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新德里1型金属β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学及耐药机制研究

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目的：研究医院产新德里金属β内酰胺酶(NDM)肺炎克雷伯的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.rn 方法：收集2011年1月至2012年12月南昌大学第一附属医院住院患者临床分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌110株,使用生物梅里埃公司生产GN13的检测菌株的MIC值,改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶确认,同时对试验菌株的blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁PCR扩增检测及测序,测序结果BLAST比对分析.MLST技术分析耐药菌株间的间源性.对阳性株进行质粒接合和消除试验,并对接合子及质粒消除后菌株进行PCR扩增及碳青霉烯类抗生素MIC值的检测.rn 结果：110株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中检出NDM基因阳性率为12.7％(14/110),经测序确认为blaNDM-1基因.14株产NDM-1型金属β内酰胺酶菌株厄他培南、亚胺培南及美罗培南的耐药率均为100％,环丙沙星耐药率为71.4％,左氧氟沙星耐药率为64.3％,阿米卡星耐药率为35.7％,氨曲南耐药率78.6％.产NDM菌株对复方新诺明、头孢替坦、哌拉西林他唑巴坦及头孢哌酮舒巴坦的耐药率明显高于非产NDM菌株(P值分别为0.000,0.031,0.011,0.006),而对妥布霉素、庆大霉素及氨曲南的耐药率则显著低于后者(P值分别为0.027,0.000,0.002).ISAba125-NDM连锁检测阳性率为100％(14/14).14株blaNDM-1基因阳性菌质粒接合试验均为成功,接合子对亚胺培南、美罗培南及厄他培南的MIC值增高4～64倍,PCR扩增接合子大肠埃希菌J53blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁均为阳性.而质粒分析发现blaNDM-1基因及ISAba125-NDM连锁位于一大小约65Kb质粒上.rn 结论：本地区新德里金属β内酰胺酶肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素及氨曲南的耐药率相对较低,blaNDM-1基因主要位于质粒上可通过接合方式传播,易于在菌株间流行,应当引起临床高度重视;插入序列ISAba125可能参与了blaNDM-1基因的介导.

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