg/(kg·d)BPS组最为明显,同时5mg/(kg·d)BPS组和50μg/(kg·d)E_(2)组大鼠的阴道开口时间提前(P<0.05);与对照组比较,不同剂量BPS组大鼠下丘脑尼氏体光密度(OD)值增加(P<0.05);不同剂量BPS组神经细胞凋亡率较对照组减少(P<0.05);不同剂量BPS组IGF-1、GnRH mRNA表达均高于对照组(P<0.05);与对照组比较,5mg/(kg·d)BPS组和50μg/(kg·d)E_(2)组大鼠下丘脑中IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、mTOR、GnRH蛋白表达水平上升(P<0.05)。结论BPS暴露加速了雌性大鼠性早熟,其机制可能与激活IGF-1信号通路促进GnRH分泌有关。

摘要： 目的研究邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对雌性大鼠性早熟的干预作用,并阐述其可能机制。方法将60只雌性SD大鼠随机分为对照组、0.5mg/kg DBP组、5mg/kg DBP组、50mg/kg DBP组和0.1mg/kg雌二醇(E_(2))组,每组12只。观察各组大鼠的阴道开口时间;采用尼氏染色观察大鼠下丘脑神经元中尼氏小体变化;采用TUNEL染色观察下丘脑组织中凋亡细胞;采用酶联免疫吸附试验法检测下丘脑、血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和促性腺激素释放激素(GnRH)含量;采用Western blot检测下丘脑中IGF-1、磷酸肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、亲吻素(Kiss-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)和GnRH表达。结果与对照组比较,50mg/kg DBP组和0.1mg/kg E_(2)组阴道开口时间提前(P<0.05);尼氏染色结果显示,与对照组比较,50mg/kg DBP组和0.1mg/kg E_(2)组积分光密度值升高(P<0.05);与对照组比较,50mg/kg DBP组和0.1mg/kg E_(2)组细胞凋亡细胞数下降,而下丘脑和血清中IGF-1、GnRH含量升高(P<0.05);Western blot检测结果显示,与对照组比较,50mg/kg DBP组和0.1mg/kg E_(2)组IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、mTOR和GnRH表达均升高(P<0.05)。结论DBP可促进雌性大鼠性早熟,其机制可能与上调IGF-1表达、激活神经元中PI3K/Akt/mTOR信号通路、促进GnRH分泌有关。

摘要： 目的探究精氨酸加压素1b受体(arginine vasopressin 1b receptor,AvpR1b)基因敲除对雌性大鼠血浆皮质酮含量、焦虑和社交行为的影响。方法以精氨酸加压素1b受体敲除(AvpR1b^(KO))和野生型(wild type,WT)的SD雌性大鼠为研究对象,首先采用原位杂交技术检测WT和AvpR1b^(KO)大鼠大脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)与视上核(supraoptic nucleus,SON)中精氨酸加压素1b受体的表达水平;采用高效液相色谱串联高分辨质谱分析WT和AvpR1b^(KO)大鼠静息状态下血浆皮质酮含量;通过旷场实验中WT和AvpR1b^(KO)大鼠进入中心区域的时间、次数,以及高架十字迷宫实验中WT和AvpR1b^(KO)大鼠进入开放臂的时间和次数来评价大鼠的焦虑水平;通过三箱实验中WT和AvpR1b^(KO)大鼠探索陌生鼠的时间来评价大鼠社交能力;并根据WT和AvpR1b^(KO)大鼠探索熟悉程度不同陌生大鼠的时间来评价大鼠社交新颖性。结果在AvpR1b^(KO)大鼠室旁核与视上核脑区精氨酸加压素1b受体均无表达;静息状态下,AvpR1b^(KO)大鼠血浆中皮质酮含量较WT大鼠无差异(P>0.05);旷场实验中AvpR1b^(KO)大鼠进入中心区域的时间、次数与WT大鼠无差异(P>0.05);高架实验中AvpR1b^(KO)大鼠进入开放臂区域的时间、次数与WT大鼠无差异(P>0.05);在三箱实验中AvpR1b^(KO)大鼠的社交能力指数与WT大鼠的社交能力指数无显著差异(P>0.05);同时AvpR1b^(KO)大鼠的社会新颖指数与WT大鼠的社会新颖指数无显著差异(P>0.05)。结论精氨酸加压素1b受体敲除不影响雌性大鼠静息状态下血浆中皮质酮含量、焦虑水平、社交能力以及社交新颖性。

