免疫荧光技术

摘要： 目的:评价免疫荧光染色法在皮肤活检组织真菌染色中的应用价值.方法:经组织病理和组织培养确诊的43例皮肤真菌病患者对其石蜡包埋切片分别进行免疫荧光染色、PAS染色.结果:43例皮肤真菌病中PAS染色阳性27例(62.8％),免疫荧光染色阳性30例(69.7％),免疫荧光染色法较PAS染色阳性率有所提高,两者差异无统计学意义(P>0.05).同时两种方法均阴性患者5例,两种方法联合真菌检出阳性率为88.4％.结论:免疫荧光染色是提高皮肤活检组织中真菌检出的重要补充.

摘要： [目的]研究牡丹试管苗生根期间相关酶活性和内源生长素吲哚乙酸(IAA)含量的变化,以及生根期间茎基部内源IAA的分布,为牡丹快速繁殖提供理论依据.[方法]以牡丹试管苗'凤丹白'为试验材料,以WPM+WPM(Ca2+)+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)l g/L+糖30 g/L+植物凝胶2 g/L(pH= 5.8)为生根培养基,研究外源添加不同质量浓度(0(CK),1,2,3和4 mg/L)IAA对其生根的影响,并测定牡丹试管苗生根期间茎基部过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性及内源IAA含量的变化,同时对牡丹试管苗生根期间茎基部进行细胞学观察和IAA免疫荧光定位分析.[结果]牡丹试管苗在外源添加3 mg/L IAA的生根培养基中生根率最高(52.00％)、生根指数最大(12.47),且显著高于其他处理;CK处理的生根率、平均最大根长和生根指数均低于其他处理.在牡丹试管苗生根期间,其茎基部的POD、PPO和IAAO活性始终处于波动变化中;内源IAA含量则呈现先升高后降低的变化趋势,在生根培养5d时达到最大值62.80 ng/g.细胞学观察结果显示,牡丹试管苗根原基诱导期为接入生根培养基后的3?5 d,对于生根培养基中添加3 mg/L IAA的处理,其试管苗茎基部POD和PPO活性均在培养3d时达到峰值,IAAO活性在培养3?4 d处于显著下降趋势,而内源IAA含量在培养3?5 d处于升高趋势.免疫荧光定位分析表明,在牡丹试管苗生根期间,内源IAA以茎基部维管束中分布最多,且一直作用于根原基形成和伸长的部位,荧光信号强弱与其含量相一致.[结论]在牡丹试管苗生根期间,外源添加IAA后,高活性的POD、PPO及低活性的IAAO有助于根原基的发生,内源IAA在根原基的积累与牡丹试管苗不定根的发生密切相关.

摘要： 目的通过检测小鼠脑挫伤后不同时间点星形胶质细胞的树突数目、长度、复杂程度等形态学特征,探索星形胶质细胞形态与损伤时间的相关性.方法采用PCI3000颅脑打击器制作小鼠可控皮质打击模型,应用免疫荧光染色法标记星形胶质细胞,并应用Sholl分析测量伤后1d、3d、7d、14d、21d、28d不同时间点星形胶质细胞形态的变化.结果免疫荧光染色显示,假手术(sham)组皮质未见GFAP阳性细胞.脑挫伤后3d损伤周边区观察到阳性细胞,伤后7d数量到达峰值,随后降低,其中A1亚型星形胶质细胞损伤后3d开始出现,损伤后7d占比最高.损伤后,树突数目3d最多,之后逐渐减少,树突长度3d最短,之后逐渐增加.Sholl分析结果显示,距离胞体20μm～40μm范围内细胞复杂程度在伤后逐渐加大,7d到达高峰,之后降低.结论小鼠脑皮质损伤后星形胶质细胞内GFAP呈动态表达,星形胶质细胞的树突数目、树突长度、树突复杂程度等形态学指标与损伤经过时间存在相关性,提示星形胶质细胞的形态变化有望成为推断脑挫伤时间的辅助指标.

