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人循环成纤维细胞的分离和鉴定

摘要

目的 建立分离、培养人循环成纤维细胞的方法,研究其细胞生物学特征和功能.方法 取成人外周血白细胞,经1.077 g/ml的淋巴细胞分离液分离,接种于含20%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养.对贴壁生长的成纤维样细胞进行免疫组织化学鉴定、流式细胞仪分析和电镜观察,并通过测定培养液中羟脯氨酸含量研究其胶原合成能力.结果 培养9天后循环成纤维细胞分子标记CD34、CD45、COL Ⅰ阳性,其中COL Ⅰ阳性细胞含量为83.5%;电镜下观察具有典型的成纤维细胞特征;培养液中羟脯氨酸含量为11.17 μg/ml,明显高于空白对照组8.07 μg/m1,P<0.01,表明培养细胞具有较强的胶原合成能力.结论 成人外周血中存在成纤维细胞的前体细胞,经体外分离、培养可分化为循环成纤维细胞.

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