Flk-1

摘要： 为研究鱼类单倍体血液循环障碍产生机制,人工诱导获得金鱼(Carassius auratus)雌核发育单倍体胚胎并进行活体观察及邻联茴香胺染色,结果显示金鱼雌核发育单倍体胚胎存在不同程度的血液循环不良和红细胞生成缺陷。为进一步探讨其发生的分子机制,利用反义RNA整胚原位杂交技术比较分析了原始造血和血管发生关键基因scl(Stem cell leukemia)、gata-1(Gata binding protein-1)和flk-1(Fetal liver kinase-1)在雌核发育单倍体和自交二倍体胚胎中的表达模式。原始造血关键基因scl和gata-1的检测结果显示,在金鱼单倍体胚胎中,后侧板中胚层(Posterior lateral-plate mesoderm,PLM)不能正常迁移至胚体中线融合形成原始造血关键部位中间细胞群(Intermediate cell mass,ICM);同时,scl和gata-1的表达沿单倍体胚胎前后轴缩短,并在躯干区域逐渐减弱。血管内皮标记基因flk-1的检测结果显示,单倍体胚胎原始体轴血管结构紊乱,节间血管发育不良或者缺失,没有形成完整的血管系统。此外,活体观察及gsc(Goosecoid)和N-cadherin(Neural cadherin)原位杂交检测结果显示,金鱼雌核发育单倍体胚胎原肠胚期存在细胞运动缺陷。以上研究结果提示,细胞运动迁移异常导致ICM和原始体轴血管发育缺陷,同时红细胞分化减少及外周血管发育不全,可能是造成金鱼雌核发育单倍体胚胎血液循环障碍的重要原因。

摘要： 目的观察二氢叶酸还原酶基因(dhfr)过表达对乙醇致斑马鱼胚胎心脏和血管发育异常的作用,并初步探讨其机制。方法体外转录dhfr mRNA并将其显微注射入斑马鱼受精卵内使dhfr基因过表达,并进行过表达的效率验证。将野生型斑马鱼分为正常对照组、乙醇处理组(400 mmol/L乙醇溶液)、乙醇+dhfr mRNA组(显微注射6 nL dhfr mRNA),观察各组胚胎的整体发育情况。按照上述分组,利用红色荧光蛋白标记心脏的转基因斑马鱼系Tg(cmlc2:mcherry)观察胚胎心房和心室的发育状况;利用荧光显微造影观察野生型斑马鱼胚胎心脏流出道及血管发育情况;通过心率和心室收缩指数评估心功能情况。构建基因探针并通过胚胎整体原位杂交及Real-time PCR法,检测胚胎nkx2.5、tbx1、flk-1的基因表达情况。结果与乙醇处理组相比,乙醇+dhfr m RNA组斑马鱼胚胎发育异常百分率明显下降,存活百分率显著上升(P<0.05);心房、心室、心脏流出道和血管发育的异常表型及心功能情况明显改善。乙醇处理组nkx2.5、tbx1、flk-1 m RNA的表达较对照组下降(P<0.05);乙醇+dhfr mRNA组nkx2.5、tbx1、flk-1 m RNA的表达较乙醇处理组上调,但仍未达到正常对照组水平(P<0.05)。结论 dhfr基因过表达可部分挽救乙醇所致胚胎心脏和血管发育异常,其机制可能与dhfr基因过表达后上调乙醇导致的nkx2.5、tbx1、flk-1水平降低有关。

