冰核细菌

摘要： 由于霜冻能引发植物产生冻害,农作物长期处于低温环境下,会造成冻害,对品质和产量都会造成严重影响。冰核细菌因其能够诱发水结冰的特性受到专家学者的关注,冰核细菌常加重农作物和植物冻害。本文旨在研究冰核细菌的致病机制,并针对其致病机制,分析研究其防控策略,为农作物的冻害防控提供思路。

摘要： 选用自然界中杨树上分布最广泛的2种冰核细菌(INA):丁香假单胞菌(编号“2090”)、菠萝泛生氏菌(编号“1332”)做为接种菌.于秋季,在“中阳九””108”“北京杨”“3016”“中绥12”“沙兰杨”“小黑杨”“小叶杨”“小美旱”“辽育3号”“191”“192”和“146”,共计13个无性系的1年生苗的芽附近,自然越冬后,于次年芽萌发后的4月25日调查接种芽萌发芽数.通过接种芽萌发率反映不同杨树品种对冰核细菌的抗性.结果 如下:不同杨树品种的抗冰核细菌能力不同,“小叶杨”“小美旱”和“中绥12”的抗冰核细菌能力较强,“108”“中阳九”“辽育3号”抗冰核细菌能力较差,“3016”处于中档水平.由此可以看出速生黑杨派品种抗冰核细菌能力弱于乡土树种.另外,不同杨树品种对“2090”和“1332”的抗御能力不同,总体看“2090”的致病能力比“1332”强.

摘要： 为了解贵州植物上冰核细菌的种类及分布,采用平板稀释法分离细菌和拮抗菌、小液滴冻结法鉴定冰核细菌、双层平板法筛选拮抗菌,通过形态学特征、生理生化指标结合16S rDNA序列对比分析等方法鉴定冰核细菌和拮抗菌的种类.结果表明,从贵州59种霜冻植物上分离到7株冰核细菌,从32份土壤中筛选到3株拮抗菌.经鉴定,7株冰核细菌中,1株为成团泛菌(Pantoea agglomerans),1株为菠萝泛菌(Pantoea ananatis),1株为荧光假单胞(Pseudomonas fluorescens),2株为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae),2株为绿黄假单胞菌(Pseudomonas viridiflava).3株拮抗菌中,1株放线菌为暗产色链霉菌(Strepto-myces phaeochromogenes),2株细菌均为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).

摘要： 为了解遵义市霜冻植物上冰核细菌的种类以及筛选对冰核细菌有拮抗作用的细菌,采用小液滴冻结法鉴定冰核细菌的冰核活性,并用双层平板法筛选冰核细菌的拮抗细菌;采用形态学特征、生理生化鉴定以及16S rDNA序列对比分析等方法确定冰核细菌和拮抗细菌种类.结果显示,从遵义市采集到35种植物冻害标本,共分离到4株冰核细菌Z-A、Z-B、Z-C、Z-QCH;从遵义市采集到23种土样,共分离出3株拮抗细菌XH、XM、XL.经鉴定,Z-A、Z-B是菠萝泛菌(Pantoea ananatis),Z-C是成团泛菌(Pantoea agglomerans),Z-QCH是绿黄假单胞(Pseudomonas viridiflava).拮抗细菌XH、XM是解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),XL是甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus).初步了解了遵义市冰核细菌的种类,为遵义市霜冻植物生物防治奠定了一定基础.

摘要： [目的]筛选出具有防除枇杷INA细菌的拮抗菌.[方法]从枇杷根际土壤中分离冰核细菌拮抗菌,对其进行抑菌圈、杀菌能力、破坏冰核活性蛋白能力测定.[结果]从不同海拔地区的根际土壤中共分离得到128个菌株,其中有拮抗效果的有55株,平皿拮抗效果强的有15株,再经拮抗系数比较得到9株强拮抗菌菌株,最后筛选出l株杀菌率达98％、破坏冰核蛋白能力达100％的拮抗菌BL-36.[结论] BL-36既有杀菌效果又有破坏冰核蛋白能力,是具有较好利用前景的防除诱发枇杷霜冻害冰核细菌、减轻枇杷霜冻害的生物防治材料.

