载体介导siRNA体内抑制鼠乳腺癌细胞KLK6基因表达及功能研究

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Kallikrein是一类编码丝氨酸蛋白酶的基因家族，该家族由15个成员组成。该家族多数成员的表达与激素依赖相关型肿瘤密切联系，暗示了它们与作为前列腺癌临床生物学标志的前列腺特异性抗原PSA(hK3)一样，具有生物学标志潜力。KLK6是该基因家族成员之一，编码丝氨酸蛋白酶(hK6)，据报道KLK6与性激素依赖性器官肿瘤—乳腺癌的发病有关，但参与的机制尚不清楚。为此，本课题拟通过siRNA技术来探讨该基因在乳腺癌中的功能。目的：运用siRNA技术探讨KLK6基因在乳腺癌发生发展中的作用。方法：应用乳腺癌细胞株MCF-7建立裸鼠乳腺癌动物模型，体外合成KLK6siRNA并构建其表达载体，瘤体注射siRNA或其表达载体，探讨siRNA对荷瘤鼠瘤体细胞中KLK6基因的干扰效果及其对瘤体细胞生物学特性的影响。结果：载体介导的siRNA体内抑制了人乳腺癌荷瘤鼠KLK6的表达后，移植瘤生长速度加快，肿瘤细胞S期明显增加，细胞凋亡有下降趋势。结论：本实验运用了载体介导的siRNA技术成功抑制了裸鼠体内人乳腺癌移植瘤中KLK6基因的表达。实时荧光定量PCR检测KLK6mRNA表达降低、免疫组化检测hK6蛋白表达量明显减少。流式细胞仪分析结果显示，实验组S期细胞明显增多、移植瘤生长速度加快，细胞凋亡有下降趋势。提示KLK6基因在乳腺癌的发生过程中起到抑制作用，为乳腺癌的防治提供了新思路。

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作者
季丙元;
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作者单位

山东师范大学;

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授予单位山东师范大学;
学科细胞生物学
授予学位硕士
导师姓名李云龙,胡成进;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类乳腺肿瘤;癌细胞生物学;
关键词
乳腺癌; 基因表达; siRNA技术; KLK6基因; 肿瘤细胞; 抑制作用;

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