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荧光素-O-乙酰哌嗪新试剂柱前衍生高效液相色谱分离荧光检测七种游离脂肪酸

摘要

游离脂肪酸作为一种重要的营养物质,在人体生理中起着重要的作用,广泛地存在于食品、有机组织和生物体中,如饱和脂肪酸多存在于动物性食品肉类中.多不饱和脂肪酸多存在于植物中,是防治心脑血管疾病的特殊营养物质.人体中的脂肪酸的多少与人体的身体健康状况密切相关,因此测定人体中脂肪酸的含量具有一定的意义. 本实验室新合成一种柱前荧光衍生试剂,荧光素-O-乙酰哌嗪(PAF)用于衍生脂肪酸,在含3×10-3EDC的无水乙腈中,PAF与被测物在60℃衍生1h,流动相为含7mmol·L-1的pH6.5的Na2HPO4-H3Cit3缓冲溶液的甲醇-水(88:12,V/V)溶液,流速1.0 ml/min,HPLC分离荧光检测了常见的月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸和花生四烯酸七种游离脂肪酸.22min能实现基线分离,线性范围0.04~1 μmol·L-1,信噪比(S/N)为3时,检测限达到2fmol(月桂酸)到128fmol(硬脂酸。

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