摘要： 【目的】本研究旨在探讨生命早期营养干预对雌性大鼠青春期发育的影响。【方法】采用胎儿期限食法建立小于胎龄儿(SGA)雌性大鼠模型(IS组和IC组,分别代表小于胎龄儿生后营养过剩小组和小于胎龄儿生后营养正常组),测量不同营养干预方式大鼠的阴道开放时间,检测血清基础性激素水平,计算子宫和卵巢器官系数,并计算不同发育阶段大鼠的成熟黄体数量。【结果】生后营养过剩雌性大鼠(IS组和CS组,CS组代表适于胎龄儿生后营养过剩组)的阴道开放时间较正常营养的雌性大鼠(CC组和IC组,CC组代表适于胎龄儿生后营养正常组)提前;IS组和CS组生后35 d黄体生成素(LH)水平高于CC组;同时,CC组、IS组和CS组大鼠生后35 d雌二醇和LH水平高于同组生后21 d的水平。生后35 d和45 d,IS组和CS组成熟黄体数量高于CC组。各组大鼠生后35 d的子宫和卵巢器官系数高于同组生后21 d。【结论】大部分SGA雌性大鼠生后正常饮食可完成追赶性生长和正常的青春期发育;而无论是否为SGA,生后营养过剩的雌性大鼠均有性早熟倾向。

摘要： 目的:观察电针对高脂饮食诱导的雌性生长期大鼠糖脂代谢功能的影响。方法:21 d龄SD雌性大鼠随机分为对照组6只给予普通饲料喂养,模型组6只给予高脂饲料喂养且不做任何治疗,电针组6只高脂饲料喂养并选取“三阴交”“丰隆”“足三里”给予电针治疗,连续干预14 d。每周测量大鼠体质量和腹围,治疗结束后分别采用全自动生化检测和ELISA检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、血糖(blood glucose,GLU)和血清胰岛素(insulin,INS)、瘦素(leptin,LEP)水平,采用HE染色法观察肾周脂肪组织形态。结果:与对照组比较,模型组体质量明显增加(P<0.05),血清TC、TG含量明显升高(P<0.05),血清HDL-C含量明显降低(P<0.05),血清INS、GLU、LEP含量明显升高(均P<0.05),肾周脂肪细胞形态饱满、体积增大,细胞内可见空泡状脂滴;与模型组比较,电针组体质量明显降低、腹围减小(P<0.05),血清TC、TG明显降低(P<0.05),血清INS、GLU、LEP含量明显降低(均P<0.05),肾周脂肪细胞体积缩小,胞体皱缩。结论:电针可以改善高脂饮食诱导的生长期雌性肥胖大鼠的糖脂代谢功能,降低胰岛素和瘦素水平,改善肾周脂肪的组织形态。

