利用人多能干细胞来源的神经管模型探究丙戊酸钠的致畸机制

张小佐; 霍海芹; 王艳; 冯浩洋; 林颖; 许争峰

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目的利用人多能干细胞来源的体外神经管模型探索丙戊酸钠(VPA)导致神经管畸形的疾病发生机制。方法悬浮培养人多能干细胞并进行体外神经诱导,通过免疫荧光染色法检测多能性标志物八聚体结合转录因子4(Oct-4),神经特性标志物成对框基因6(PAX6),E-钙黏蛋白(ECAD)、N-钙黏蛋白(NCAD),细胞骨架标志物F-肌动蛋白(F-actin)和极性标志物蛋白激酶λ(PKCλ)等指标的表达水平以验证体外神经管模型;采用VPA的药物作用试验对各实验组(VPA 0.1、1和10μmol/L组)及对照组进行进一步的验证。结果免疫荧光染色法检测结果表明,多能性标志物OCT4的表达水平减少;神经特性标志物PAX6的表达水平增加;ECAD与NCAD的表达模式存在时空转变;F-actin和PKCλ均集中表达于细胞顶部;对照组、VPA 0.1、1和10μmol/L组的细胞直径分别为(90.81±0.88)μm、(87.14±1.35)μm、(77.19±1.34)μm和(75.63±0.86)μm, VPA 10μmol/L及1μmol/L组与对照组之间差异均具有统计学意义(P均<0.05);VPA 1μmol/L组中F-actin和PKCλ的表达均未聚集在细胞顶面。结论成功建立人多能干细胞来源的体外神经管模型;VPA对体外神经管具有呈剂量依赖性的生长抑制作用;VPA通过影响细胞骨架功能和细胞极化导致lumen形成失败,是其导致神经管畸形的潜在疾病发生机制。

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来源
《临床检验杂志》 |2022年第6期|409-414|共6页
作者
张小佐; 霍海芹; 王艳; 冯浩洋; 林颖; 许争峰;
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作者单位

南京医科大学附属妇产医院&南京市妇幼保健院产前诊断中心;

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正文语种 chi
中图分类实验室诊断;
关键词
人多能干细胞; 神经管模型; 丙戊酸钠; 神经管畸形;

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