猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

张朝霞; 刘长明; 危艳武; 袁婧; 黄立平

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利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测.昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化,制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性.用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA时150份血清进行平行检测符合率为95.3%,特异性为91.2%,敏感性为96.5%;与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉反应.组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%～4.8%和8.9%～9.9%;置20℃保存12个月稳定.试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8周～9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1 085份血清抗体检测,阳性率为73.6%.研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2008年第7期|548-551578|共5页
作者
张朝霞; 刘长明; 危艳武; 袁婧; 黄立平;
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作者单位

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;

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正文语种 chi
中图分类 S852.659.2;
关键词
猪圆环病毒2型; 重组蛋白; 间接ELISA; 抗体检测试剂盒;

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