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荔枝胚性悬浮细胞系的快速建立及其体胚植株的再生

         

摘要

荔枝幼胚诱导的胚性培养物在低糖条件下连续继代4~6次左右,可筛选到颗粒细小、不含原胚的松散型胚性愈伤组织;以这种松散的胚性愈伤组织作为起始材料,在附加2,4-D2mg/L或2,4-D2mg/L、KT1mg/L、AgNO35mg/L的MS液体启动培养基上振荡培养(100~120r/min)10~14d,即可建立起分散性良好的胚性悬浮细胞系。采用激素减半的2种启动培养基交替继代培养或周期性固体-液体轮回培养,可以长期保持胚性悬浮细胞系。荔枝胚性悬浮细胞在附加NAA0.1mg/L、KT或Ze5mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖50g/L、琼脂10g/L的MS固体培养基上诱导体胚,25~40d后可形成大量胚状体,诱导体胚数量达10,000个/gFW以上。经过成熟培养后,正常的体胚75%以上萌发再生完整植株。

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