摘要： 目的 采用Max Vision法免疫组化检测宫颈癌组织中微血管密度(microvessel density,MVD),检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体FLK-1在宫颈癌中的阳性表达,探讨MVD、VEGF及FLK-1与宫颈癌增殖、发展的关系.方法 选取40例宫颈鳞癌(Ⅰb2～ Ⅱb期)患者肿瘤组织为研究对象,以癌旁宫颈组织作为对照组(26例).采用Max Vision法对宫颈癌及癌旁宫颈组织的石蜡切片进行免疫组化染色,对相关组织的MVD、VEGF及FLK-1阳性表达率进行检测,按Orre和Volm等的判断标准进行评价,并对结果进行统计学分析.结果 宫颈鳞癌组织的微血管密度(MVD)、VEGF及FLK-1阳性表达率明显高于癌旁宫颈组织,两者间差异有统计学意义;宫颈鳞癌与对照组间MVD、VEGF及FLK-1的表达和肿瘤的临床分期和病理类型相关;VEGF与受体FLK-1蛋白表达强度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MVD与宫颈癌的增殖与发展密切相关,VEGF及其受体FLK-1的高表达在宫颈癌的增殖发展中起着重要的作用.

摘要： 目的 实验研究黄芪虫藤饮对缺血性脑卒中大鼠梗死灶周围组织血管内皮生长因子(VEGF)及受体(Flk-1)mRNA表达的调节作用.方法 选取SD雄性大鼠88只,通过线栓法来制备脑缺血大鼠模型,依据随机数字表法将大鼠分为两组,观察组(44只),对照组(44只);观察组大鼠在手术以后2 h起使用黄芪虫藤饮药液灌胃,每天两次,对照组同剂量、同时间使用清水灌胃.采用RT-PCR法检测梗死灶周边Flk-1及VEGF mRNA表达情况.结果 不同时间点观察组大鼠Flk-1 mRNA与VEGF表达量对比差异有统计学意义(P-0.15,-0.1>-0.14);两组大鼠第3～6天其Flk-1表达量短暂上升,6 d以后呈现降低趋势,其中观察组大鼠第3～6天Flk-1表达升高速度较对照组快(斜率 α,0.18>0.14),第6～12天和第12～24天降低速度较对照组慢(斜率 α,-0.12>-0.14,-0.22>-0.30).结论 黄芪虫藤饮可能经过对Flk-1及VEGF基因产生作用促进脑梗死灶周边组织血管再生,使脑梗死神经损伤恢复速度加快.

摘要： 目的观察双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c及其受体Flk-1表达的影响。方法将40只SD大鼠,采用随机数字法分为空白组(A)、模型组(B)、双丹明目组(C)、阳性对照组(D)4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ50mg/kg的剂量一次性大鼠尾静脉注射法建立糖尿病视网膜病变大鼠模型,造模后1周开始连续灌胃用药,灌胃后8周,处死动物,采用免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c及其受体Flk-1的表达。结果成模后用药第8周,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c及其受体Flk-1蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度均高于正常组,其中:模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c及其受体Flk-1表达的平均灰度值均高于模型组、平均光密度值均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论双丹明目胶囊能明显降低VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c及其受体Flk-1在糖尿病模型大鼠视网膜中的表达,对其视网膜有一定的保护作用。