摘要： 目的 通过比较间接免疫荧光法、免疫印迹法和多重微珠免疫法三种方法检测抗核抗体的一致性,同时对免疫印迹法和多重微珠免疫法在检测抗核抗体谱的比较,评估各种方法的优势及其局限,为临床实践提供依据.方法 收集578例同时进行三种方法检测的疑似自身免疫性疾病患者的血清样本检测结果,使用Kappa系数分析比较几种检测方法的一致性.结果 在578例样本中,使用间接免疫荧光法检测抗核抗体阳性者280例(48.4％);使用免疫印迹法阳性者225例(38.9％);使用多重微珠免疫法阳性者252例(43.6％).三种方法中任意两种方法检测抗核抗体的一致性均在85％以上,Kappa值均高于0.7,其中,间接免疫荧光法和免疫印迹法一致性最强,Kappa值为0.808(95％CI:0.761～0.855).使用免疫印迹法与多重微珠免疫法检测9种抗核抗体谱,一致性均大于90％,而Kappa值则在0.535至0.839之间,其中一致性最强的抗体类型为抗SSA抗体和抗JO1抗体,分别为0.839和0.832.结论 以上三种方法检测抗核抗体的一致性较高,其中间接免疫荧光法的阳性率最高,间接免疫荧光法和免疫印迹法一致性最强.免疫印迹法与多重微珠免疫法检测抗核抗体谱一致性较高.应联合使用三种方法,提高自身免疫性疾病的诊断率,避免漏检.

摘要： 目的:探讨中性粒细胞胞浆抗体检测应用于系统性红斑狼疮疾病的诊断应用.方法:选取我院2017年1月～2017年6月收治的659例SLE患者为研究对象,另选取同期来我院体检中心进行体检的536名健康人群.对所有入选者均使用IIF法对ANCA水平进行检测,对阳性SLE患者再使用ELISA法对PR3、MPO进行检测.比较SLE患者和健康人群中ANCA检出情况、ANCA阳性及阴性SLE患者中病情活动情况,并分析ANCA表达情况和SLE病情活动程度的相关性.结果:健康人群中ANCA阳性检出率为7.09％,SLE患者中ANCA阳性检出率为67.83％,两者差异具有统计学意义(P0.05).ANCA表达与SLE病情活动程度呈正相关(r=2.345,P=0.024).结论:免疫荧光技术联合酶联免疫吸附法能够提高系统性红斑狼疮患者体内中性粒细胞胞浆抗体的检测准确度,中性粒细胞胞浆抗体水平与病情活动程度呈正相关,具有一定的诊断价值.

摘要： 生精小管对精子发生具有重要作用,但生精小管形成的具体机制不明。课题组前期用KSR成功建立了生精小管样结构,本研究取新生10d小鼠睾丸细胞分为对照组、KSR组、KSR+Y27632组(Y27632为Rho/ROCK信号通路抑制剂)和LPA组(LPA为Rho/ROCK信号通路激动剂)进行3D培养7d,探讨生精小管样结构重建过程中Rho/ROCK信号通路调控机制。免疫荧光技术观察各组生精小管样结构形成及支持细胞(SCs)、睾丸间质细胞(LCs)、生殖细胞(GCs)的增殖情况;采用q-PCR和免疫印迹法检测Rho/ROCK信号通路下游分子MLC、p-MLCmRNA和蛋白表达水平。

摘要： 纹状体内的parvalbumin阳性(Parv^(+))神经元接受大量来自皮质和丘脑的谷氨酸能兴奋性突触输入,但这些突触的形态和功能尚不完全清楚。我们利用免疫电镜、脑内电刺激和免疫荧光技术探查大鼠纹状体内皮质和丘脑来源谷氨酸能轴突末梢与Parv^(+)神经元形成突触连接的形态和功能特征。结果表明:①Parv^(+)胞体和树突均接受大量非对称突触输入,Parv^(+)轴突末梢可与Parv^(-)神经元的胞体、树突和树突棘形成非对称突触;②电刺激皮质诱导纹状体内Parv^(+)神经元表达c-Jun的比例明显高于刺激丘脑;③纹状体内大部分谷氨酸能末梢与Parv^(-)结构形成突触连接,仅少部分与Parv+结构形成突触。

摘要： 目的 探究免疫荧光技术在临床检验中的应用效果.方法 76例临床患者作为研究标本,依照随机数表法均分为参考组和实验组,各38例.参考组采取放射免疫分析法检验,实验组采取免疫荧光技术检验.统计两组标本促甲状腺激素(TSH)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)等指标的检验情况,对比分析两组检验的精密度、精确性、灵敏度及抗干扰能力.结果 实验组检验方法精确性为94.74％显著优于参考组的78.95％,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组TSH、FT3、FT4等指标的最低检测限度分别为0.11 mU/L、0.14 pmol/L、0.15 pmol/L,均优于参考组的0.27 mU/L、1.14 pmol/L、1.87 pmol/L;实验组抗干扰能力评分为(92.50±1.52)分,显著优于参考组的(84.57±1.32)分,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 在临床检验中使用免疫荧光技术能够获得更为精确的检测结果,具有更为强烈的抗干扰能力及灵敏度,相较于放射免疫检验法具有更为突出的应用效果,值得推广与使用.

