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6-氰基-(3R,5R)二羟基己酸叔丁酯合成的补料生物转化工艺

         

摘要

通过对羰基还原酶工程菌E.coli BL21/pET28a(+)-cr与葡萄糖脱氢酶工程菌E.coli BL21/pET28a(+)-gdh的全细胞协同生物转化工艺进行优化,实现高浓度投料的6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯[(5R)-CHOHB]不对称还原合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯[(3R,5R)-CDHHB].采用全细胞分批转化方式,确定底物(5R)-CHOHB和葡萄糖的一次性投料浓度为300 g/L.进一步考察了补料转化方式对提高转化效率的影响.结果表明,相对于一次性投料的全细胞分批转化工艺,采用连续补料方式和分批补料方式均能使底物投料量达到400 g/L.相对于以往报道,底物投料量提高了33.3%,产物(3R,5R)-CDHHB非对映体过量值(d.e.值)为99.5%,具有良好的工业应用前景.

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