外泌体对过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化能力促进作用的研究

贺继刚; 韩金秀; 李贝贝; 李宏远; 严丹; 任靖宇

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外泌体对过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化能力促进作用的研究

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目的探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过外泌体促进BMSCs向心肌细胞分化的能力.方法 2016年1-6月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠10只,通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs,构建过表达GATA-4的BMSCs,并加入基因开启剂多西环素(DOX).采用ExoQuick-TC提取分泌的外泌体.将GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(A组)、空载体-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(B组)、BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(C组)、BMSCs单独培养(D组)及小鼠心肌细胞单独培养(E组)72 h,采用荧光染色定性检测和反转录聚合酶链式反应(qPCR)定量检测肌钙蛋白T(cTnT)、α肌动蛋白(α-actin)、Connexin 43、肌间线蛋白(Desmin)的表达.结果免疫荧光定性检测结果显示,A组GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养72 h可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;B、C、D组可见细胞核被DAPI染为蓝色,没有表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;E组可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin.qPCR法检测结果显示,5组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);其中E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较A组升高;A组和E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较B组、C组和D组升高(P＜0.05).结论过表达GATA-4的BMSCs分泌的外泌体可以有效促进BMSCs向心肌细胞分化.

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来源
《中国全科医学》 |2018年第14期|1694-1698|共5页
作者
贺继刚; 韩金秀; 李贝贝; 李宏远; 严丹; 任靖宇;
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作者单位

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院心脏大血管外科;

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院心脏大血管外科;

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院心脏大血管外科;

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院心脏大血管外科;

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院重症医学科;

650032 云南省昆明市,云南省第一人民医院重症医学科;

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正文语种 chi
中图分类生物医学工程;
关键词
间质干细胞; GATA4转录因子; 肌细胞,心脏; 细胞分化;

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