摘要： 从茶树内生菌中进行了冰核细菌拮抗菌的筛选，得到菌株Y1，通过对菌株Y1进行形态学观察、生理生化指标测定及16 S rDNA 序列测定和序列同源性分析，将菌株 Y1鉴定为解淀粉芽孢杆菌（ Bacillus amyloliquefaciens）。本研究获得了茶树内生拮抗菌株,明确了菌株 Y1的种属，有利于冰核细菌生物防治的开展。%In order to protect the tea plantagainstfreezing injury, the screeningof antagonistic bacteriaagainstINA bacteria No. 8(Pantoea ananatis)and No.14 (P.agglomerans)isolated fromteaplantwascarriedoutin Shandong Province.The strain Y1,anantagonistic bacteriaagainstINA bacteriawas isolated from theendophyticbacteria strainsof tea plant. Based on themorphological characteristics and 16SrDNA sequence analysis, the strain Y1was identified as theBacillus amyloliquefaciens.Through this study, the endophyticbacteriastrainagainst the ice nucleation bacteriawas obtained and identefied, it will bebeneficial to the development of the biological controlof ice nucleation bacterial.

摘要： To obtain recombinant strain with high ice nucleation activity,iceA gene were amplified by PCR from ice nucleation active bacteria Erwinia ananas 110 and cloned into vector pMD19-T which was transformed into E.coli DH5α.The recombinant clones were screened by single and double digestion before sequenced.From the positive recombinant strain,iceA gene was subcloned into prokaryotic expression vector pET-23a(+),resulting in recombinant plasmid pET-23a(+)-ice which was transformed into E.coli BL21(DE3)pLysS and induced by IPTG.SDS-PAGE indicated that ice nucleation active protein was expressed as inclusion bodies with molecular weight of about 180 000.Ice nucleation activity test showed there was no difference in ice nucleation activity under-5,4,-3,and-2 °C between recombinant E.coli BL21(DE3)pLysS and wild ice nucleation active bacteria Erwinia ananas 110.%为获得具有高冰核活性的基因工程菌,从冰核细菌Erwinia ananas 110扩增冰核基因iceA,将其克隆到pMD 19-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,单、双酶切鉴定并测序；阳性克隆目的片段亚克隆到表达载体pET-23a(+)上,转化大肠杆菌DH5αt,单、双酶切鉴定重组质粒；阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并经IPTG诱导表达.SDS-PAGE电泳检测表明,冰核基因iceA能够并以包涵体形式表达,相对分子质量约为180 000.冰核活性测定结果表明,重组菌BL21 (DE3)pLysS/pET-ice的冰核活性与野生冰核细菌Erwinia ananas 110在-5、-4、-3、-2°C下无明显差别.

摘要： It was well known that ice nucleation is one of the most basic processes that lead to precipitation. Thisrnmini-review paper focused on respects of IN A bacterial aerosols: concentration and dynamic macroscopically inrnatmosphere; molecular mechanic progresses, properties and factors of heterogeneous ice nucleation in lab and role onrnprecipitation. However, there is no systemic and confirmed nucleation theory basing on characteristics ofrnmicro-physiology and/or physical chemistry of INA bacteria. Moreover it had been remained to research how deeply INArnbacteria nucleating works on meteorologic process.%介绍了大气中细菌气溶胶的种类和浓度分布的变化特征,对冰核细菌促进冰核核化的分子生物学机制,影响成冰活性的因素以及冰核在大气冰核核化过程中作用的研究进展等做了重点介绍,对冰核细菌的生物学、分子生物学和形态学及其实际应用等方面的研究进展也做了讨论,同时也指出了今后需要进一步研究的问题,尤其是生物冰核在云和降水中作用方面的问题.

