双位点核酶对2.2.15细胞中HBV基因表达抑制作用

李谨革; 周永兴; 连建奇; 贾战生; 冯志华; 白宪光

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目的:观察针对HBV C区双位点核酶在细胞内阻断C区基因表达的作用.方法:采用亚克隆技术,从pGEM-Rz123(含针对HBV C区双位点核酶)上切下双位点核酶的片段,定向克隆于真核表达载体pBBS212中.利用lipofectamine介导,将重组质粒pBBS212-Rz及pBBS212转染2.2.15细胞中,采用打点杂交技术观察核酶的表达,采用ELISA、免疫荧光、免疫组化、图象分析法、Western blot分析HBe/HBcAg及HBsAg的表达.结果:转染的2.2.15细胞经潮霉素B和G418筛选2周后,打点杂交证实可表达针对HBV C 区双位点核酶.ELISA方法检测发现核酶抑制HBeAg表达48.6%,用免疫荧光、免疫组化、图象分析法、Western blot分析证实核酶可抑制HBV细胞内表达.结论:该双位点核酶通过针对HBV C区基因的剪切作用,阻断C区基因表达,抑制了HBe/HBcAg的表达.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2000年第9期|792-796|共5页
作者
李谨革; 周永兴; 连建奇; 贾战生; 冯志华; 白宪光;
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作者单位

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038;

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正文语种 chi
中图分类乙型肝炎;基因表达;
关键词
RNA,催化; 基因治疗; 肝炎病毒,乙型;

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