以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶

孙亮先; 骆红梅; 董海涛; 李德葆

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以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶

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用含有Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶.利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃、75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的.PCR扩增反应和SDS-PAGE分析表明所制备的Taq DNA聚合酶的纯度、活力、敏感性、特异性均达到试验要求.该方法具有快速简便的优点.

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来源
《江西农业大学学报》 |2001年第4期|495-497|共3页
作者
孙亮先; 骆红梅; 董海涛; 李德葆;
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作者单位

浙江大学生物技术研究所;

浙江杭州;

310029;

浙江大学生物技术研究所;

浙江杭州;

310029;

浙江大学生物技术研究所;

浙江杭州;

310029;

浙江大学生物技术研究所;

浙江杭州;

310029;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类促性腺激素;
关键词
Taq DNA聚合酶; 冻融; 纯化; 聚合酶链式反应;

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