摘要： 针对茶树上存在的能诱发和加重茶树霜、冻害的冰核细菌,采用室内试验和室外盆栽试验,对防治冰核细菌的药剂进行了初步筛选,筛选出既能杀灭冰核细菌又能破坏冰核活性的两种药剂,其防霜效果可达50％以上。

摘要： 甲基羟乙基纤维素用于制备模拟食品，替代瘦牛肉作为实验对象。丁香假单胞菌在30°C下培养作为活性冰核。-35°C冷柜冷冻，测得丁香假单胞菌在-5--6°C具有使水结冰的冰核活性；添加冰核细菌的样品较无添加样品的过冷度提高2.6～4.0°C。

摘要： 将冰核活性蛋白应用于食品的冻结和低温保鲜过程中，可提高被冻结物料的过冷点，缩短冷冻时间，从而节省大量能源，同时可以大大地提高冻结物料的品质。本发明采用生物化学技术，获得了高纯度的冰核活性蛋白，提出了通过破碎菌体得到的菌体蛋白溶液，将浓缩后的蛋白溶液经Sepharose 4B凝胶柱进行分离获得高纯度的冰核活性蛋白。这种冰核活性蛋白由于不含整个的菌体，有望于安全应用在食品加工行业。

摘要： 本发明涉及农业病虫害防治技术领域，尤其涉及一种防治茴香薄翅野螟的生物防控药剂、制备方法及其使用方法。该生物防控药剂的有效活性成分为冰核活性细菌，冰核活性细菌含量占总重量的1～90％，冰核活性细菌为丁香假单胞菌(Pseudomonassyringae)和欧文氏菌(Erwiniapyrifoliae)中的任意一种或二者的混合物；冰核活性细菌中丁香假单胞菌为0.1～99.9wt％，欧文氏菌为0.1～99.9wt％；冰核活性细菌中添加或不添加助剂而制成乳油、微乳剂、水乳剂、水剂、水悬浮剂、油剂、油悬剂、微囊悬浮剂或水分散粒剂。利用冰核活性细菌提高茴香薄翅野螟越冬幼虫过冷点，使其在越冬期间，于相对较高的温度下冻死或冻伤，减少其下一年虫源，实现茴香薄翅野螟无公害、低毒、环保的防治目的，达到防治效果。

摘要： 将冰核活性蛋白应用于食品的冻结和低温保鲜过程中，可提高被冻结物料的过冷点，缩短冷冻时间，从而节省大量能源，同时可以大大地提高冻结物料的品质。本发明采用微生物发酵生产技术，获得了具有高冰核活性和高生物量的冰核活性细菌的菌体蛋白质。为冰核活性细菌在食品行业的应用打下坚实的基础。

摘要： 将冰核活性蛋白应用于食品的冻结和低温保鲜过程中，可提高被冻结物料的过冷点，缩短冷冻时间，从而节省大量能源，同时可以大大地提高冻结物料的品质。本发明采用生物化学技术，获得了高纯度的冰核活性蛋白，提出了通过破碎菌体得到的菌体蛋白溶液，将浓缩后的蛋白溶液经Sepharose 4B凝胶柱进行分离获得高纯度的冰核活性蛋白。这种冰核活性蛋白由于不含整个的菌体，有望于安全应用在食品加工行业。

摘要： 本发明公开了一种防控虫害的冰核活性细菌组合物的制备方法，其特征在于，步骤(一)，发酵冰核活性细菌；其中，所述的冰核活性细菌包括丁香假单胞菌、菠萝欧文氏菌、以及黄单胞菌；步骤(二)，所得到的冰核活性细菌与复合表面活性剂混合均匀，即得所述的防控虫害的冰核活性细菌组合物。本发明发酵得到了大量的丁香假单胞菌、菠萝欧文氏菌、以及黄单胞菌，能够有效防控农业害虫的危害，特别是在越冬期间对于害虫幼虫具有高效的灭杀功能。本发明降低害虫幼虫的过冷点，使害虫幼虫在越冬期间，于相对较高的温度下冻死或冻伤。本发明方法简单，使用后不产生抗药性，无污染，而且长期有效。