摘要： 本文探讨了用间接免疫荧光技术检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒的方法。结果表明，间接免疫荧光技术针对的是乳头瘤HPV的衣壳蛋白,能检测有完整衣壳的成熟HPV,操作简便,有望用于宫颈涂片的常规检查,以筛查带HPV者,对预防宫颈癌提供帮助.但敏感性不及PCR技术。

摘要： 目的:为探讨性腺激素对山羊子宫内膜上皮细胞激素受体表达的影响.方法:构建永生化山羊子宫内膜上皮细胞(EEC)与基质细胞(ESC)体外培养研究模型,通过细胞免疫荧光技术检测性腺激素E2或/和P4对单独培养EEC中PR与ER表达水平的调节作用以及ESC对该作用的影响.结果:与未加激素对照组相比,单独添加P4或与E2同时加入均可显著抑制单独培养EEC中PR与ER的表达水平(P＜0.05);而单独添加E2可轻微促进两种激素受体表达水平.在添加有ESC条件培养液的EEC培养模式中,E2单独作用对EEC中PR与ER表达水平无显著影响;P4单独或与E2共同作用下,EEC中PR与ER表达水平均较未加激素对照组显著降低(P＜0.05).结论:性腺激素对单独培养及与ESC共培养模式下的EEC中PR与ER表达水平的调节作用相似,P4对山羊EEC中PR与ER表达水平具有显著抑制作用.

摘要： A型流感病毒NS1蛋白能够与被感染细胞中的许多蛋白相互结合,并以此影响细胞内的信号转导和蛋白质的生物合成.NS1蛋白由约230个氨基酸构成,其中C-端的最末4个氨基酸构成了PDZ结合基序.突触后密度蛋白(Postsynaptic Density Protein-95,PSD-95)存在于神经元,SH-SY-5Y等细胞中,具有3个PDZ结构域.本文假设NS1能够与PSD-95结合,那么其相互作用就有可能对A型流感病毒在宿主细胞内的作用机制,以及神经元等细胞的生理功能产生影响.通过酵母双杂交,GST-pull down及免疫荧光技术检测NS1与PSD-95的相互作用.结果表明,禽流感病毒H5N1 (A/chicken/Guangdong/1/2005)的NS1能够与PSD-95结合.

摘要： 为建立一种准确简便诊断猪传染性胸膜肺炎的方法，以某猪场20头具有典型发病症状病猪或死猪鼻腔、气管、胸腔的液体作病料，分别滴鼻接种于20只Balb/c小鼠，同时以灭菌牛理盐水作对照。24h后，接种病料的小鼠死亡。采取死亡小鼠的肺脏，充分研磨，然后加灭菌生理盐水作1:5稀释，取上清液，加入适量放线杆菌兔源血清抗体，混匀后，分别于5、10、30 min时进行涂片，用FITC标记羊抗兔IgG染色，然后用荧光显微镜观察。结果显示：从死亡小鼠病料涂片中能检测出放线杆菌，其形态与放线杆菌参考菌株革兰染色形态一致。接种生理盐水小鼠未出现死亡，处死后取其肺部组织进行检测，未检测出放线杆菌。20份样品检测结果均为阳性，且该诊断结果与相同病料微生物学诊断结果一致。

摘要： 为调查狂犬病毒(Rabies virus,RV)在野生动物蝙蝠中的感染情况,本研究利用FITC-Protien A与FITC-Protien G混合物作为荧光二抗,以间接免疫荧光技术对我国5个省/自治区的10个地区636份蝙蝠血清样品进行检测.结果显示,建立的间接免疫荧光实验方法可检测犬的高免血清效价达256倍.部分地区的蝙蝠血清中抗RV抗体阳性率在1.09％至19.05％(4/21),感染带毒情况与当地狂犬病的流行情况呈相关性.研究结果表明,蝙蝠作为RV的自然宿主在狂犬病的流行中发挥作用.

摘要： 本研究采用VeroE-6分离培养对疫区所获的部分标本进行了病毒分离,对所分离的毒株主要采用了免疫荧光技术、RT-PCR分型技术进行了鉴定和分型.结果从阳性鼠肺分离到8株病毒,从病人血清分离到1株病毒.经鉴定均为SEO型汉坦病毒.