摘要： 目的 观察针康法对脑缺血大鼠神经功能和缺血半暗区皮层血管内皮生长因子受体Flt-1、Flk-1蛋白表达的影响.方法 90只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组,每组再分为术后3 d、7 d、14 d三个亚组(n=6).模型组、针刺组、康复组和针康组用线栓法制备永久性局灶性脑缺血模型.假手术组和模型组不进行治疗,针刺组采用头穴丛刺针法治疗,康复组给予跑台训练,针康组采用头穴丛刺结合跑台训练治疗.术后各时间点,采用改良神经损害严重程度评分(mNSS)进行评定,Western blotting法检测缺血半暗区皮层Flt-1、Flk-1表达.结果 与模型组比较,各治疗组术后各时间点mNSS评分降低(P<0.05);术后7 d、14 d,与针刺组、康复组比较,针康组评分进一步降低(P<0.05).与模型组比较,各治疗组术后各时间点Flt-1、Flk-1蛋白表达升高(P<0.05);与针刺组、康复组比较,针康组Flt-1、Flk-1蛋白表达水平进一步升高(P<0.05).结论 针康法治疗可进一步改善脑缺血大鼠神经行为,可能与其持续促进缺血半暗区皮层Flt-1、Flk-1蛋白表达有关.%Objective To explore the effect of acupuncture-rehabilitation therapy on neurological function and expression of Flt-1 and Flk-1, members of vascular endothelial growth factor receptors, after permanent focal cerebral ischemia in rats. Methods Ninety male Sprague-Dawley rats were divided into five groups, namely sham group, model group, acupuncture group, rehabilitation group and acupunc-ture-rehabilitation group, and each group was further divided into 3-day, 7-day and 14-day subgroups, equally. Their middle cerebral arteries were occluded except those of sham group. The sham and model groups accepted no treatment, while the acupuncture group accepted clus-ter needling of scalp acupuncture, the rehabilitation group accepted treadmill training, and the acupuncture-rehabilitation group accepted both acupuncture and treadmill training. They were assessed with modified Neurologic Severity Score (mNSS) 3, 7 and 14 days after model-ing, while the expression of Flt-1 and Flk-1 were determined with Western blotting. Results The mNSS score reduced in all the treatment groups (P<0.05) compared with that of the model group at every time point, and was the least in the acupuncture-rehabilitation group (P<0.05) 7 and 14 days after modeling among the treatment groups. Meanwhile, the expression of Flt-1 and Flk-1 protein increased in all the treatment groups (P<0.05), and was the most in the acupuncture-rehabilitation group (P<0.05). Conclusion Acupuncture-rehabilitation thera-py can promote the neurological function recovery in rat with permanent focal cerebral ischemia, which may be associated with the continu-ous inducement of Flt-1, Flk-1 protein expression in ischemic penumbra cortex.

摘要： 目的 研究黄芪提取物(Astragalus Extract,AE)对心肌梗死大鼠心肌组织中VEGF及其受体Flt1/Flk1的表达调控作用,探讨黄芪促血管新生作用机制,为心肌梗死的治疗提供理论和实验依据.方法 通过结扎大鼠心脏的左冠状动脉前降支造成心肌梗死的模型,然后将大鼠分为模型组、AE低剂量组(10 mg·kg-1·d-1)、中剂量组(20 mg·kg-1·d-1)、高剂量组(40 mg·kg-1·d-1),另外再设假手术组,仅仅穿线而不结扎.各组大鼠数量为8只.各治疗组给予AE上述对应的各药物剂量灌胃(ig)给药,模型组及假手术常规饲养,饲养4周后,把大鼠处死.应用HE染色、Masson染色分析左心室心肌细胞组织形态学变化和血管结构病理成分变化;反转录PCR(RT-PCR)法测定心肌组织中VEGF、Flt1、Flk1 mRNA的表达变化;免疫组化染色法和免疫印迹法分析心肌组织中血管内皮生长因子VEGF、Flt1、Flk1的蛋白表达变化.结果 HE染色分析,模型组大鼠心肌细胞坏死严重,成纤维细胞增生较多,并伴有炎性浸润;AE低、中剂量组大鼠,心肌细胞形态结构不清晰,排列不齐,炎性浸润略微;AE高剂量组的大鼠心肌细胞形态结构完整,有效降低成纤维细胞的增生.与模型组比较,AE各组大鼠心肌组织结构相对规整,胶原含量明显下降(P<0.05),新生的血管数量明显增(P<0.05),内皮细胞形态相对完整,VEGF及Flt1、Flk1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01).结论 AE可明显改善大鼠心肌梗死后心肌组织的紊乱状态,促进受损心肌组织中新生血管数量的增加,提高受损心肌组织中VEGF、Flt1、Flk1 mRNA和蛋白的表达.

