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猪精子α-L-岩藻糖苷酶活性定位及其在精-卵结合及受精中的作用

         

摘要

本试验旨在证明猪精子中α-L-岩藻糖苷酶的存在及其在受精中的作用。猪精子α-L-岩藻糖苷酶活性用分光光度计405nm波长测定,并在受精液中添加α-L-岩藻糖苷酶特异抑制因子(deoxyfuconojirimycin hydrochloride,DFM-H)或特异单糖(L-岩藻糖)来检测对该酶活性的影响。结果显示,猪精子含有明显的α-L-岩藻糖苷酶活性。当精子用10μmol/L钙离子载体A23187处理1h后,有70%精子发生顶体反应和72%的酶活性被释放。体外受精液中添加250μmol/LDFM-H或30mmol/L L-岩藻糖,可分别抑制66%或63%的精子α-L-岩藻糖苷酶活性,并相应抑制37%或36%的透明带表面精子结合数及56%或67%的精子侵入卵数。这些结果证明,猪精子α-L-岩藻糖苷酶主要分布于精子顶体中,特异地作用于透明带寡糖链中的α-L-岩藻糖残基,而参与精子穿入透明带的过程。

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