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新生大鼠心肌细胞的分离与培养

         

摘要

目的 探讨新生大鼠心肌细胞分离与培养的条件和方法,建立简单、可靠的原代心肌细胞培养方法.方法 新生SD乳鼠10只,开胸取心剪碎后,胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化心肌组织,差速贴壁法纯化心肌细胞.倒置荧光相差显微镜下连续观察15d心肌细胞形态特征及变化.用0.4%锥虫蓝染色测心肌细胞存活率,记录心肌细胞搏动次数.结果 心肌细胞24 h基本贴壁并伸出伪足,出现自发性搏动,72h后心肌细胞逐渐形成细胞簇,并呈现部分同步搏动,之后心肌细胞连接成片生长.心肌细胞存活率为96.5%,培养72 h至第15天内心肌细胞搏动次数无差异(P>0.05).结论 用该法分离与培养新生大鼠心肌细胞,操作简单且稳定可靠,心肌细胞存活率较高.

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