转染miRNAs降低脂多糖诱导的大鼠肠微血管内皮细胞水通道蛋白1表达

赵承承; 陈建泉; 吕纯业

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转染miRNAs降低脂多糖诱导的大鼠肠微血管内皮细胞水通道蛋白1表达

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目的探讨大鼠肠微血管内皮细胞miRNAs对脂多糖(LPS)诱导的水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法用机械吹打法及胰蛋白酶消化法从大鼠空肠分离微血管内皮细胞,用免疫荧光染色鉴定细胞;用荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测AQP1和miRNAs的表达;miRNAs芯片分析结合在线软件筛选调控AQP1表达的miRNAs,瞬时转染miRNAs模拟体及对照序列进行进一步验证.结果肠微血管内皮细胞vWF免疫荧光染色为阳性.用LPS(0、0.1、1和10 mg/L)处理细胞后,AQP1 mRNA表达水平随LPS浓度增加呈下降趋势,其中1和10 mg/L LPS处理细胞后AQP1 mRNA表达水平与对照组相比有明显差异(P<0.05和P<0.001);与对照组相比,LPS处理组有22个表达上调2倍以上的miRNAs及9个下调2倍以上的miRNAs;软件预测显示芯片结果中的miR-423-5p、miR-874-5p、miR-361-3p、miR-219a-5p、miR-27b-3p、miR-133b和miR-666可与AQP1启动子区互补配对;miR-874-5p、miR-361-3p、miR-133b和miR-666在LPS处理后的肠微血管内皮细胞中表达上调;转染miR-133b和miR-666模拟体后可使AQP1 mRNA表达水平下调.结论 LPS可通过上调miR-133b和miR-666表达水平,间接抑制AQP1的表达,继而影响肠黏膜通透性.

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来源
《基础医学与临床》 |2019年第1期|42-46|共5页
作者
赵承承; 陈建泉; 吕纯业;
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作者单位

南京医科大学附属江宁医院中心实验室,江苏南京210000;

南京医科大学附属江宁医院中心实验室,江苏南京210000;

南京医科大学附属江宁医院普外科,江苏南京210000;

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正文语种 chi
中图分类 R34;
关键词
miRNAs; 脂多糖; 水通道蛋白1; 大鼠肠微血管内皮细胞;

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