兔角膜缘上皮细胞培养联合羊膜行自体移植的实验研究

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目的:研究运用体外培养的角膜缘干细胞联合人羊膜的方法,行自体移植治疗角膜缘干细胞完全缺乏的兔眼.方法:选用健康新西兰白兔20只,显微镜下手术制成右眼角膜缘干细胞缺乏的兔眼模型,其中12只兔左眼取少量的角膜缘组织进行体外培养、扩增一周左右,然后传代并种植于无上皮的人羊膜上,继续培养约20天左右制成人工合成角膜上皮移植片,采用自体移植的方法,移植到相应的12只角膜缘干细胞完全缺乏的兔眼模型上,另外8只兔只进行无上皮细胞羊膜的移植.结果:移植了含有自体角膜上皮细胞的羊膜的兔眼,术后早期都形成了角膜上皮化并明显抑制了新生血管的再生,通过角膜荧光素染色、苏木素-伊红(HE)染色、细胞角蛋白AE1单克隆抗体免疫组化以及扫描电镜和透射电镜观察,证明培养并移植的角膜上皮与正常的角膜上皮无明显差异;而只接受羊膜移植的兔子,术后患眼又出现角膜混浊和明显的新生血管,角膜HE染色示复层上皮细胞,排列不规则,夹杂空泡样杯状细胞,其下基质可见炎性细胞、红细胞和新生血管,表明角膜表面有结膜上皮覆盖.结论:利用无上皮细胞的羊膜作为载体,体外培养角膜缘干细胞并自体移植,术后早期可以恢复角膜上皮化、抑制新生血管生长,并且不会发生免疫排斥反应.动物实验证明这一技术是有效的、可行的.

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作者
刘肖艺;
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作者单位

南京医科大学;

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授予单位南京医科大学;
学科眼科学
授予学位硕士
导师姓名刘庆淮,袁南荣;
年度 2004
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类眼外科手术学;
关键词
角膜缘干细胞; 角膜上皮细胞; 体外培养; 自体移植; 新生血管; 兔; 羊膜; 结膜上皮;

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