△CREB真核表达载体的构建及对心肌细胞TNFα含量的影响

李茜; 余细勇; 周钢; 杨敏; 刘志敏; 邓春玉; 林曙光

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△CREB真核表达载体的构建及对心肌细胞TNFα含量的影响

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目的:构建ΔCREB的真核表达载体,观察其对TNFα等细胞因子的影响,探索心衰发生发展的始动因素.方法:利用穿梭质粒pAdTrack构建核转录因子ΔCREB的真核表达载体pAdTrack-ΔCREB,然后转染培养的乳鼠心肌细胞.将心肌细胞随机分为空白对照组、forskolin(10 μmol/L)组、转染组和转染后加forskolin组,观察各组心肌细胞ΔCREB的表达以及TNFα含量的变化. 结果:①定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)显示,ΔCREB/β-actin定量比值,转染组(1.001016±0.053520)明显高于对照组(0.761322±0.044090),(P＜0.01);免疫细胞化学检测心肌细胞ΔCREB蛋白标记阳性率,转染组(28.88%+9.05%)亦明显高于对照组(6.63%+3.38%),(P＜0.01).②细胞上清TNFα含量,转染后加forskolin组(34.36 pmol/L±12.17 pmol/L)明显高于对照组(16.91 pmol/L±5.16 pmol/L),(P＜0.01).结论:转染ΔCREB可显著升高心肌细胞TNFα含量.cAMP介导的CREB转录激活作用促进了TNFα基因表达,可能在心力衰竭的发展中起重要作用.

著录项

来源
《中国病理生理杂志》 |2002年第10期|1201-1205|共5页
作者
李茜; 余细勇; 周钢; 杨敏; 刘志敏; 邓春玉; 林曙光;
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作者单位

浙江省人民医院工作,杭州,310014;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080;

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正文语种 chi
中图分类心脏的机能;
关键词
肿瘤坏死因子; 心力衰竭; 转录因子; 心肌;

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