摘要： 目的 探讨双酚A(BPA)暴露诱导雌性大鼠性早熟的下丘脑KISS-1和GPR54基因甲基化分子机制.方法 将SD雌性幼鼠(21 d龄)分为4组,即BPA干预组(0.25 mg/kg)、BPA空白对照组(与BPA组同时处死)、17β-雌二醇组(E2,0.1 mg/kg)、溶剂对照组(直至大鼠出现阴道开口再处死),每天以灌胃方式持续给药10 d,以大鼠阴道开口时间(VOD)为观察终点(VOD当天处死),BPA干预组阴道开口当天处死时,按1:1比例处死BPA空白对照组.收集大鼠卵巢和下丘脑组织,采用real-time PCR方法检测卵巢ERα、ERβ mRNA和下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA相对表达水平,焦磷酸测序PCR方法检测KISS-1、GPR54基因甲基化水平.结果 BPA干预组和E2组VOD较溶剂对照组提前(P＜0.05),BPA空白对照组处死时未出现阴道开口,BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组(P＜0.05),但与溶剂对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).E2组下丘脑KISS-1 mRNA和卵巢ERβ mRNA表达水平明显低于溶剂对照组(P＜0.05).BPA干预组、BPA空白对照组、E2组和溶剂对照组4组间比较,下丘脑KISS-1基因CpG位点甲基化水平差异无统计学意义,而GPR54基因CpG位点甲基化水平存在显著性差异,其中BPA干预组、E2组和溶剂对照组GPR54片段1 CpG位点甲基化水平显著低于BPA空白对照组(P＜0.05),且其甲基化水平与VOD呈正相关(rs=0.245,P=0.009).BPA干预组GPR54片段2 CpG位点甲基化水平显著低于溶剂对照组,而E2组卵巢ERβ基因甲基化水平显著高于溶剂对照组(P＜0.05).结论 BPA暴露可导致雌性幼鼠阴道开口(性早熟)提前,其下丘脑GPR54基因甲基化水平改变可能是毒性机制之一.

摘要： 目的:探索重复制动应激对雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响.方法:40只SD雌鼠随机分为两组(n=20),对照组和实验组,一组正常饲养,一组采取递增负荷束缚应激,每天置于束缚器内制动应激一次(从上午9:00开始),第1日制动2 h,以后采用递增负荷,每日增加0.5 h,持续两周,通过检测体重、脏器系数、动情周期、性激素、病理和相关基因的表达探索其对下丘脑-垂体-卵巢轴的危害.结果:重复制动应激使雌性大鼠体重下降、动情周期延长,卵巢和子宫的脏器系数和形态发生改变,利用qPCR技术对其相关基因检测,发现下丘脑促性腺激素释放激素、垂体促性腺激素释放激素受体、促卵泡生成素和促黄体生成素mRNA的表达显著下降,卵巢促卵泡生成素和黄体生成素受体mRNA的表达显著上升,卵巢和子宫雌激素受体mRNA的表达显著下降.结论:重复制动应激可能通过干扰下丘脑-垂体-卵巢轴的内分泌调节作用,使动情周期紊乱,从而损伤雌性动物的性腺和生殖内分泌功能.

摘要： 目的:探讨二甲醚吸入染毒对雌性大鼠卵巢和生殖激素的影响。方法:将18只雌性SD大鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组6只。对照组大鼠吸入空气,染毒组大鼠动式吸入含二甲醚的空气,二甲醚浓度分别为0.5%和1.0%(体积分数),2 h/d,5 d/周,连续染毒4周。染毒结束后测定大鼠血清中生殖激素的水平,计算卵巢脏器系数,进行卵巢和子宫组织病理学观察。结果:与对照组比较,两组大鼠的体重、卵巢重量和卵巢脏器系数均未发生明显变化(P>0.05),卵巢和子宫未见明显病理损伤;高剂量组雌性大鼠孕酮明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);黄体生成素和抑制素B水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);低剂量组未见明显变化。结论:亚急性吸入二甲醚会引起雌性大鼠生殖激素水平紊乱。

摘要： 目的:探讨瘦素抵抗肥胖雌性大鼠肺通气功能的损伤.方法:选择20只雌性离乳大鼠当做研究对象,同时根据随机数字法将入选对象均分为观察组及对照组.对照组施以常规喂养,观察组施以高脂饲料喂养,并于第8周结束时按照体重筛选6只大鼠当做瘦素抵抗组,对两组潮气量、用力肺活量、肺通气量、最大呼气中段流量、呼气峰流量以及吸气峰流量进行对比,并对两组血清瘦素浓度以及体重进行对比.结果:瘦素抵抗组的血清瘦素浓度、体重、肺通气量、呼气峰流量以及吸气峰流量均比对照组更高,差异明显,有统计学意义,P0.05.结论:饮食诱导下,瘦素抵抗肥胖可使雌性大鼠的肺通气功能出现降低.

