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野猪生长激素基因的克隆与序列分析

         

摘要

参考家猪GH基因序列[M17704.1],设计1对特异引物,用PcR方法从野猪基因组中扩增出1条长约1.8 kb的DNA片段.PcR产物经PMD 18-T Vector载体转化感受态DH5α株大肠杆菌,获得重组克隆子.结果表明:野猪生长激素基因DNA序列长1 792 bp,含完整的5个外显子和4个内含子,与家猪、牛、山羊、河马、狗、小鼠和恒河猴的GH基因cDNA序列同源性分别为99.19%、89.6%、89.7%、94.6%、92.9%、86.9%、77.3%.其cDNA所编码氨基酸与牛、山羊、河马、狗、小鼠和恒河猴同源性分别为98.74%、83.9%、83.9%、92.5%、90.7%、81.6%、65.5%.所测野猪生长激素基因序列与13个家猪品种的GH基因序列比较,检出54个核苷酸变异位点(外显子12个,内含子36个,侧翼区6个),其中24个为各家猪品种内所不具有的新变异位点,即野猪种群特有变异位点.在外显子的12个变异位点中,有8个可导致氨基酸残基的改变.这些结果,表明了野猪GH基因在进化过程中的保守性和多态性.

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