稳定表达犬瘟热病毒基质蛋白的细胞系Vero-SLAM-M的构建

林佳旭; 王介淞; 杨雅明; 黄娟; 单虎

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稳定表达犬瘟热病毒基质蛋白的细胞系Vero-SLAM-M的构建

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为了建立稳定表达犬瘟热病毒基质蛋白(M)的细胞系,从犬瘟热病毒狐狸源分离毒株SD16F中扩增出M基因,将其克隆至真核表达质粒pCI-neo的Xho Ⅰ/NotⅠ位点处.重组质粒经PCR、Xho L/NotⅠ双酶切及测序鉴定后转染Vero-SLAM细胞,利用G418抗性压力筛选阳性细胞,并采用RT-PCR及间接免疫荧光试验(IFA)鉴定转染细胞中M蛋白的表达情况.结果表明,成功构建了重组质粒pCI-neo-M,瞬时及稳定转染Vero-SLAM细胞后,RT-PCR和IFA能够检测到M基因的转录和表达,且G418筛选后细胞与其亲本Vero-SLAM细胞生长特性基本一致,表明获得1株能稳定表达M蛋白的细胞系,命名为Vero-SLAM-M.

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来源
《中国兽医杂志》 |2020年第5期|20-24封3|共6页
作者
林佳旭; 王介淞; 杨雅明; 黄娟; 单虎;
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作者单位

青岛农业大学动物医学院山东青岛266109;

青岛农业大学动物医学院山东青岛266109;

青岛农业大学动物医学院山东青岛266109;

青岛农业大学动物医学院山东青岛266109;

青岛农业大学动物医学院山东青岛266109;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类犬;
关键词
犬瘟热病毒; 基质蛋白; Vero-SLAM-M细胞系;

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