摘要： 目的:探讨VEGF及其受体Flk-1的表达与大肠癌临床病理特征间的关系，了解其在大肠癌中表达的意义。rn 方法：采用免疫组化技术检测81例大肠癌(CC)中VEGF及Flk-1的表达。rn 结果：VEGF及Flk-1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Dukes分期呈正相关。VEGF与Flk-1表达呈正相关。rn 结论：VEGF及Flk-1促进了大肠癌组织的生长和转移，具有协同作用，可作为大肠癌的预后评估因子，联合检测以上指标对评估大肠癌的预后可能更准确。降低VEGF及Flk-1的表达和活性可能成为抗肿瘤转移治疗的一个新途径。

摘要： 目的:探讨VEGF及其受体Flk-1的表达与大肠癌临床病理特征间的关系，了解其在大肠癌中表达的意义。rn 方法：采用免疫组化技术检测81例大肠癌(CC)中VEGF及Flk-1的表达。rn 结果：VEGF及Flk-1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Dukes分期呈正相关。VEGF与Flk-1表达呈正相关。rn 结论：VEGF及Flk-1促进了大肠癌组织的生长和转移，具有协同作用，可作为大肠癌的预后评估因子，联合检测以上指标对评估大肠癌的预后可能更准确。降低VEGF及Flk-1的表达和活性可能成为抗肿瘤转移治疗的一个新途径。

摘要： 目的:探讨VEGF及其受体Flk-1的表达与大肠癌临床病理特征间的关系，了解其在大肠癌中表达的意义。rn 方法：采用免疫组化技术检测81例大肠癌(CC)中VEGF及Flk-1的表达。rn 结果：VEGF及Flk-1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Dukes分期呈正相关。VEGF与Flk-1表达呈正相关。rn 结论：VEGF及Flk-1促进了大肠癌组织的生长和转移，具有协同作用，可作为大肠癌的预后评估因子，联合检测以上指标对评估大肠癌的预后可能更准确。降低VEGF及Flk-1的表达和活性可能成为抗肿瘤转移治疗的一个新途径。

摘要： 目的:探讨VEGF及其受体Flk-1的表达与大肠癌临床病理特征间的关系，了解其在大肠癌中表达的意义。rn 方法：采用免疫组化技术检测81例大肠癌(CC)中VEGF及Flk-1的表达。rn 结果：VEGF及Flk-1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Dukes分期呈正相关。VEGF与Flk-1表达呈正相关。rn 结论：VEGF及Flk-1促进了大肠癌组织的生长和转移，具有协同作用，可作为大肠癌的预后评估因子，联合检测以上指标对评估大肠癌的预后可能更准确。降低VEGF及Flk-1的表达和活性可能成为抗肿瘤转移治疗的一个新途径。

摘要： 目的:探讨VEGF及其受体Flk-1的表达与大肠癌临床病理特征间的关系，了解其在大肠癌中表达的意义。rn 方法：采用免疫组化技术检测81例大肠癌(CC)中VEGF及Flk-1的表达。rn 结果：VEGF及Flk-1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Dukes分期呈正相关。VEGF与Flk-1表达呈正相关。rn 结论：VEGF及Flk-1促进了大肠癌组织的生长和转移，具有协同作用，可作为大肠癌的预后评估因子，联合检测以上指标对评估大肠癌的预后可能更准确。降低VEGF及Flk-1的表达和活性可能成为抗肿瘤转移治疗的一个新途径。

摘要： 本发明提供一种获取液晶显示屏最佳FLK值的调试方法及装置，通过先设定VCOM电压范围V0～V1，VCOM参考值VR，采用色彩分析仪获取在VR下对应液晶显示屏的FLK参考值FR，再以设定程序自动获取对应当前值VC条件下的FLK当前值FC，将当前值FC逐一与参考值FR进行对比以获取FLK的最小值Fmin，所以调节的一致性较好，速度更快，提高了液晶显示屏的检测效率。

摘要： 本发明提供一种获取液晶显示屏最佳FLK值的调试方法及装置，通过先设定VCOM电压范围V0～V1，VCOM参考值VR，采用色彩分析仪获取在VR下对应液晶显示屏的FLK参考值FR，再以设定程序自动获取对应当前值VC条件下的FLK当前值FC，将当前值FC逐一与参考值FR进行对比以获取FLK的最小值Fmin，所以调节的一致性较好，速度更快，提高了液晶显示屏的检测效率。