猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达和间接ELISA方法的建立

王麒文; 张鹤晓; 高志强; 林祥超; 张乐萃

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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达和间接ELISA方法的建立

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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒JX株编码N蛋白的ORF7基因序列设计特异性引物.采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因片段(367 bp),将其克隆于表达载体pET-32a上.测序验证后将重组质粒pET-32a-JX-N转入宿主菌Rosetta,经0.7 mmol/L IPTG诱导,SDS-PAGE显示外源基因编码的重组N蛋白在宿主菌中表达效率较高.Western-Blot试验结果显示,重组N蛋白具有反应原性.将纯化的重组N蛋白包被酶标板,建立并优化了能够用于PRRSV抗体检测的间接ELISA方法.

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来源
《中国兽医杂志》 |2015年第11期|49-52|共4页
作者
王麒文; 张鹤晓; 高志强; 林祥超; 张乐萃;
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作者单位

青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;

北京出入境检验检疫局,北京朝阳100026;

北京出入境检验检疫局,北京朝阳100026;

青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;

青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;

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正文语种 chi
中图分类猪瘟病毒;
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒; N蛋白; 重组表达; 间接ELISA;

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