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美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立

         

摘要

参照美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列,设计引物和探针,并建立其荧光RT-PCR检测方法,以检测严重危害我国养猪业的此型PRRSV.该法能检测到1 TCID50的PRRSV.用此法检测猪瘟病毒、乙脑病毒、伪狂犬病毒、马动脉炎病毒、圆环病毒Ⅱ型和MARC145细胞的RNA,结果均为阴性.对126份临床样品进行检测应用,检测结果(7份阳性,119份阴性)与病毒分离完全符合.此法中的阳性对照为体外转录的dsRNA,具有高度的稳定性,解决了此类检测方法所用的RNA阳性对照所普遍存在的易于降解的难题.

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