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雏鸡小肠肠球菌分离鉴定及定量PCR检测方法的建立

         

摘要

为了确定雏鸡感染的病原菌,本试验剖检病弱雏鸡,取肝脏分离病原菌,根据菌落菌体形态及16S rRNA序列分析对分离菌株进行鉴定,并建立定量PCR检测方法。结果显示,病雏鸡肝脏充血出血,卵黄吸收不良。显微镜下,肝脏组织充血,脂肪变性。分离菌株在营养琼脂菌落细小,七叶苷培养基呈棕黑色,革兰染色阳性。16S rRNA序列比对与小肠肠球菌同源性为99.36%,鉴定为小肠肠球菌。定量PCR检测方法特异性强,只有小肠肠球菌出现扩增峰,与其他对照菌株无交叉;灵敏度高,对小肠肠球菌的最低检出量均为64CFU/mL;重复性好,Ct值变异系数在3.5%之内。因此,本试验确定了雏鸡小肠肠球菌感染,并建立了快速定量PCR检测方法,为小肠肠球菌感染诊断和防治提供了有价值的参考和有效的手段。

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