摘要： 肾穿刺技术是肾脏疾病诊断的依据，多年来依靠光学显微镜来进行形态学的观察，根本无法做出正确的诊断分类。通过实验证明了对冰冻切片行荧光染色，可以提高肾脏疾病诊断的准确性。

摘要： 肾穿刺技术是肾脏疾病诊断的依据，多年来依靠光学显微镜来进行形态学的观察，根本无法做出正确的诊断分类。通过实验证明了对冰冻切片行荧光染色，可以提高肾脏疾病诊断的准确性。

摘要： 肾穿刺技术是肾脏疾病诊断的依据，多年来依靠光学显微镜来进行形态学的观察，根本无法做出正确的诊断分类。通过实验证明了对冰冻切片行荧光染色，可以提高肾脏疾病诊断的准确性。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及增强LGI1免疫荧光的方法、LGI1抗体的免疫荧光检测方法及应用。本发明利用共表达LGI1和ADAM22；或共表达LGI1和ADAM23的方式增强LGI1免疫荧光，所述ADAM22蛋白或ADAM23蛋白可以促使细胞内LGI1驻留在细胞膜上，并且捕获细胞外的LGI1，能够增强LGI1免疫荧光信号，只需微量的ADAM22或ADAM23质粒即可检测出LGI1信号，解决免疫荧光检测血清中LGI1自身抗体信号差的问题。

摘要： 本发明涉及一种独立多通道免疫荧光微流控芯片和免疫荧光检测方法。该独立多通道免疫荧光微流控芯片包含至少两个独立的通道，每个通道包含依次连接的等量均分流道、过滤区、缓冲区、荧光包被区、时控阀门、检测区和废液区，各个通道的等量均分流道连接同一个进液口。本发明的独立多通道免疫荧光微流控芯片，在进样本阶段即对液体进行等量均分，不同通道拥有独立的荧光抗体包被区以及时空阀门，拥有独立的废液区，解决了不同检测项目可能造成互相干扰的问题；每个独立通道可以集成互相不干扰的多个检测项目，在实现了高通量的同时，提高了检测精度和效率，降低了成本。

摘要： 本发明提供一种免疫荧光检测系统，包括：主控模块，包括主通信接口；驱动模块，与所述主通信接口连接，包括至少两个驱动接口和至少两个光耦接口，其中，每个所述驱动接口与至少两个步进电机连接，每个所述光耦接口与一光耦连接；所述主控模块根据用户所选择的样本检测项目，执行调度控制，所述驱动模块响应于所述调度控制，根据用户所选择的样本检测项目，生成相应步进电机和光耦的控制指令，以控制相应步进电机执行相应操作并监控相应光耦，从而进行样本检测项目。本发明还提供了其控制方法。本发明拓展性强，可支持多个步进电机和光耦。并且可以实现不同模块的升级更新。

摘要： 发明人提出一种杂交捕获免疫荧光分析法，通过杂交捕获获取待测样本中的目标核酸片段，通过荧光信号识别，对样本中目标核酸进行检测和一种用于核酸杂交捕获免疫荧光检测的免疫荧光层析试条和试剂盒。核酸杂交捕获免疫荧光检测方法快速，操作简单，加样后的反应过程中在常温中进行，无变温环节，而且检测灵敏度与市场上同类产品一致。

摘要： 本发明提供了一种免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法，所述免疫荧光分析装置包括黑色滤膜，所述免疫荧光分析方法采用黑色滤膜截留被荧光标记抗体染色的待检测对象，同时滤过未与待检测对象结合的荧光标记抗体，之后采用荧光检测装置对所述黑色滤膜表面的截留物进行分析，实现荧光点的阅读和计数；所述免疫荧光分析方法的操作步骤简单，分析成本低，并且检测结果准确；所述免疫荧光分析装置的结构简单，生产成本低，使用方便，检测效果好；本发明的免疫荧光分析装置与免疫荧光分析方法能够广泛使用，不仅适用于大型医院与专业的实验室，在基层的医疗机构也能广泛使用。

摘要： 本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。

摘要： 本发明涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪及及其校准方法。

摘要： 本实用新型涉及一种免疫荧光检测光路机构，包括光源发生装置、光学二相分镜、第一聚集透镜组件、第二聚集透镜组件及荧光采集装置，光学二相分镜设置于光源的传输光路上，第一聚集透镜组件与第二聚集透镜组件分别位于光学二相分镜的反射光的光路及透射光的光路上，荧光采集装置位于第二聚集透镜组件远离光学二相分镜的一侧；第一聚集透镜组件被配置为根据施加于其的电信号沿光学二相分镜的反射光光路方向作直线运动。如此，可将多台免疫荧光检测仪对同一待测样本的荧光试纸的荧光值进行统一，降低了因仪器中的零件差异及生产组装中产生的差异对测试结果的数值影响，降低了不同仪器之间的CV值，提高了测试的准确性。还提供一种免疫荧光检测仪。