声明
主要符号对照表
前言
第一章 骨骼肌发育与非编码RNA的研究进展
1.1 骨骼肌发育与肌肉再生
1.2 miRNA的研究进展
1.2.1 miRNA的形成机制与功能
1.2.2 miRNA与肌生成
1.3.1 circRNA的发现与形成
1.3.2 circRNA的功能
1.3.3 circRNA与肌生成
1.4 肌生成相关的信号通路
1.5 本研究的目的和意义
第二章 circTTN 的鉴定及对牛成肌细胞增殖和分化的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 实验样品准备
2.1.2 牛肌肉原代细胞的分离培养
2.1.3 载体的构建及干扰片段设计合成
2.1.4 细胞增殖实验
2.1.5 免疫荧光实验
2.1.6 RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR实验
2.1.7 细胞总蛋白提取及Western Blot实验
2.1.8 数据分析
2.2 结果与分析
2.2.1 circTTN的鉴定
2.2.2 circTTN促进牛成肌细胞的增殖
2.2.3 circTTN促进牛成肌细胞的分化
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 circTTN作为miR-432的分子海绵调控牛成肌细胞的增殖和分化
3.1.1 细胞准备
3.1.2 RNA荧光原位杂交实验（RNA-FISH）
3.1.3 载体构建及miR-432模拟物（miR-432 mimic）的合成
3.1.4 RNA核质分离实验
3.1.5 双荧光素酶报告分析
3.1.6 RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）实验
3.1.7 细胞增殖实验
3.1.8 免疫荧光实验
3.1.9 RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR实验
3.1.10 细胞总蛋白提取及Western Blot实验
3.1.11 数据分析
3.2 结果与分析
3.2.1 circTTN的亚细胞定位
3.2.2 circTTN作为miR-432的分子海绵
3.2.3 miR-432抑制牛成肌细胞增殖
3.2.4 miR-432抑制牛成肌细胞分化
3.3 讨论
3.4小结
第四章 circTTN 通过吸附miR-432 调控IGF2/PI3K/AKT信号通路
4.1.1 细胞准备
4.1.2 双荧光素酶报告分析
4.1.3 细胞增殖实验
4.1.4 免疫荧光实验
4.1.5 载体的构建及干扰片段设计合成
4.1.6 RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR实验
4.1.7 细胞总蛋白提取及Western Blot实验
4.1.8 数据分析
4.2 结果与分析
4.2.1 miR-432直接靶向IGF2
4.2.2 干扰IGF2抑制牛成肌细胞的增殖
4.2.3 干扰IGF2抑制牛成肌细胞的分化
4.2.4 circTTN通过吸附miR-432激活IGF2/PI3K/AKT信号通路
4.3 讨论
4.4 小结
结论与创新点
结论
创新点
参考文献
附录
致谢
个人简历
西北农林科技大学;
