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奈瑟氏淋球菌表面蛋白A基因克隆及在真核细胞中的表达研究

         

摘要

为了研制奈瑟氏淋球菌外膜蛋白-奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface Protein A,NspA)的核酸疫苗,根据淋球菌NspA的基因序列,设计一对寡核苷酸引物.以淋球菌WHO-A菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得具有完整开放读码框架(ORF)的NspA基因,并将其正向插入真核表达载体pCMVscript,成功构建了表达NspA基因的真核细胞表达载体pcNspA.用脂质体包裹pcNspA重组质粒转染COS细胞,以间接免疫荧光分析法分析NspA基因的表达,发现转染pcNspA的COS细胞能高表达NspA抗原.淋球菌免疫保护性抗原NspA基因的克隆与真核细胞表达,为进一步研究淋球菌NspA对雌激素处理的淋球菌感染实验小鼠的免疫保护作用奠定了基础.

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