摘要： 本发明公布了一种浸润核模式下冰核浓度及成冰活性的离线检测装置及测定方法，包括：分液器、PCR板、PCR支架、水浴槽、电脑、镜头和CCD相机；电脑中设置温度控制、温度记录、图片采集和数据处理模块；PCR板置于PCR支架上，并连同PCR支架一起放在水浴槽中的冷凝液中；水浴槽、CCD相机均与电脑相连接；通过图片采集模块控制图像采集、图像存储和数据处理。本发明实现液体盛放槽能盛放更多的液滴；减少了待测颗粒物的损失；采用PCR板减少了降温过程中液滴相互影响的问题，增大可测定的液滴体积，降低分液的难度，减少由于液滴体积定量不准引起的误差。本发明操作简单，可同步进行温度记录、图像采集和数据处理。

摘要： 本发明公布了一种浸润核模式下的冰核浓度及成冰活性检测装置及方法，包括分液器、液滴冷热台、样品间隔槽、疏水性载玻片、温度控制模块、温度记录模块、图片采集模块和数据处理模块；用分液器移取待测定溶液；将液滴置于疏水性载玻片上并置于样品间隔槽内；样品间隔槽为圆形；调整样品间隔槽的高度；通过图片采集模块收集图片；通过温度控制模块和温度记录模块控制和记录冷热台降温过程中的温度变化；将图片和温度输入到数据处理模块中进行处理，获得大气中的冰核浓度和成冰活性。本发明操作简单、成本低廉，可解决检测过程中液滴损失问题，使液滴温度稳定，光源稳定，提高检测的稳定性和精确性。

摘要： 本实用新型公布了一种浸润核模式下冰核浓度及成冰活性的离线检测装置，包括：分液器、PCR板、PCR支架、水浴槽、电脑、镜头和CCD相机；电脑中设置温度控制、温度记录、图片采集和数据处理模块；PCR板置于PCR支架上，并连同PCR支架一起放在水浴槽中的冷凝液中；水浴槽、CCD相机均与电脑相连接；通过图片采集模块控制图像采集、图像存储和数据处理。本实用新型实现液体盛放槽能盛放更多的液滴；减少了待测颗粒物的损失；采用PCR板减少了降温过程中液滴相互影响的问题，增大可测定的液滴体积，降低分液的难度，减少由于液滴体积定量不准引起的误差。本实用新型操作简单，可同步进行温度记录、图像采集和数据处理。

摘要： 本实用新型公布了一种浸润核模式下的冰核浓度及成冰活性检测装置，包括分液器、液滴冷热台、样品间隔槽、疏水性载玻片、温度控制部件、温度记录部件、图片采集部件和数据处理部件；用分液器移取待测定溶液；将液滴置于疏水性载玻片上并置于样品间隔槽内；样品间隔槽为圆形；调整样品间隔槽的高度；通过图片采集部件收集图片；通过温度控制部件和温度记录部件控制和记录冷热台降温过程中的温度变化；将图片和温度输入到数据处理部件中进行处理，获得大气中的冰核浓度和成冰活性。本实用新型操作简单、成本低廉，可解决检测过程中液滴损失问题，使液滴温度稳定，光源稳定，提高检测的稳定性和精确性。

摘要： 本发明涉及一种酸性物质加抗生素防治冰核细菌减轻霜冻害的技术。本发明一种酸性物质加抗生素防治冰核细菌减轻霜冻害的技术按重量计，其步骤是：(1)选取酸性物质一份，加两种抗生素各一份；(2)上述物质分别研磨成粉，混合均匀后成为一种粉剂备用；(3)在霜冻害来临前7－10天，将上述粉剂兑水，溶解后均匀喷施于植物表面。通过上述技术方案可以防治冰核细菌，灭活冰核细菌所产生的冰核蛋白，并且对植物由一定的生长促进作用，从而达到防治或者减轻霜冻害的目的。本发明的效果用途能杀灭冰核细菌，灭活冰核细菌所产生的冰核蛋白，并且在一定程度上促进植物生长，明显减轻植物霜冻害，并且达到有霜防霜、无霜防病的效果。