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重组截短型ELR1蛋白在昆虫表达系统中的分泌表达与结晶

         
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摘要

The receptor for equine infectious anemia virus (EIAV) was identified as equine lentiviral receptor 1 (ELR1) and classified as a member of the tumor necrosis factor receptor (TNFR) family according to its sequence characteristics. Differing from human, simian and feline immunodeficiency viruses, which need co-receptors for efficient infection, EIAV completes its infection by the solo ELR1. To understand the function of ELR1 and its interaction with EIAV, prokaryotic, eukaryotic expression and crystallization of out-membrane region of this receptor was employed in this study for further structural dissection of the protein by X-diffraction and functional analysis.%为获得马传染性贫血病毒单一受体(ELR1)的结晶体,本研究通过PCR方法获得ELR1胞外区基因片段,利用基因重组技术构建包含ELR1胞外区基因的重组杆状病毒表达质粒(Bacmid-ELR1).将其转染至昆虫细胞sf9中进行蛋白表达,western blot检测结果显示ELR1胞外区截短型重组蛋白在昆虫表达系统中获得表达.目的蛋白经亲和层析和凝胶过滤方法纯后化,通过多组结晶条件筛选获得了ELR1胞外区重组蛋白结晶体.本研究为ELR1立体结构和功能的解析提供了重要基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2011年第6期|427-430|共4页
  • 作者

    孙佩龙; 郝飞飞; 吕淑霞; 刘新奇; 周建华; 林跃智;

  • 作者单位

    沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁沈阳110161;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

    沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁沈阳110161;

    南开大学生命科学学院,天津300071;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    马传染性贫血病毒单一受体; 昆虫表达系统; 纯化; 结晶;

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