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丙型肝炎病毒核心蛋白DNA结合区的测定

摘要

目的阐明丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的DNA结合特性及其意义.方法在大肠杆菌中表达谷甘肽转移酶(GST)融合HCV核心蛋白不同长度片段,并进行纯化.经聚丙烯酰胺凝胶电泳后,通过更换缓冲液的方法将这些蛋白片段相对固定在凝胶中,用Y-32P[4667-00091]ATP标记人工合成的DNA进行2次电泳,通过放射日显影检测核心蛋白的DNA结合区.结果 HCV核心蛋白N端第10~16位氨基酸残基和第46~70位氨基酸残基可独立地结台DNA.核心蛋白既能和单链DNA结台又能和双链DNA结合.对单双链DNA的结合域相同;对所结合的DNA序列无选择性.结论 HCV核心蛋白的N端含有两个DNA结合区.结合区序列与核内转移信号的部分重迭以及对结台靶DNA序列的非选择性可能是HCV核心蛋白具有多功能的基础.

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