摘要： 本发明公开了印度南瓜强雌性状分子标记与鉴定印度南瓜强雌性状的引物对。本发明所提供的印度南瓜强雌性状分子标记，为以印度南瓜的基因组DNA为模板，采用引物对A1进行扩增得到的DNA分子；所述A1由名称为P1和P2的单链DNA组成，所述P1为与SEQ ID No.3的第204位上游特异结合的单链DNA，所述P2为与SEQ ID No.3的第219位下游特异结合的单链DNA。实验证明，可以利用鉴定或辅助鉴定印度南瓜强雌性状的引物对A1和印度南瓜强雌性状分子标记鉴定印度南瓜的强雌性状情况。

摘要： 本发明公开了一种控制玉米雌性性状的基因、用于创制玉米雌性不育系的试剂盒、突变基因型及方法。本发明提供了Zm00001d000204基因核酸和氨基酸序列以及利用CRISPR‑Cas9方法编辑Zm00001d000204基因序列，实现玉米雌性不育创制的方法，同时公开了编辑后具有雌性不育性状的玉米基因型序列。本发明通过利用CRISPR/Cas9方法突变玉米硫酸盐转运蛋白编码基因Zm00001d000204，发现了Zm00001d000204基因对玉米雌性性状的调控功能。利用CRISPR/Cas9基因编辑的方法，可以创制玉米雌性不育系，从而用于玉米杂交制种并提高制种效率。本发明还提供了具有雌性不育性状的Zm00001d000204突变基因型，这些突变基因型序列能够造成玉米雌性不育，可以用来创制新的雌性不育系。

摘要： 本发明公开了一株西瓜雌性突变株及西瓜雌性系的检测方法。本发明通过比较全基因组重测序信息及对后代分离群体验证，发现ClWIP1基因中9个碱基的缺失突变导致了TGS409雌性株表型的出现，并基于获得的InDel差异位点设计了可以方便检测含有ClWIP1缺失突变位点的分子标记。通过实验证明：本发明的分子标记可迅速检测以TGS409为转育材料的西瓜雌性系表型，对西瓜雌性系TGS409中突变后的ClWIP1基因进行鉴定，可用于后代转育西瓜雌性株育种材料，大大降低了西瓜制种成本、提高了种子纯度。

摘要： 雌性SD大鼠缺铁性贫血模型的建立，是将24只雌性SD大鼠随机均分为两个大组，之后实验组饲以低铁饲料和去离子水，对照组饲以基础饲料和自来水。30天后处死所有SD大鼠，取血测定血红蛋白含量、红细胞压积；每只取2g肝组织匀浆离心，测定肝脏中铁含量。与常用的Wistar大鼠模型制备方法比较，本发明最突出的特点是能模拟处于生长发育旺盛的婴幼儿以及孕妇缺铁性贫血研究，可通过调整饲料中的铁剂量来补充铁补充及吸收实验研究，有很好的研究前景。

摘要： [课题]提供可减少安全性和环境方面的担忧，并且可靠且高效地诱导鳗鱼雌性化的新颖方法等。[方法]本发明提供了如下鳗鱼雌性化诱导方法等，该鳗鱼雌性化诱导方法是在玻璃鳗鱼及/或小鳗鱼时期，使鳗鱼摄取含有以干物质中的比率计为0.05重量％以上的大豆异黄酮的鳗鱼用饲料。通过在从玻璃鳗鱼成长为小鳗鱼时期中的规定期间，例如在未确定性别或具有性别可塑性的期间，使鳗鱼摄取添加了大豆异黄酮的鳗鱼用饲料，能够可靠且高效地诱导鳗鱼的雌性化，而且，可更加减少安全性和环境方面的担忧。

