建立一种反向斑点杂交法检测肺炎支原体23S rRNAV区A2063G基因突变的方法

沈俊娅; 范骏

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目的建立检测肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)23S rRNA V区2063基因型的反向斑点杂交方法,并与PCR产物直接测序法的结果进行比较分析。方法19例自临床咽拭子标本分离培养的MP,用自行设计的反向斑点杂交法检测23S rRNA V区2063基因型,同时对相应序列测序分析。抽提标准菌株FH和127份经PCR测定MP阳性的临床标本基因组DNA,用MP阴性的基因组DNA抽提物5份作阴性对照,用反向斑点杂交法检测23S rRNA V区2063基因型。结果19例分离培养的MP,经反向斑点杂交法检测15株有23S rRNA V区基因A2063G位点突变;4株为2063A,与测序结果一致(Kappa一致性检验,P>0.05)。经反向斑点杂交法检测,127份MP阳性的基因组DNA抽提物中有122份标本为A2063G位点突变,标准菌株FH和2份DNA抽提物的2063位点碱基为A,还有3份抽提物标本的2063位点碱基既有A又有G,5份阴性对照均无显色。结论反向斑点杂交方法能快速、准确检测临床MP 23S rRNA V区2063基因型。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2009年第11期|1033-1036|共4页
作者
沈俊娅; 范骏;
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作者单位

浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室;

浙江杭州310003;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R375.2;
关键词
肺炎支原体; 聚合酶链反应; 基因突变; 反向斑点杂交法;

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