表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒的遗传稳定性分析及滴度测定

王青; 胡建和; 徐彦召

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研究表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒pAd.H5的遗传稳定性及重组病毒的滴度.将重组腺病毒pAd.H5在293细胞上连续传代20次,取第5、10、15和20代的重组病毒采用PCR方法扩增禽流感病毒HA基因,并进行基因序列分析;用标记为GFP的快速测定法计算出20代次时重组病毒的滴度.从各代重组病毒DNA中均扩增出了约1700bp的目的条带,与HA基因片段长度一致.基因序列分析表明:第5、10、15代重组病毒中的HA基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有1处发生了点突变(即HA基因417位A→G),但其编码的氨基酸未发生变化(即同义突变),表明表达的目的蛋白抗原表位未发生变化;计算出的重组病毒滴度为108.875pfu/0.1mL.重组腺病毒pAd-H5在293细胞上连续传代20次,具有良好的遗传稳定性,重组腺病毒的病毒滴度相对较高.

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来源
《中国动物检疫》 |2010年第9期|33-35|共3页
作者
王青; 胡建和; 徐彦召;
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作者单位

河南科技学院,动物科学学院,河南新乡453003;

河南科技学院,动物科学学院,河南新乡453003;

中国农业科学院,上海兽医研究所,上海200241;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S852.659.5;
关键词
H5N1亚型禽流感; 重组腺病毒; 遗传稳定性; 病毒滴度;

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