摘要： 本发明公开了一种对虾雌性化诱导方法和对虾雌性化剂，属于对虾育苗技术领域。本发明的对虾雌性化诱导方法是在对虾无节幼体时期，使对虾无节幼体在复合养殖水体中诱导处理，所述复合养殖水体是由雌二醇和大豆异黄酮溶于养殖水体中形成，其中，雌二醇在该复合养殖水体中的浓度为1.0mg/L；大豆异黄酮在该复合养殖水体中的浓度为100‑150mg/L。相比于雌二醇或大豆异黄酮的单一化诱导，特定浓度的雌二醇与大豆异黄酮复合诱导的雌性化概率和存活率有协同增效作用，同时在一定程度上提高对虾的生长率。另外，该对虾雌性化诱导时间相比于现有技术中的雌性化诱导，诱导时间大幅减少。

摘要： 本发明公开了一种控制玉米雌性性状的基因、用于创制玉米雌性不育系的试剂盒、突变基因型及方法。本发明提供了Zm00001d000204基因核酸和氨基酸序列以及利用CRISPR‑Cas9方法编辑Zm00001d000204基因序列，实现玉米雌性不育创制的方法，同时公开了编辑后具有雌性不育性状的玉米基因型序列。本发明通过利用CRISPR/Cas9方法突变玉米硫酸盐转运蛋白编码基因Zm00001d000204，发现了Zm00001d000204基因对玉米雌性性状的调控功能。利用CRISPR/Cas9基因编辑的方法，可以创制玉米雌性不育系，从而用于玉米杂交制种并提高制种效率。本发明还提供了具有雌性不育性状的Zm00001d000204突变基因型，这些突变基因型序列能够造成玉米雌性不育，可以用来创制新的雌性不育系。

摘要： 本发明公开了印度南瓜强雌性状分子标记与鉴定印度南瓜强雌性状的引物对。本发明所提供的印度南瓜强雌性状分子标记，为以印度南瓜的基因组DNA为模板，采用引物对A1进行扩增得到的DNA分子；所述A1由名称为P1和P2的单链DNA组成，所述P1为与SEQ ID No.3的第204位上游特异结合的单链DNA，所述P2为与SEQ ID No.3的第219位下游特异结合的单链DNA。实验证明，可以利用鉴定或辅助鉴定印度南瓜强雌性状的引物对A1和印度南瓜强雌性状分子标记鉴定印度南瓜的强雌性状情况。

摘要： 本发明提供了一种雌性大鼠阴道涂片标本采集装置，该装置包括阴道内置头和生理盐水推送器，采用定量生理盐水推送器，保证采样使用的生理盐水一致性。阴道内置头采用宫颈口和阴道口两端固定保证采样部位一致性。宫颈口端采用柔软材质，减少操作摩擦刺激，同时可以改变生理盐水进入阴道的流动方向为由内而外，保护宫颈口避免逆流生理盐水造成感染，盐水一次冲洗避免阴道内壁细胞损伤引起的感染。操作过程生理盐水可以保持无菌状态，减少操作过程的动物感染率。阴道内置头可以经过消毒清洗重复使用。

摘要： 本实用新型提供了一种雌性大鼠阴道涂片标本采集装置，该装置包括阴道内置头和生理盐水推送器，采用定量生理盐水推送器，保证采样使用的生理盐水一致性。阴道内置头采用宫颈口和阴道口两端固定保证采样部位一致性。宫颈口端采用柔软材质，减少操作摩擦刺激，同时可以改变生理盐水进入阴道的流动方向为由内而外，保护宫颈口避免逆流生理盐水造成感染，盐水一次冲洗避免阴道内壁细胞损伤引起的感染。操作过程生理盐水可以保持无菌状态，减少操作过程的动物感染率。阴道内置头可以经过消毒清洗重复使用。