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口蹄疫病毒VP2基因的原核表达及抗原性检测

         

摘要

将口蹄疫病毒VP2基因连接到原核表达载体pPROEXTM HTb上,获得重组质粒pPR-VP2.将此质粒转化感受态菌DH5α中,经终浓度为1.0mmol/L的IPTG诱导,1h~6h依次收集菌液,SDS-PAGE电泳分析,在4h后表达量可达到高峰.经过软件分析,表达产物占总菌体蛋白的23.1%,大小为33Ku左右.根据Ni-NTA纯化系统说明操作,获得较纯的VP2融合蛋白.以牛抗O型口蹄疫病毒血清为第一抗体,通过Western blot和Dot ELISA鉴定,纯化后的VP2融合蛋白可以与牛抗O型口蹄疫病毒血清发生特异性反应.

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