果蝇心脏发育标记基因Svp的多克隆抗体制备

李玉玲; 赵梦婧; 李瑞可; 张亚楠; 吴秀山; 袁婺洲

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果蝇心脏发育标记基因Svp的多克隆抗体制备

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研究果蝇的心脏发育基因表达调控机制,其相应靶点的抗体必不可少.但目前市场上缺乏此类商用抗体,因此本研究选择果蝇心脏发育中的标记基因Svp(Seven-up),并采用DNA免疫技术来快速制备其抗体.首先通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出Svp基因编码区部分序列,然后将其连接到真核表达载体pCAGGS-P7上,再将重组质粒pCAGGS-P7-Svp直接注射进小鼠体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活了小鼠的特异性细胞免疫和体液免疫,从而分泌相应的抗体,取小鼠的血清收集获得抗体.最后用蛋白质印迹(Western blot)和胚胎免疫荧光技术检测Svp抗体的效价和特异性.结果表明,制备的Svp多克隆抗体具有高效价和特异性,为后续的果蝇心脏发育研究奠定了基础.

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来源
《激光生物学报》 |2020年第5期|433-437445|共6页
作者
李玉玲; 赵梦婧; 李瑞可; 张亚楠; 吴秀山; 袁婺洲;
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作者单位

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙 410081;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
Svp; 果蝇; 心脏发育; DNA疫苗; 多克隆抗体;

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