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首页> 中文期刊> 《畜牧兽医学报》 >非洲猪瘟病毒强免疫原性重组CD2v抗原的制备与初步应用

非洲猪瘟病毒强免疫原性重组CD2v抗原的制备与初步应用

         
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摘要

旨在获得非洲猪瘟病毒(ASFV)强免疫原性重组CD2v抗原,利用生物信息学软件进行CD2v抗原指数分析,将其细胞质内免疫显性区与类弹性蛋白多肽(ELP)在重组大肠杆菌中进行融合表达,对ELP-CD2v融合蛋白的相变循环(ITC)条件进行优化,在优化条件下进行融合蛋白纯化,利用烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶活性包涵体切除ELP标签,通过免疫转印法对重组CD2v抗原进行鉴定,利用重组CD2v抗原建立ELISA抗体检测方法,与多抗原ELISA对ASFV抗体阳性和阴性血清进行平行检测.结果 显示,ELP-CD2v融合蛋白获得正确、可溶性表达,ITC条件为28℃和1.5 mol·L-1 NaCl,在0.2％ Triton X-100存在下进行ITC,纯化的融合蛋白纯度为76.3％;TEV蛋白酶活性包涵体能有效切割ELP标签,再次ITC回收的重组CD2v抗原纯度为91.7％,能被ASFV抗体识别;根据多抗原ELISA检测结果选择血清样品,用重组CD2v抗原ELISA进行检测,结果显示,15份ASFV抗体阴性血清均为CD2v抗体检测阴性,15份ASFV抗体阳性血清均为CD2v抗体检测阳性.这些研究结果表明,ASFV的CD2v蛋白胞内区存在强免疫原性表位,其重组抗原有望用于CD2v的抗体检测.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2020年第10期|2472-2480|共9页
  • 作者

    周晓慧; 肖景景; 张鑫宇; 张泉; 夏晓莉; 孙怀昌;

  • 作者单位

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    扬州大学兽医学院 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 扬州225009;

    江苏农牧职业技术学院 泰州225300;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S852.659.1;
  • 关键词

    非洲猪瘟病毒; CD2v蛋白; 强免疫原性抗原; 初步应用;

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